石彦
- 作品数:5 被引量:3H指数:1
- 供职机构:复旦大学生命科学学院遗传学研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划广东省卫生厅资助课题更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 人类14-3-3ζ和GCH1蛋白相互作用的初步研究
- 2007年
- 目的寻找人类14-3-3ζ蛋白的相互作用蛋白,为进一步揭示14-3-3ζ的作用机理提供线索。方法以14-3-3ζ为"诱饵",利用酵母双杂交系统筛选人脑cDNA文库得到"猎物"蛋白,通过GST pull-down技术和哺乳动物细胞内免疫共沉淀技术验证14-3-3ζ和"猎物"蛋白的特异性结合。结果首次利用酵母双杂交cDNA文库筛选技术发现了14-3-3ζ能够与GTP环化水解酶Ⅰ(GTP cyclohydrolase1,GCH1)相互作用,并通过了体内和体外的蛋白质结合实验证实了这两个蛋白质之间的特异性相互作用。结论发现并验证了14-3-3ζ与GCH1之间的蛋白质相互作用,为进一步深入研究这两种蛋白质的功能及所引起的相关疾病的发病机理提供了新的线索。
- 钱玮石彦伍慧玲田志鹏施慧莉霍克克
- 关键词:酵母双杂交蛋白质相互作用
- 羧基末端结合蛋白CtBP2与泛素结合酶UBE2Ⅰ的相互作用被引量:1
- 2011年
- 目的筛选并确定人羧基末端结合蛋白CtBP2的相互作用蛋白。方法用酵母双杂交技术,以人CtBP2为诱饵蛋白筛选人肝cDNA文库,获得与之相互作用的候选蛋白,采用酵母共转化和细胞免疫共沉淀实验确认相互作用的特异性,最后利用荧光蛋白融合表达技术和荧光显微镜观察确认CtBP2与其相互作用蛋白的亚细胞共定位情况。结果酵母双杂交筛选获得了41个与Bd-CtBP2相互作用的阳性克隆,编码10个不同的蛋白,其中有4个克隆编码泛素结合酶UBE2Ⅰ的不同片段。从人肝cDNA文库中扩增获得UBE2Ⅰ的全长编码序列,酵母共转化和细胞免疫共沉淀实验证实CtBP2与UBE2Ⅰ能够特异性结合。亚细胞定位研究表明GFP-CtBP2弥散分布于细胞核,DsRed-UBE2Ⅰ不均匀分布于细胞核,有部分点状聚集。两者共转染时能够呈点状共定位于细胞核。结论人CtBP2能够在细胞核内与UBE2Ⅰ特异性相互作用,是UBE2Ⅰ的靶蛋白。
- 叶晓霞石彦霍克克陈东吴民华
- 关键词:酵母双杂交免疫共沉淀
- 人类ARRB1和GNMT蛋白相互作用的初步研究
- 2010年
- GNMT(甘氨酸-N-甲基转移酶,glycine N-methyltransferase)是人体内一个多功能蛋白.最近研究发现GNMT是一个潜在的抑癌基因,但GNMT抑癌的机理却不清楚.研究以GNMT为"诱饵",利用酵母双杂交系统筛选人肝cDNA文库,获得了GNMT的一个相互作用蛋白ARRB1(-βarrestin1),并通过GST Pull-down、免疫共沉淀的方法在体内体外验证了相互作用的特异性.进一步研究发现GNMT和ARRB1的相互作用不依赖于GNMT的四聚体高级结构和甲基转移酶活性.免疫荧光共定位实验发现,当ARRB1与GNMT共转染HeLa细胞后,ARRB1蛋白的亚细胞定位发生改变,表现出与GNMT蛋白共定位,有入核的趋势.这为研究GNMT的抑癌作用机理提供了新的线索.
- 叶侃石彦伍慧玲周娟施慧莉霍克克
- 关键词:酵母双杂交免疫荧光定位
- 肝核转录因子FOXA3相互作用蛋白的初步研究被引量:2
- 2005年
- FOXA3基因是肝核转录因子(HepatocyteNuclearFactor,HNF)基因家族中含有FoxheadBox结构域的3个成员之一,在维持血糖平衡以及调控发育方面发挥着重要的作用.利用FOXA3-AD酵母双杂交载体筛选人肝cDNA-BD酵母双杂交文库,并通过共转化进行验证,获得了两个与FOXA3相互作用的蛋白:C3和TMEM4.这些相互作用蛋白的发现为深入了解FOXA3蛋白参与糖代谢调控的分子机制提供了线索.
- 万兵兵叶晓霞石彦黎莉施慧莉霍克克
- 关键词:酵母双杂交
- 两对人类蛋白质(MSK1与CK2,NLK与SMAD4)相互作用及其磷酸化的研究
- 本论文分为两部分,第一部分是关于CK2与MSK1的相互作用及其对后者的磷酸化研究。第二部分是关于NLK和SMAD4的相互作用及其磷酸化的研究。 在论文的第一部分,我们对MSK1两个剪切本的亚细胞定位进行了研究比较,新发现...
- 石彦
- 关键词:CK2SMAD4蛋白质相互作用磷酸化泛素化
- 文献传递