石洁 作品数:62 被引量:194 H指数:8 供职机构: 河南省疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 河南省医学科技攻关计划项目 河南省科技攻关计划 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 文化科学 更多>>
河南省临床分离的553株结核分枝杆菌基因分型研究 2020年 目的了解河南省结核分枝杆菌基因类型分布及主要流行基因群。方法对河南省各地市分离的553株结核分枝杆菌临床分离株采用间隔区寡核苷酸分型方法(spoligotyping)进行基因分型。分型结果与SITVIT数据库进行比对,并用Bionumeric 7.6软件进行基因聚类分析。结果 553株结核分枝杆菌Spoligotyping分型后与SITVIT数据库比对后得到46种不同的基因型,其中33种型别有对应的SIT编号,剩下的13种未在数据库找到与其匹配的型别。553株菌除了14(2.53%)株菌基因型没有对应的家族用"UN"表示外,余下536株菌分别属于4个不同的家族,其中Beijing家族共481株,占总数的86.98%;其次是T家族共53株,占总数的9.58%;MANU家族2株(0.36%)(MANU2);LAM家族1株(0.18%)(T5RUS1)。结论河南省结核分枝杆菌基因型别呈现多样性,北京家族和T家族为主要的流行基因群。 王少华 郑丹薇 朱岩昆 马晓光 石洁 李辉关键词:结核分枝杆菌 基因分型 间隔区寡核苷酸分型 2021年河南省结核病实验室检测技能竞赛结果 被引量:1 2023年 目的 了解河南省结核病实验室人员检测技能水平,为加强实验室能力建设提供依据。方法 2021年10月采用理论和操作考核评估参赛人员检测技能水平,并用t检验、单因素方差分析、χ^(2)检验、Mann-Whitney U检验、KruskalWallis检验和多元线性回归研究考核成绩的影响因素。结果 各参赛单位操作考核优于理论考核成绩,差异有统计学意义(t=-6.929,P<0.05)。74名参赛人员理论考核成绩平均为(59.16±13.59)分,对不同知识点掌握情况存在差异,其中痰涂片染色镜检部分平均得分率最高,为70.21%(13.34/19);分子生物学部分平均得分率最低,仅为49.84%(9.47/19)。操作考核中阅片成绩平均为(64.08±15.05)分,显微镜操作成绩平均为(16.01±3.80)分。影响因素分析显示,不同学历、工作年限、职称、单位级别(P均<0.05)对理论考核成绩产生影响,对显微镜操作成绩产生的影响无统计学意义。结论 竞赛参赛人员的理论知识储备不足,痰涂片镜检基础检测能力弱化,应针对性地加强培训与质量控制,稳定人才队伍,提升检测技能水平。 郑丹薇 王璞 石洁 苏茹月 常文静 王少华 马晓光 朱岩昆 孙国清 孙定勇关键词:结核病 实验室 河南省结核分枝杆菌药物敏感性测试质量控制结果分析 被引量:4 2012年 目的评价河南省Mtb药物敏感性测试的质量,规范并完善河南省结核病实验室药物敏感性室间质量保证体系。方法河南省6个受评估实验室按照《结核病诊断实验室检测规程》中比例法药敏试验要求对河南省结核病参比实验室下发的一线及二线药敏测试菌株58株进行比例法药敏试验,试验结果均报河南省结核病参比实验室(PRL),由PRL与标准结果比较并进行统计学分析。结果一线药物INH、RFP、S和EMB的一致性分别为91.0%(151/166)、95.8%(159/166)、89.2%(148/166)和77.1%(128/168);二线药物平均一致性达到了94.9%(683/720)。结论河南省6个评估实验室一线药的INH和RFP及四种二线药物敏感性检测均达到WHO和国家要求,EMB的敏感性检测水平有待进一步提高。 杨洪毅 马晓光 李辉 赵玉玲 闫国蕊 石洁关键词:微生物敏感性试验 河南省胞内分枝杆菌临床分离株耐药特征及基因分型 2024年 目的:分析河南省胞内分枝杆菌临床分离株的耐药及基因分型。方法:收集68株2019年河南省部分地市结核病专科医院痰标本分离的胞内分枝杆菌,采用微孔板法测定其对16种药物的敏感性,用16位点VNTR方法进行基因分型,并用BioNumerics软件对分型数据进行聚类分析。结果:68株对克拉霉素、利福布汀和甲氧苄啶/磺胺甲恶唑的耐药率分别为11.76%(8/68)、5.88%(4/68)、8.82%(6/68)。克拉霉素、利福布汀和甲氧苄啶/磺胺甲恶唑的抑制50%胞内分枝杆菌的最低抑菌浓度(MIC 50)和MIC 90分别为2和32 mg/L、0.5和2 mg/L以及0.25/4.75和2/38 mg/L。16位点VNTR将68株分为45个基因型,包括来自11个簇的34株和34个独特模式的分离株,Hunter-Gaston分辨力指数为0.978。成簇菌株利奈唑胺和阿米卡星耐药率高于非成簇菌株(58.82%vs 23.53%;44.12%vs 14.71%)(P<0.05)。结论:克拉霉素、利福布汀和甲氧苄啶/磺胺甲恶唑等对河南省胞内分枝杆菌临床分离株具有较好的抗菌活性。VNTR分型方法对胞内分枝杆菌具有较好的分型能力。成簇菌株中利奈唑胺和阿米卡星的耐药率高于非成簇菌株。 王少华 常文静 苏茹月 马晓光 郑丹薇 朱岩昆 石洁 孙国清 孙定勇 郝义彬关键词:耐药 基因型 结核分枝杆菌聚合酶螺旋反应检测方法的建立及效果评价 被引量:2 2020年 目的建立聚合酶螺旋反应(polymerase spiral reaction,PSR)检测结核分枝杆菌的方法并评价效果。方法针对结核分枝杆菌插入序列IS6110设计引物进行PSR检测。提取结核分枝杆菌基因组DNA,加入Bst DNA聚合酶的RM2X反应液中,在荧光定量PCR仪上于63℃反应45 min,通过荧光信号进行检测。通过对引物序列进行优化,筛选出最佳引物序列,并对其检测特异性和最低检出限进行评估。于2019年5—8月间从郑州市第六人民医院连续收集200例肺结核患者痰液样本(同一患者收集3份),对痰标本进行痰涂片、固体痰培养和PSR检测。以痰培养结果为参照,评价PSR对结核病患者的检测效能。结果通过引物序列优化,筛选出一套对结核分枝杆菌检测的PSR引物,使用该引物进行PSR的最低检出限可达到10~3菌落形成单位(CFU)/ml;检测特异性实验表明该方法与15株非结核分枝杆菌无交叉反应。200例肺结核患者中,痰涂片检测阳性48例,阳性检出率为24.0%(48/200);痰培养检测阳性83例,阳性检出率为41.5%(83/200);PSR方法检测阳性87例,阳性检出率为43.5%(87/200)。以痰培养结果为标准,PSR检测结核病的敏感度和特异度分别为96.4%(80/83)、94.0%(110/117),阳性预测值为92.0%(80/87),阴性预测值为97.3%(110/113),与痰培养检测方法基本一致(Kappa值为0.898)。结论PSR检测适用于结核分枝杆菌的快速筛查。 马晓光 石洁 徐行勇 朱岩昆 王少华 郑丹薇 孙国清 孙定勇 苏茹月河南省结核分枝杆菌MIRU-VNTR和间隔区寡核苷酸分型分析 被引量:5 2019年 目的:调查河南省结核分枝杆菌分子流行病学的结构特征。方法:共纳入河南地区668株结核分枝杆菌,进行间隔区寡核苷酸分型(Spoligotyping)和26位点分枝杆菌散在重复单元-数目可变串联重复序列(MIRU-VNTR)分型分析,评估不同MIRU-VNTR位点组合的分辨效能。结果与结论:北京家族基因型菌株有558(83. 53)株,是河南省最流行的结核分枝杆菌,其中典型北京家族基因型(SIT1)是最具优势的基因型(512株,88. 89%)。26位点MIRU-VNTR可将668株菌分成567种基因型,其中含有38个基因簇和529种独立的基因型。累积Hunter-Gaston分辨力指数表明10个分辨力最强VNTR位点组合的分辨效力接近26位点组合。 石洁 郑丹薇 朱岩昆 马晓光 王少华 李辉 张国龙关键词:结核分枝杆菌 间隔区寡核苷酸分型 结核分枝杆菌mpt59和esxA融合基因编码蛋白的原核表达及免疫原性观察 被引量:3 2015年 目的:获取结核分枝杆菌mpt59和esx A基因编码的原核表达融合蛋白,并将该蛋白初步用于结核患者的快速诊断。方法:PCR扩增含有柔性链接肽段的esx A核苷酸序列,并将其连接至原核表达载体p ET28a上,再将mpt59连接至p ET28a-esx A上。该融合蛋白在大肠杆菌BL21中原核表达后,用镍珠子进行亲和纯化。采用垂直电泳和免疫印迹分析重组蛋白,并用于结核患者的诊断。结果:成功构建了原核表达载体p ET28a-esx A-mpt59,转化大肠杆菌BL21后经诱导产生了高水平的表达产物。用该纯化蛋白进行ELISA检测,结果表明其诊断结核的灵敏度为97.8%,特异度为100%。结论:构建了含mpt59和esx A融合抗原基因的原核表达载体,并诱导表达了融合蛋白,为进一步研究结核分枝杆菌疫苗或诊断试剂奠定了基础。 石洁 朱岩昆 郑丹薇 马晓光 王少华 李辉 邢进 吴彩霞关键词:结核分枝杆菌 血清学诊断 原核表达 耐多药结核分枝杆菌吡嗪酰胺药物敏感性及pnc A突变情况 2023年 目的通过鉴定耐多药(multidrug-resistant,MDR)结核分枝杆菌中吡嗪酰胺(pyrazinamide,PZA)耐药的表型和基因型特性,为制定合适的治疗方案提供实验室依据。方法采用液体培养对耐多药结核分枝杆菌进行PZA药物敏感性测定。通过测序鉴定pncA的突变情况,并与标准菌株H37Rv的序列进行比较。结果75株耐多药结核菌中,52株(69.33%)为PZA表型耐药菌株。80.76%的准广泛耐药(pre-extensive drug resistant,pre-XDR)菌株、92.31%的广泛耐药(extensive drug resistant,XDR)菌株以及84.61%的对四种一线药物(异烟肼、利福平、乙胺丁醇、链霉素)耐药的菌株发生了PZA耐药。在PZA耐药菌株中45株(45/52,86.53%)的pncA基因发生了突变。在这些MDR菌株共存在40种不同类型的pncA的突变,包括33个点突变和7个插入缺失突变。在这些突变类型中,有17个为新发现位点。结论对四种一线药物全部耐药的菌株,准广泛耐药菌株和广泛耐药菌株的PZA具有较高耐药率。大多数PZA耐药与pncA相关,该突变散在分布且具有多样性。 彭小婉 石洁 陈瑞琴关键词:结核分枝杆菌 耐多药 吡嗪酰胺 2022年河南省结核病检测专业知识水平及影响因素 被引量:1 2023年 目的了解河南省结核病实验室检测专业技术人员理论知识水平及影响因素,为提升结核病检测专业技术人员技能提供科学依据。方法测评对象为河南省18个地市及10个省直管县结核病实验室354名专业技术人员,2022年5月18日利用问卷星软件发放调查问卷,收集测评对象人口统计学特征及答题情况。采用多元线性回归分析测评得分影响因素。结果共收回有效问卷354份。结核病防治政策、结核病病原学基础知识、痰涂片镜检、分离培养知识、药敏技术知识、分子生物学诊断技术、实验室质量控制和生物安全得分率分别为64.00%,59.31%,80.46%,76.91%,57.25%,58.90%,69.31%,60.36%;测评平均分为(71.63±14.00)分,不同学历、职称、专业、单位级别平均得分结果显示本科及以上学历(76.41±12.88)分高于大专及以下(66.20±13.25)分,中级及以上(74.82±12.87)分高于初级及以下(70.09±14.28)分,临床医学检验专业(73.41±13.94)分高于其他专业(67.93±13.45)分,市级(78.50±13.26)分高于县级(67.73±12.89)分,差异均有统计学意义(P<0.05);不同机构类型实验室平均得分结果显示独立结核病防治所(独立结防所)(80.04±10.74)分、结核病定点医院(76.69±14.03)分、综合医院(71.60±13.93)分、疾病预防控制中心(疾控中心)(67.16±12.97)分,组间差异有统计学意义(P<0.05);多元线性回归分析结果显示,影响结核病检测专业技术人员测评得分的主要因素为学历(95%CI:3.353~9.497)、机构类型(95%CI:4.662~13.600)、单位级别(95%CI:0.880~8.669)。结论河南省结防机构检测人员在结核病理论知识掌握上总体良好,但仍需要重点加强对结核病病原学基础知识、药敏检测技术及分子诊断技术知识培训学习。此外,不同学历人群、机构类型及单位级别实验室对知识掌握情况存在差异,需要精准加强对大专及以下学历与疾控中心实验室技术指导与培训,同时发挥省、市� 苏茹月 朱岩昆 常文静 陈瑞琴 郑丹薇 孙国清 王少华 石洁 马晓光 孙定勇关键词:测评 影响因素 两种痰标本分子检测方法诊断菌阴肺结核的价值 被引量:1 2019年 目的探讨痰标本分子检测方法利福平耐药实时荧光定量核酸扩增(XpertMTB/RIF)和恒温扩增荧光检测试剂盒(RealAmp)在菌阴肺结核快速诊断中的应用价值。方法研究组选取2014年10月~2015年10月永城市结核病防治所确诊的涂阴肺结核患者91例;对照组选取同一时期就诊期间诊断为肺部其他疾病患者31例,两组均进行XpertMTB/RIF和RealAmp检查,比较两种方法的敏感性、特异性。结果菌阴肺结核组痰XpertMTB/RIF和RealAmp的敏感性分别为70.3%,60.4%;XpertMTB/RIF和RealAmp相比明显差异无统计学意义(P>0.05);特异性分别为93.5%,83.9%。结论痰XpertMTB/RIF和RealAmp两种检测方法在菌阴肺结核诊断中都具有较高的灵敏度和特异性在临床中应用能提高菌阴肺结核的病原学检出率。 王少华 郑丹薇 朱岩坤 马晓光 石洁 李辉 张国龙关键词:结核分枝杆菌 菌阴肺结核