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骨髓间充质干细胞Hey1基因表达水平荧光定量RT-PCR方法的建立被引量：2: 2010年; 目的:建立骨髓间充质干细胞中Notch信号通路靶基因Hey1表达水平的荧光定量RT-PCR方法。方法:培养骨髓间充质干细胞(C_2C_(12)),提取总RNA,验证内参基因β-actin和目的基因Hey1的扩增效率,优化PCR条件,分析扩增曲线、融解曲线,凝胶电泳验证定量PCR产物。结果:内参基因β-actin和目的基因Hey1扩增效率一致(扩增曲线斜率差<0.1),提示可以使用比较Ct法对Hey1进行相对定量分析;扩增曲线、融解曲线及凝胶电泳结果提示PCR产物特异性好。结论:本研究所建立的用于Hey1基因表达分析的定量RT-PCR检测方法,准确可靠,可用于Bmp9和Notch信号通路的研究。; 刘强翁亚光唐敏罗敏; 关键词：骨髓间充质干细胞荧光定量RT-PCR

Notch信号通路在骨形态发生蛋白9诱导的多潜能干细胞成骨分化中的作用被引量：9: 2010年; 目的初步探讨Notch信号通路对骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导多潜能干细胞成骨分化的作用和机制。方法腺病毒表达载体(AdBM P9/AdGFP、AdHey1/AdRFP)和BMP9/GFP条件培养基处理C2C12细胞,细胞化学染色和活性定量检测早期成骨标志物碱性磷酸酶(ALP),定量RT-PCR检测Notch信号通路靶基因Hey1,以了解Hey1在AdBMP9介导的成骨分化作用中的表达和作用;采用细胞密度实验和Notch信号通路抑制剂(DAPT)检测Notch信号通路对成骨的影响;在AdBMP9/AdGFP处理下,检测细胞上Notch信号通路配体、受体表达变化。结果 AdBMP9作用下,1、3、5、7dALP活性持续增加(P<0.05);Hey1一过性升高,其与AdBMP9呈剂量依赖性;Hey1可协助BMP9成骨(P<0.05),不能单独起效。80%和40%细胞密度组ALP量和Hey1表达均高于20%组(P<0.05);DAPT组中ALP活性明显降低(P<0.05);在AdBMP9作用下,Notch信号通路配受体有不同程度的上调,其中受体Notch4和配体Jag-1上调最为明显(分别为11.3倍和5.1倍)。结论 Notch信号通路参与BMP9介导的多潜能干细胞成骨分化,其可能的机制是BMP9通过诱导Notch通路配体、受体表达上调使Hey1升高,后者协同成骨。; 刘强翁亚光徐道晶罗敏唐敏; 关键词：NOTCH信号通路多潜能干细胞 DAPT

miRNA-30a／30e腺病毒表达载体的构建: 2013年; 目的构建稳定表达成熟miRNA-30a和miRNA-30e腺病毒表达载体。方法小鼠基因组中分别扩增出带有酶切位点的mmu-miR-30a、mmu-miR-30e目的基因,目的基因连接到穿梭质粒pSES-HUS,带有目的基因的穿梭质粒重组到骨架质粒AdEasy1上,重组质粒转染到Hek-293细胞中包装成腺病毒载体,反复扩增之后获得高滴度的pAd-mmu-miR-30a、pAd-mmu-miR-30e腺病毒。用目的腺病毒分3组(RFP对照组,miR-30a组,miR-30e组)感染小鼠Mefs细胞,用荧光定量PCR方法检测mmu-miR-30a、mmu-miR-30e表达情况。结果分别扩增出带有酶切位点的357 bp mmu-miR-30a,324 bp mmu-miR-30e,并成功连接到pSES-HUS上,进一步与AdEasy1重组,包装得到腺病毒表达载体,通过荧光定量PCR检测,Mefs细胞中mmu-miR-30a升高26.46±7.46倍,mmu-miR-30e升高2.76±0.25倍。结论成功构建了成熟miRNA的腺病毒表达载体。; 刘强顾金金罗敏施琼; 关键词：荧光定量PCR

2型糖尿病合并高血压患者血清脂联素和内脏脂肪素水平的变化被引量：8: 2011年; 目的:了解2型糖尿病合并高血压患者血清脂联素和内脏脂肪素的变化,探讨脂联素和内脏脂肪素与2型糖尿病合并高血压的相关性.方法:选取高血压患者40例,2型糖尿病患者38例,2型糖尿病合并高血压患者40例,健康对照者40例作为研究对象,测定其血清脂联素和内脏脂肪素水平,同时测定血压、血糖、血脂和体质量指数等指标,并分析以上指标与脂联素和内脏脂肪素的关系.结果:单纯2型糖尿病组和单纯高血压组内脏脂肪素水平明显高于正常对照组,分别为(18.26±1.22)ng/mL,(17.31±1.26)ng/mL和(13.32±1.31)ng/mL(p<0.05);2型糖尿病合并高血压组(24.99±1.36)ng/mL又明显高于单纯2型糖尿病组和单纯高血压组.2型糖尿病组和高血压组脂联素水平明显低于正常对照组,分别为(8.75±1.29)μg/mL,(9.71±1.28)μg/mL和(12.67±1.48)μg/mL(p<0.05);2型糖尿病合并高血压组(5.73±1.23)μg/mL又明显低于单纯2型糖尿病组和单纯高血压组.2型糖尿病组和高血压组的脂联素和内脏脂肪素水平差异不具有统计学意义(p>0.05).相关分析显示2型糖尿病合并高血压患者空腹血清内脏脂肪素与腰臀比、甘油三酯和体质量指数呈正相关(r=0.431,0.371,0.501,p<0.05),与高密度脂蛋白呈负相关(r=-0.610,p<0.05);血清脂联素与腰臀比、体质量指数、收缩压和甘油三酯呈负相关(r=-0.6 1 2,-0.3 9 3,-0.4 5 5,-0.3 9 1,p<0.0 5).多元逐步回归分析显示,腰臀比是内脏脂肪素水平的独立相关因素(t=2.0 9 0,p<0.0 5);腰臀比、高密度脂蛋白是脂联素水平独立相关因素(t=-2.7 4 1,3.9 6 8,p<0.0 5).结论:2型糖尿病组和高血压组血清内脏脂肪素水平升高,而脂联素水平降低.2型糖尿病合并高血压组血清内脏脂肪素水平更高,脂联素水平更低.该结论提示脂联素和内脏脂肪素的表达可能与高血压和2型糖尿病的发生发展有密切的关系.; 刘晓宇翁亚光张燕罗敏; 关键词：脂联素内脏脂肪素高血压糖尿病 2型糖尿病合并高血压

表没食子儿茶素没食子酸酯调节Treg/Th17失衡预防压力超负荷性心肌肥厚: 第一部分：EGCG可预防压力超负荷性心肌肥厚的发生　　目的：　　研究表没食子儿茶素没食子酸酯（Epigallocatechin-3-gallate,EGCG）是否可以防止压力超负荷性心肌肥厚的发生。　　方法：　　1、以3...; 罗敏; 关键词：压力超负荷性心肌肥厚表没食子儿茶素没食子酸酯

microRNA-450A-3p通过下调Bub1基因抑制成纤维细胞增殖并影响小鼠虫期胚胎发育的机制研究: 胚胎的早期发育中，受精卵的正常分裂是胚胎发育的关键环节。受精卵在早期进行着旺盛的有丝分裂，其染色体能够正确分离到后代的两个子细胞中是有丝分裂正常的重要基础。染色体如果发生异常分离，有可能出现染色体数目异常、染色体不稳定性...; 罗敏; 关键词：胚胎发育基因调控染色体异常成纤维细胞

microRNA-450a-3p通过下调Bubl基因抑制成纤维细胞增殖并影响小鼠早期胚胎发育的机制研究: 胚胎的早期发育中，受精卵的正常分裂是胚胎发育的关键环节。受精卵在早期进行着旺盛的有丝分裂，其染色体能够正确分离到后代的两个子细胞中是有丝分裂正常的重要基础。染色体如果发生异常分离，有可能出现染色体数目异常、染色体不稳定性...; 罗敏; 关键词：MIRNAS BUB1 MIMIC 增殖显微注射; 文献传递

利妥昔单抗与传统免疫抑制剂治疗特发性膜性肾病的疗效及安全性的对比: 目的使用网状meta分析(Networkmeta-analysis,NMA)进行全面分析和比较，以对比利妥昔单抗和传统免疫抑制剂治疗特发性膜性肾病(Idiopathicmembranousnephropathy,IMN)...; 罗敏; 关键词：特发性膜性肾病免疫抑制剂安全性

雌激素缺乏对痴呆小鼠脑内葡萄糖代谢及学习记忆影响的机制研究: ＜正＞研究表明雌激素对阿尔茨海默病（AD）的认知功能有重要影响,本研究拟探讨雌激素缺乏加重AD模型小鼠认知功能障碍的分子机制。对雌性3月龄APP/PS1双转基因AD小鼠行双侧卵巢切除（AD-OVX）,以假手术AD小鼠（A...; 贺桂琼罗敏杜烨湘赵月阳汪克建; 文献传递

MicroRNA-450a-3p通过抑制Bub1基因的表达调控小鼠细胞增殖和胚胎发育: 2012年; 目的:探讨microRNA-450a-3p(miR-450a-3p)对小鼠细胞增殖和胚胎发育的调控是否通过抑制Bub1基因的表达实现。方法:用萤光素酶报告基因实验检测miR-450a-3p能否特异性结合于Bub1基因的3’-非翻译区(untranslated region,UTR);用Western blotting和实时荧光定量RT-PCR检测miR-450a-3p对Bub1蛋白和mRNA表达;分别通过MTT、Hoechst染色、流式细胞术等分析miR-450a-3p对小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)增殖、凋亡和细胞周期等生物学功能的调控;利用染色体核型分析技术检测miR-450a-3p对MEFs染色体数目的影响。结果:miR-450a-3p能与靶基因Bub1的3’-UTR结合,在翻译水平抑制MEFs中Bub1的表达,然而其转录水平的表达却不受影响。miR-450a-3p通过下调靶基因Bub1的表达,抑制MEFs的增殖,促进细胞的凋亡;而且miR-450a-3p还能使大多数细胞停滞在G1/G0期,使细胞分裂受阻,导致细胞染色体数目异常。结论:miR-450a-3p能够调控靶基因Bub1的表达,抑制MEFs增殖,并最终影响小鼠胚胎的发育。; 刘晨杨丹丹蒋凤兵白慧丽李宝林罗敏湛晓琴施琼; 关键词：小鼠胚胎成纤维细胞胚胎

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罗敏

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