祝慈芳
- 作品数:14 被引量:44H指数:5
- 供职机构:上海生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金:卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学化学工程更多>>
- α_1-抗胰蛋白酶的制备及其防治急性肺损伤的疗效被引量:8
- 2004年
- 目的 以FIV 1为原料 ,制备较高纯度α1 AT制剂 ,用该制剂干预急性肺损伤动物模型作疗效考核。方法 FIV 1抽提液经PEG沉淀 ,离子交换 ,病毒灭活、超滤、除菌、分装 ,冻干制备α1 AT制剂。用急性肺损伤动物模型 ,比较静脉注射与雾化吸入α1 AT的治疗效果。结果 3批制剂纯度 >70 % ,无菌、热原、安全试验均符合生物制品规程要求。静脉注射或雾化吸入 ,可降低由内毒素诱发急性肺损伤程度。结论 α1 AT制备工艺适合大规模生产。
- 祝慈芳朱威揭志军蔡映云
- 关键词:急性肺损伤内毒素静脉注射雾化吸入
- α_1-抗胰蛋白酶生物活性测定影响因素探讨被引量:2
- 2004年
- 目的 研究分析用合成基质法测定α1 抗胰蛋白酶生物活性时的影响因素。方法 在α1 抗胰蛋白酶中分别加入不同浓度的聚乙二醇 (PEG ,分子量 4 0 0 0 ) ,蔗糖 ,枸橼酸钠 ,乙醇 ,测定其生物活性。结果 当PEG浓度接近2 0 %时 ,α1 抗胰蛋白酶生物活性与对照比增加近 1 0 0 %左右。结论 PEG影响α1
- 祝慈芳朱威
- 关键词:Α1-抗胰蛋白酶胰蛋白酶蔗糖枸橼酸钠
- 人血浆载脂蛋白AⅠ的纯化
- 2014年
- 目的 初探大规模纯化人血浆载脂蛋白AⅠ(apolipoprotein A Ⅰ,ApoA Ⅰ)的低成本生产工艺.方法 以人血浆组分Ⅳ为原料,通过等电点沉淀、阴离子层析、低温乙醇沉淀和超滤等步骤纯化ApoA Ⅰ蛋白,并放大实验室纯化方法来纯化ApoA Ⅰ.结果 放大纯化方法生产的ApoA Ⅰ的得率和纯度分别为59.0%和85.6%,经相关方法验证为人血浆ApoAⅠ.结论 实验室方法放大的纯化工艺可纯化ApoA Ⅰ.
- 卞炯祝慈芳何毅明朱威
- 关键词:纯化
- α_1抗胰蛋白酶对内毒素致兔急性肺损伤的防护作用被引量:6
- 2000年
- 揭志军杨文兰蔡映云金美玲朱威祝慈芳
- 关键词:急性肺损伤抗胰蛋白酶
- 凝血酶原复合物病毒灭活的研究被引量:6
- 1995年
- 从Cohn’s组分Ⅲ制备凝血酶原复合物(简称PCC),并经S/D处理灭活病毒。通过加入标志病毒(VSV、Sindbis、仙台及EMC)考察病毒灭活效果。结果显示,因子Ⅱ、Ⅸ活性总回收率分别为52.2%和22.3%,纯化倍数分别为3.5和1.5,均比原制备工艺提高约2倍。对标志病毒的灭活效果分别达107.55TCID50/ml(VSV)、107.27TCID50/ml(Sindbis)、108.25TCID50/ml(仙台),而对非脂膜病毒EMC的灭活小于100.2TCID50/ml,表明S/D对灭活脂膜病毒有效,而对非脂膜病毒无效。TNBP残留量小于10ppm,Tween80残留量小于100ppm。所得制剂的溶解性及外观均比原制备工艺所得制剂有明显改善。
- 黄金明刁武萍祝慈芳吴玮陈延韩剑秋
- 关键词:凝血酶原复合物生物制品病毒灭活S/D法
- α1-抗胰蛋白酶的制备及其防治急性肺损伤的疗效
- 目的以FIV-1为原料,制备了较高纯度α-AT 制剂,用该制剂干预急性肺损伤动物模型作疗效考核。方法FIV-1抽提液经PEG 沉淀,离子交换,病毒灭活,超滤,除菌,分装,冻干制备α-AT 制剂。用急性肺损伤动物模型,比较...
- 祝慈芳朱威揭志军蔡映云
- 关键词:Α1-抗胰蛋白酶内毒素急性肺损伤
- 文献传递
- 静脉注射和雾化吸入α_1-抗胰蛋白酶对急性肺损伤兔保护作用的比较被引量:2
- 2000年
- 揭志军蔡映云杨文兰金美玲朱威祝慈芳
- 关键词:急性肺损伤静脉注射雾化吸入Α1-抗胰蛋白酶
- α_1-抗胰蛋白酶对急性肺损伤兔蛋白酶和表面活性物质的影响被引量:4
- 2001年
- 目的 :观察 α1抗胰蛋白酶 ( α1AT)对内毒素致急性肺损伤兔蛋白酶和表面活性物质的影响。方法 :3 2只成年健康新西兰兔在给予定容机械通气基础上随机分成内毒素 ( L PS)组、L AV组 (内毒素 +α1AT)、AT组 ( α1AT)和生理盐水组 ( NS)。稳定 3 0分钟 ,监测每小时动脉血氧分压 ( Pa O2 )、静态总呼吸顺应性 ( TRC) ,4和 8小时分别测定肺内动静脉分流 ( Qs/Qt)。比较 8小时后血浆 α1AT浓度和活性、支气管肺泡灌洗液( BAL F)中总蛋白 ( TP)浓度、弹性蛋白酶 ( NE)样活性、α1AT活性、总磷脂 ( TPL)和饱和磷酯酰胆碱 ( DSPC)含量等指标以及肺重 /干重 ( W/D)。结果 :动物静脉注射 LPS后 Pa O2 下降 ,氧合指数 ( Pa O2 /Fi O2 ) <2 6.7k Pa( 1 k Pa=7.5mm Hg) ,TRC下降 >50 % ,Qs/Qt增加 >2 5%。与 NS组相比 ,血浆 α1AT含量增高但活性下降 ;BAL F中 TP含量和 NE样活性增加 ,α1AT活性、TPL 和 DSPC/TPL下降 ;W/D增加。L AV组与 LPS组相比 ,上述指标的变化明显改善 :Pa O2 和 TRC的下降幅度较 L PS组减小 ,血浆 α1AT含量和活性、BAL F中α1AT活性、TPL和 DSPC%较 L PS组增高 ;Qs/Qt、BAL F中 TP含量、NE样活性和 W/D较 L PS组降低。结论 :预防性静注 α1AT,可提高机体内的抗蛋白酶活性 ,抑制
- 揭志军蔡映云杨文兰金美玲朱威祝慈芳
- 关键词:急性肺损伤Α1-抗胰蛋白酶弹性蛋白酶内毒素肺泡表面活性物质
- 重组人载脂蛋白AⅠ的原核表达及活性检测初探被引量:1
- 2010年
- 目的原核表达人载脂蛋白AⅠ(ApoAⅠ),对其表达进行优化,同时对ApoAⅠ活性检测方法进行初步研究。方法通过构建3种不同的重组质粒来研究以组氨酸(His)6融合蛋白表达、(His)6-pro(前肽)融合蛋白与单目的基因表达之间的差别,其中(His)6-pro-ApoAⅠ质粒中目的基因第3、4、7位密码子进行无义突变。随后采用镍离子柱纯化重组蛋白,间接法测定ApoAⅠ对被内毒素(LPS)攻击的细胞的保护效果来检测其生物活性。结果单目的基因(pET28a-ApoAⅠ)、组氨酸标记的融合蛋白(pET28a-(His)6-ApoAⅠ)以及(His)6-pro(前肽)融合蛋白(pET28a-(His)6-pro-ApoAⅠ)表达量分别为17、40、95mg/L,经镍柱纯化后的重组蛋白经Western blot、分子筛层析以及生物活性检测,表明原核表达的ApoAⅠ为单体蛋白且具有相应的生物学活性。结论原核表达的ApoAⅠ与人血浆提纯的天然ApoAⅠ分子生物性状无明显差异。
- 卞炯何毅明祝慈芳王黎吴玮朱威
- 关键词:原核表达蛋白纯化生物活性
- 蛋白酶-抗蛋白酶失衡在内毒素诱发急性肺损伤中的作用被引量:13
- 2000年
- 目的:研究蛋白酶 抗蛋白酶失衡在内毒素诱发急性肺损伤(ALI)兔模型中的作用。方法:成年健康新西兰大白兔16只经麻醉、气管切开插管后给予机械通气。随机分成2组(每组8只):即内毒素(LPS)致ALI模型组(LPS组)和生理盐水对照组(NS组)。监测动脉血氧分压(PaO2 )、动脉血压(BP)、外周血白细胞数(WBC)、气道峰压(Ppeak )、静态总呼吸顺应性(TRC)和肺内动静脉分流(Qs/Qt)等指标的变化;比较实验8 小时后血浆α1 抗胰蛋白酶(α1 AT)含量和活性、支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白(TP)含量、中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)样活性、α1 AT活性、白介素 8(IL 8)、肿瘤坏死因子 α(TNF α)、总磷脂(TPL)、饱和磷脂酰胆碱(DSPC)含量及肺湿重与干重比(W/D)的差异。结果:与基础值相比,静注LPS后PaO2 下降,氧合指数< 26.67 kPa(1 kPa= 7.5 m m Hg),TRC下降> 50% ,肺内动静脉分流增加> 25% ;与NS组相比,血浆α1 AT含量增高但活性下降,外周血白细胞减少,而BALF中TP含量、NE样活性、IL 8 和TNF α浓度增加,α1 AT活性、TP?
- 揭志军杨文兰蔡映云金美玲朱威祝慈芳
- 关键词:肺损伤弹性蛋白酶内毒素Α1-AT