秦智强
- 作品数：13 被引量：44H指数：4
- 供职机构：温州医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划上海市科学技术发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 外周血单个核细胞IFN-γ mRNA的测定及应用被引量：1
- 2003年
- 目的 研究鸭IFN γ(DuIFN γ)在感染及控制病毒过程中的作用和机制。方法 基于β actin的高度保守序列设计引物 ,通过RT PCR方法获得了 β actin的部分cDNA为看家基因 ,然后构建DuIFN γ靶片段的竞争性内参照 ,建立检测DuIFN γ基因转录的半定量竞争性RT PCR方法。结果 建立了检测DuIFN γ基因转录的半定量竞争性RT PCR方法 ,并检测了在PHA刺激下鸭外周血单核细胞IFN γmRNA动态变化 ,结果表明PHA刺激 2 4～ 36h ,DuIFN γmRNA转录量最高。以此方法对用DHBVpreSDNA或与IFN γDNA共免疫DHBV感染鸭进行了测定 ,结果表明IFN γ表达质粒作为DNA免疫佐剂 ,可以增强宿主IFN γ的应答。结论 IFN γ表达质粒为DNA疫苗的有效佐剂。DuIFN γ基因转录的半定量竞争性RT PCR方法为研究鸭IFN γ在DHBV感染及清除中的作用和机制奠定了基础。
- 龙健儿黄莉娜秦智强王文逸陈敏婕瞿涤
- 关键词：外周血单个核细胞MRNA乙型肝炎病毒
- 表皮葡萄球菌双组分调控系统的生物信息学分析被引量：7
- 2004年
- 应用序列同源性比较及功能域分析等生物信息学手段,从表皮葡萄球菌全基因组序列中发现16对双组分调控系统以及2个相对保守的功能域(HATPase_c和REC).通过与金黄色葡萄球菌和枯草杆菌中的双组分调控系统基因比较,预测表皮葡萄球菌中同源双组分调控系统基因可能具有参与调控细菌生长、生物膜形成、毒力因子表达等重要生物学功能.对16对双组分调控系统基因的2个保守性功能域进行空间结构模建,获得4个相似的组氨酸蛋白激酶HATPase_c功能域模拟结构以及13个相似的反应调节蛋白REC功能域模拟结构,其中HATPase_c结构在AMP-PNP的结合部位形成袋状结构,而REC结构中均包含3个天冬氨酸活性位点.初步实验结果表明表皮葡萄球菌双组分调控系统保守性功能域的生物信息学分析可以为进一步开发相关治疗药物提供潜在的靶标。
- 秦智强钟扬张健何有裕吴旸江娟陈洁敏罗小民瞿涤
- 关键词：表皮葡萄球菌生物信息学生物学功能
- 细菌双组分信号转导系统被引量：4
- 2003年
- 细菌能感应外界环境各种不同信号,调控菌体内相关基因表达,以适应不断变化的环境。其中双组分信号转导系统广泛存在于各种原核生物中,其基本结构为一个组氨酸蛋白激酶和一个反应调节蛋白。由于双组分系统在结构和作用机制上与人类细胞的信号转导系统有本质的不同,因而在抗微生物感染方面有着诱人的应用前景。
- 秦智强瞿涤
- 关键词：基因表达枯草杆菌微生物
- 表皮葡萄球菌生物膜三维结构、相关形成机制及组氨酸激酶YycG小分子抑制物的研究
- 凝固酶阴性的表皮葡萄球菌/(Staphylococcus epidermidis/)为人体皮肤表面常见的共生菌，通常不致病。但近年来随着各种植入性医疗材料的广泛使用，表皮葡萄球菌已成为院内感染的主要条件致病菌，原因是其能...
- 秦智强
- 关键词：表皮葡萄球菌生物膜组氨酸激酶先导化合物
- 文献传递
- 表皮葡萄球菌基因组结构与功能的研究
- 瞿涤任双喜高谦李华林秦智强王勇翔赵国屏吕元陈竺闻玉梅
- 在国际上首先完成表皮葡萄球菌（ATCC 12228株）全基因组测序和注释，采用生物信息学技术将其与已公布的金黄色葡萄球菌基因组以及TIGR尚未公布的表皮葡萄球菌RP62A株基因组序列和结构比较分析，并进行了生物学功能性研...
- 关键词：
- 关键词：表皮葡萄球菌生物膜基因组结构
- IFN-γ基因对表达DHBV preS/S蛋白质的DNA疫苗诱生免疫应答的影响被引量：2
- 2003年
- 目的 利用DHBV感染鸭模型 ,研究鸭IFN γ真核表达质粒作为免疫佐剂对DNA疫苗诱导免疫应答的影响和预防DHBV感染的作用。方法 用DuIFN γ真核表达质粒与DHBpreS SDNA疫苗共免疫 ,或用DHBpreS SDNA疫苗单独免疫正常幼鸭 ,检测经免疫前后鸭PBMC表达DuIFN γ的mRNA水平 (半定量竞争性RT PCR)、诱生的抗体水平 (ELISA)、病毒攻击免疫鸭后血清和肝脏中的病毒DNA变化 (斑点和Southern印迹核酸杂交 )。结果 IFN γ表达质粒作为免疫佐剂 ,可以增强DNA疫苗诱导的鸭PBMCIFN γ的mRNA表达水平。用大剂量病毒攻击免疫鸭的结果显示 ,用DuIFN γ表达质粒和DHBpreS SDNA疫苗共免疫鸭清除DHBV的速度 ,明显比仅用DHBpreS SDNA疫苗免疫鸭清除病毒的速度快 ,肝脏中DHBV总DNA和共价闭环DNA(cccDNA)的量也低于DHBpreS SDNA单独免疫组。结论 IFN γ真核表达质粒作为免疫调节佐剂在DNA免疫中具有潜在的应用价值。
- 龙健儿黄莉娜秦智强王文逸瞿涤
- 关键词：干扰素-Γ乙型肝炎病毒RT-PCR法DNA疫苗
- 表皮葡萄球菌AtlE蛋白介导生物膜起始黏附的相关机制被引量：9
- 2006年
- 目的探讨表皮葡萄球菌atlE基因编码的AtlE蛋白介导生物膜起始黏附的相关机制。方法采用RT-PCR法检测表皮葡萄球菌atlE基因在不同时期的表达水平,用紫外分光光度计检测DNA的方法检测了相应时期的胞外DNA的释放量,并用DNA酶(DNaseⅠ)研究表皮葡萄球菌胞外DNA在生物膜形成和起始黏附中的作用;采用pBT2质粒同源重组敲除的方法构建了表皮葡萄球菌1457的atlE基因突变株,研究atlE基因敲除突变对起始黏附能力、生物膜形成及胞外DNA释放能力的影响。结果表皮葡萄球菌atlE基因的表达与胞外DNA的释放量有相关性;DNA酶能影响未成熟生物膜且能降低起始黏附能力;ΔatlE菌株胞外DNA的释放减少,起始黏附能力明显降低,不形成生物膜。结论表皮葡萄球菌atlE基因编码的AtlE蛋白能通过释放胞外DNA在表皮葡萄球菌的生物膜起作用。
- 欧元祝朱于莉陈洁敏秦智强江娟杨晓梅瞿涤
- 关键词：表皮葡萄球菌生物膜
- trap基因表达在表皮葡萄球菌生物膜形成及附属基因调节(agr)系统活化中的作用被引量：1
- 2006年
- 目的研究表皮葡萄球菌trap基因表达与生物膜形成的相关性及其对agr系统的活化作用。方法采用微量板半定量法检测表皮葡萄球菌生物膜表型,二维电泳和高灵敏度的基质辅助激光解吸附飞行时间质谱分析比较表皮葡萄球菌标准株蛋白质表达谱,实时定量逆转录PCR检测trap基因和RNAⅢ的转录水平,CLUSTAL X对表皮葡萄球菌trap基因与金黄色葡萄球菌序列进行分析,Mega软件构建进化树。结果比较分析形成生物膜的表皮葡萄球菌ATCC 35984株与不形成生物膜的ATCC 12228株生长中期的蛋白质组,发现ATCC 35984株的TRAP蛋白量明显高于ATCC 12228株。转录水平的检测显示ATCC 12228株和生物膜阳性临床SE1457、SE671株的trap基因均低转录,但RNAⅢ的转录水平未降低。SE1457株agr系统突变后,RNAⅢ的转录明显降低,trap基因的转录无变化。RNAⅢ的转录随细菌生长变化而增加,trap基因转录保持不变。trap序列分析显示其在表皮葡萄球菌与金黄色葡萄球菌中较为保守,但存在明显的进化距离。结论在本论文所研究的表皮葡萄球菌菌株中,trap基因的转录和翻译与细菌生物膜的形成不存在直接的调控相关性;并提示TRAP蛋白不是表皮葡萄球菌agr系统活化所必需的细菌产物;表皮葡萄球菌trap基因序列与金黄色葡萄球菌之间存在差异,可能与其功能差异相关。
- 朱于莉杨晓梅李娜江娟陈洁敏秦智强李敏吕元魏武瞿涤
- 关键词：表皮葡萄球菌生物膜
- 鸭乙型肝炎病毒核心抗原DNA疫苗的构建及其诱导的体液免疫应答被引量：2
- 2009年
- 为研究鸭乙型肝炎病毒核心抗原(DHBcAg)真核表达质粒的免疫原性,分析DHBcAgDNA疫苗诱导的体液免疫应答,首先借助生物信息学方法对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)Core基因编码的氨基酸序列进行亲疏水性分析,分别构建DHBcAg全基因(E-DHBc263)及去除疏水性序列的DHBcAg片段(E-DHBc180)的真核表达质粒,间接免疫荧光检测结果显示可在COS7细胞内表达。进一步构建原核表达质粒p-DHBc263和p-DHBc180,仅p-DHBc180可表达蛋白,纯化后作为酶联免疫吸附试验(ELISA)包被抗原,用于DHBcAb的检测。分别用E-DHBc263和E-DHBc180免疫小鼠,采用间接ELISA检测DHBcAb。结果显示,E-DHBc180可诱导免疫小鼠产生DHBcAb免疫应答,加强免疫后效价可达1∶100～1∶400。结果提示,E-DHBc180可作为DHBcAgDNA疫苗,在DHBV感染鸭模型中评价其效果。
- 蒋定锋闫梁贲海静赵艳丰秦智强瞿涤
- 关键词：鸭乙型肝炎病毒核心抗原克隆DNA疫苗
- 质粒介导16SrRNA甲基化酶在肠杆菌科细菌中的流行情况及转移机制研究
- 余方友王良兴瞿涤潘景业秦智强张雪青陈增强
- 1.对临床分离的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌和阴沟肠杆菌进行了氨基糖苷类药物耐药性的调查。2.对临床分离的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌和阴沟肠杆菌进行了质粒介导的16SrRNA甲基化酶基因进行了筛查，...
- 关键词：
- 关键词：肠杆菌科细菌氨基糖苷类药物
