芦韦华
- 作品数：10 被引量：43H指数：5
- 供职机构：新疆农业大学农学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金新疆维吾尔自治区自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 理化条件对新疆紫草毛状根培养及紫草素含量的影响被引量：10
- 2012年
- 以发根农杆菌诱导的新疆紫草毛状根为试验材料,采用二阶段培养法,分别考察了NH4NO3、培养基、转速、温度、蔗糖对毛状根生长的影响及培养方式、酸水解酪蛋白对毛状根生产的影响。结果表明:毛状根在MS无铵液体培养基中生长速度较MS快了近1倍,第15天时毛状根的生长量达峰值,增殖8倍;在SH无铵培养基、转速为(120±5)r/min、温度为(25±1)℃时毛状根增殖倍数最大,为9.34倍。蔗糖质量浓度对毛状根的生长增殖影响不大;液体培养方式的紫草素及其衍生物含量(1.05%)远远高于固体培养(0.33%),是后者的3倍;添加0.5g/L的酸水解酪蛋白的其紫草素及衍生物含量为1.29%,较对照(1.17%)增加了10.3%。本研究为今后利用新疆紫草毛状根规模化生产提供了理论依据。
- 芦韦华陈永芳王芳代宁波郝爱花李翠芳嘉素尔
- 关键词：新疆紫草毛状根
- 高效液相色谱法测定新疆紫草毛状根中乙酰紫草素的含量被引量：8
- 2010年
- 目的:建立高效液相色谱法(HPLC)测定新疆紫草毛状根中乙酰紫草素含量的方法。方法:采用YMC ODS-A C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相为乙腈-水-甲酸(700∶300∶0.5);检测波长275nm;流速1.0mL·min-1;柱温35℃。结果:乙酰紫草素对照品在51.55～1031.0mg·L-1与峰面积线性关系良好,相关系数r=0.9999,平均回收率为99.81%,RSD2.00%(n=9)。结论:高效液相色谱法操作简单快速,重复性好,可用于新疆紫草毛状根中乙酰紫草素含量的测定。
- 贺金华芦韦华王芳
- 关键词：新疆紫草毛状根紫草色素高效液相色谱法
- 新疆紫草快繁技术研究被引量：2
- 2010年
- 【目的】建立新疆紫草组培快繁技术体系。【方法】以新疆紫草无菌苗的茎尖为外植体,筛选适合茎尖萌发、增殖、生根的激素组合。【结果】茎尖最佳萌发培养基为MS+TDZ 1.0 mg/L,其萌发率为100%。芽增殖培养基为MS+TDZ 1.0 mg/L,芽增殖倍数为13.50倍,继代壮苗培养基为MS+NAA 0.3 mg/L+6-BA 0.5mg/L,生根培养基为MS+NAA 0.1 mg/L,生根率为84%。降低6-BA浓度到0.05 mg/L可大幅降低玻璃化发生率。经过此培养基继代后,再在原生根配方中生根,生根率提高到95.32%。【结论】茎尖是新疆紫草快繁的最佳外植体。
- 郝爱花芦韦华陈永芳程琼浩孙新华王芳
- 关键词：新疆紫草离体快繁玻璃化
- 新疆紫草遗传转化中的抗生素敏感性研究
- 2008年
- 以新疆紫草为材料，采用不同浓度梯度抗生素处理未转化和转化子叶的方法，研究了不同浓度的卡那霉素和头孢噻肟钠对新疆紫草子叶出愈和发根的影响。结果表明，卡那霉素对新疆紫草子叶的筛选适宜浓度为60mg／L，头孢噻肟钠对新疆紫草子叶除菌适宜浓度为6.0～1000mg／L。抑菌继代周期为12d。
- 陈永芳芦韦华代宁波郝爱花任承刚王芳
- 关键词：新疆紫草抗生素发根农杆菌抑菌
- 不同培养因子对新疆紫草种子根生长的影响
- 2008年
- 将新疆紫草无菌苗根分别接种在含不同培养因子的培养基中进行液体培养，观察培养基、pH值、有机物、L-苯丙氨酸对根的生长量、培养液颜色及OD值的影响。结果表明：①在SH培养基中，且pH为4．5时根相对生长率较M9大。②M9培养基附加30g／L蔗糖有利于紫草根生长，蔗糖浓度为30-60g／L促进紫草素合成。③在M9培养基上添加低浓度的CuCl2有利于根的生长。④在M9培养基上添加White有机成份及肌醇（200mg／L）均对根的生长无促进作用。⑤M9添加L-苯丙氨酸对种子根的生长无明显促进作用。⑥根的生长周期为9-12d。适宜根生长条件的摸索为新疆紫草毛状根及紫草素的生产条件的确定提供了依据。
- 韩建欣陈芬陈永芳芦韦华李翠芳王芳
- 关键词：新疆紫草
- 培养条件对新疆紫草毛状根生长及紫草素含量的影响被引量：6
- 2012年
- 以发根农杆菌诱导的新疆紫草毛状根为试验材料,采用二阶段液体培养法,首次建立了新疆紫草毛状根培养技术体系。结果显示:采用SH无铵培养基、pH 5.8时有利于毛状根的生长。培养12d时毛状根的增殖倍数达最高,平均10.26倍;毛状根生产的继代周期为25～30d;4种树脂吸附的紫草素及其衍生物含量均较对照(不添加树脂)高,以NKA-9所吸附的紫草素及其衍生物含量最高,为2.38%,较对照提高0.97倍。培养10d时添加NKA-9树脂,紫草素及其衍生物含量平均为3.64%,是对照的3.08倍。研究表明,生长阶段采用液体培养可以使新疆紫草毛状根快速增殖,生产阶段添加大孔吸附树脂能够提高紫草素及其衍生物含量。
- 芦韦华潘颀王芳陈永芳代宁波
- 关键词：新疆紫草毛状根大孔吸附树脂
- 新疆紫草毛状根培养及紫草素合成条件研究
- 芦韦华
- 关键词：新疆紫草毛状根大孔吸附树脂紫草素RP-HPLC
- 发根农杆菌转化新疆紫草的PCR检测及序列分析
- 2009年
- 以发根农杆菌MSU440菌株转化的新疆紫草毛状根为材料,设计了rolC基因的特异性引物,应用PCR技术,扩增得到了600 bp左右的特异性核苷酸片段。进行双向测序分析,扩增的基因序列全长626 bp,含rolC基因的编码区540 bp,编码180个氨基酸组成的蛋白。正向测序rolC基因与GENEBENK已发表的序列相比较,核苷酸序列的同源性达到100%,氨基酸同源性高达100%;反向测序中,同源性达到97%。证实并确认了新疆紫草毛状根的真实性,为进一步利用新疆紫草毛状根生产次生代谢产物研究奠定了物质基础。
- 芦韦华陈永芳代宁波李翠芳郝爱花王芳
- 关键词：新疆紫草发根农杆菌ROLC基因
- 新疆紫草毛状根的诱导及培养被引量：22
- 2008年
- 将处于对数生长期（A600为0.5）的发根农杆菌MSU440、A4、R1000、15834、1025和R1601与新疆紫草子叶外植体共培养.结果表明：（1）发根农杆菌不同菌种对转化率有显著影响,供试6个菌种中只有MSU440菌株获得转化株.PCR及序列分析表明发根农杆菌Ri质粒的rolC基因已在新疆紫草毛状根基因组中整合并得到表达,转化率达4.5%.（2）子叶较真叶的不定根发生率高,且生根持续时间长.（3）在B5无铵无激素固体培养基上,毛状根分支多且根较长,达2-3 cm,毛状根鲜重月平均增殖达7-9倍,是固体培养毛状根的适宜培养基.（4）毛状根在MS无铵无激素液体培养基中培养12 d时,毛状根鲜重平均增殖达12倍,MS无铵液体培养基有利于毛状根的扩大生产.首次获得了激素自主、快速伸长生长、多分支、多根毛的新疆紫草毛状根株系,初步建立了新疆紫草毛状根诱导体系,为大规模培养、生产紫草素奠定了基础.
- 陈永芳芦韦华王芳麻浩李建贵
- 关键词：新疆紫草发根农杆菌毛状根PCR检测
- RP-HPLC法同时测定新疆紫草毛状根中乙酰紫草素和β,β′-二甲基丙烯酰紫草色素的含量被引量：5
- 2010年
- 目的:建立高效液相色谱法(HPLC)测定新疆紫草毛状根中乙酰紫草素和β,β′-二甲基丙烯酰紫草色素含量的方法。方法:采用YMCODS-AC18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相为乙腈-水-甲酸(700:300:0.5);检测波长为275nm;流速为1.0mL.min-1;柱温为35℃。结果:β,β′-二甲基丙烯酰紫草素对照品浓度在10.32～206.4μg.mL-1范围内与峰面积线性关系良好,r=0.9999;平均回收率为99.6%,RSD为1.7%(n=9)。乙酰紫草素对照品浓度在51.55～1031.0μg.mL-1范围内,与峰面积线性关系良好,r=0.9999;平均回收率为99.8%,RSD为2.0%(n=9)。优化培养的毛状根中不含从新疆紫草根中分离得到的紫草素;乙酰紫草素的含量明显高于β,β′-二甲基丙烯酰紫草素的含量。结论:高效液相色谱法操作简单快速,重复性好,可用于新疆紫草毛状根中乙酰紫草素和β,β′-二甲基丙烯酰紫草色素含量的测定。
- 贺金华芦韦华王芳毛艳严欢
- 关键词：新疆紫草毛状根紫草素
