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共刺激分子配体B7-DC基因真核表达载体和转基因细胞的构建: 2006年; 目的:克隆小鼠B7-DC基因,并构建含该基因的真核表达载体pEF6/-B7-DC-V5His,证明该基因在CHO细胞中的表达方式,为建立B7-DC的转基因小鼠打下基础。方法:从小鼠胸腺中抽提总RNA为模板,通过RT-PCR技术,扩增出B7-DC编码区片段。按常规方法克隆进pEF6V5His载体中,重组质粒经鉴定后采用脂质体法转染CHO细胞,48小时后进行间接免疫荧光实验,72小时后用blasticidin进行筛选,挑选出能稳定表达B7-DC的细胞株。结果:已成功克隆小鼠B7-DC基因并构建了用于表达B7-DC基因的真核表达载体,经间接免疫荧光实验(IFA)证明,该基因在CHO细胞中得到表达。经Western blot检测表明筛选出的转基因细胞稳定表达了B7-DC基因。结论:构建了用于表达B7-DC基因的真核表达载体pEF6/-B7-DC-V5His,并能在CHO细胞中稳定表达目的基因,为该基因功能的后续研究奠定了基础。; 岳挺孙强章蓉曹慧刘进董娟李厚达; 关键词：共刺激分子真核表达

Klotho基因在骨质疏松大鼠模型中的表达: 研究了卵巢摘除致雌性大鼠骨质疏松过程中 Klotho 基因表达的变化,探讨雌激素缺失引起骨质疏松发生的可能分子机制.摘除卵巢并喂以特殊饲料致大鼠骨质疏松后,分别测定骨质疏松组和对照组大鼠血清中的钙浓度与碱性磷酸酶含量,X...; 顾怡然章蓉竺淑佳张冬丽陈逸群孙丽娟梅兵; 关键词：去势大鼠骨质疏松; 文献传递

转基因SD大鼠构建技术的研究被引量：3: 2009年; 为构建转基因SD大鼠,用3种不同转基因构件p279-D5、p279-D5B、p279-SV40Tag对SD大鼠受精卵进行显微注射和胚胎移植试验,移植出生仔鼠经PCR检测筛选首建鼠。结果表明:以每只20 U的孕马血清促性腺激素和人绒毛膜促性腺激素的剂量组合对5周龄组大鼠达到了最佳超数排卵效果。3种构件经PCR检测后都获得了阳性后代,其外源基因整合率分别为p279-D51.4%(5/350)、p279-D5B 1.1%(3/274)和p279-SV40Tag 1.3%(3/230)。; 卫晓鸾章蓉金宇娟董娟徐桂芳沈倩张满仓李厚达孙强; 关键词：超数排卵显微注射

Klotho基因在高浓度Mg^(2+)致骨密度降低大鼠中的表达: 2009年; 目的研究高镁食物对雌性大鼠骨密度的影响,并通过比较卵巢摘除大鼠与高镁喂食大鼠体重、钙磷等矿物质含量以及Klotho基因表达情况,探讨镁过量引起骨密度变化可能的分子机制。方法实验大鼠分为4组,A、B组为假手术组,C、D组为卵巢摘除组;A、C组喂食基础饲料,B、D组喂食添加碳酸镁(180mg/kg体重)的基础饲料。3个月后分别测定各组大鼠血清中的钙磷浓度与ALP活性,X射线法检测两组大鼠股骨密度,实时荧光定量PCR法评估两组大鼠肾脏组织中Klotho基因的表达量。结果与喂食基础饲料的假手术组相比,其他3组大鼠的骨密度显著降低,血钙浓度明显升高;高镁食物导致大鼠肾脏组织中Klotho基因表达下调。结论高镁食物导致大鼠股骨密度下降,且Klotho基因的下调及其对相关信号通路的影响可能是其分子机制之一。; 竺淑佳顾怡然李世佳章蓉徐敏华梅兵; 关键词：骨密度 KLOTHO基因去势大鼠实时荧光定量PCR

Klotho基因在骨质疏松大鼠模型中的表达: 研究了卵巢摘除致雌性大鼠骨质疏松过程中Klotho基因表达的变化,探讨雌激素缺失引起骨质疏松发生的可能分子机制.摘除卵巢并喂以特殊饲料致大鼠骨质疏松后,分别测定骨质疏松组和对照组大鼠血清中的钙浓度与碱性磷酸酶含量,X射线...; 顾怡然章蓉竺淑佳张冬丽陈逸群孙丽娟梅兵; 关键词：去势大鼠骨质疏松实时荧光定量PCR 血钙浓度; 文献传递

Klotho基因在骨质疏松大鼠模型中的表达被引量：8: 2007年; 研究了卵巢摘除致雌性大鼠骨质疏松过程中Klotho基因表达的变化,探讨雌激素缺失引起骨质疏松发生的可能分子机制.摘除卵巢并喂以特殊饲料致大鼠骨质疏松后,分别测定骨质疏松组和对照组大鼠血清中的钙浓度与碱性磷酸酶含量,X射线法检测两组大鼠股骨密度,实时荧光定量PCR评估两组大鼠肾脏组织中Klotho基因的表达量.结果显示,与对照组相比,卵巢摘除后大鼠血钙浓度降低,碱性磷酸酶含量升高,骨密度减少,同时肾脏组织中Klotho基因表达显著下调.提示Klotho基因的下调及其对相关信号传导通路的影响可能是雌激素缺失导致骨质疏松的分子机制之一.; 顾怡然章蓉竺淑佳张冬丽陈逸群孙丽娟梅兵; 关键词：去势大鼠骨质疏松 KLOTHO基因骨密度实时荧光定量PCR

脑部特异表达rtTA调控元件转基因小鼠的构建被引量：1: 2008年; 为获得一种可调控基因表达系统,避免传统转基因在胚胎发育早期表达的毒性作用或致死作用以及基因过度表达而造成难于分析的复杂多表型,应用分子生物学方法将四环素反式激活子rtTA克隆到仅在脑部能被激活的钙调蛋白依赖性蛋白激酶CaM kinaseⅡα亚基启动子之后,将其通过显微注射方法注入FVB小鼠受精卵雄原核中获得四环素调控系统中反应组分的转基因工具鼠。经PCR及Southern检测,最终得到3只阳性小鼠(1公2母),表达检测结果显示,其中仅2只(1公1母)后代检测到rtTA表达产物。结果表明已成功构建四环素调控系统中的转基因工具鼠,为今后研究其他脑部基因功能提供便利。; 章蓉孙强徐桂芳董娟金宇娟江楠; 关键词：小鼠转基因 RTTA

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章蓉