盛涛
- 作品数：11 被引量：56H指数：3
- 供职机构：中国预防医学科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 幽门螺杆菌的低温保存方法被引量：3
- 1998年
- 目的探索幽门螺杆菌实用性的低温保存方法．方法采用以１００ｇ／Ｌ蔗糖、５００ｍＬ／Ｌ小牛血清作为幽门螺杆菌冷冻保存液，对１３８株幽门螺杆菌在－６２℃条件下进行保存，每６ｍｏ进行一次菌株复活，检查菌株存活情况．结果除一株国内分离株（ＣＡＰＭＮ１０７株）在１８ｍｏ时复活失败外，其他菌株在保存２５ａ后均复活良好，其中对７株菌株的观察已达３ａ，仍能成功复活．结论幽门螺杆菌菌株冷冻保存过程中，若使用１００ｇ／Ｌ蔗糖小牛血清保存液（不含二甲基亚砜），配方简单．同时可免去在－２０℃环境的预冻过程，大大简化了操作过程．菌株保存期一般可达２ａ以上。
- 张建中蒋秀高陈晶晶孙兆军盛涛
- 关键词：冷冻保存
- 幽门螺杆菌的冷冻干燥保存方法被引量：1
- 1998年
- 目的介绍一种较理想的幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ，Ｈｐ）的冷冻干燥保存方法，希望对Ｈｐ相关研究有所帮助．方法以１００ｇ／Ｌ蔗糖、５００ｍＬ／Ｌ小牛血清作为冻干保护剂对１５株Ｈｐ（１０１３ｃｆｕ／Ｌ菌液）和３株空肠弯曲菌进行冷冻干燥保存，同时用脱脂牛奶冻干保护剂作为对照．按常规菌株冻干程序冻干后火焰封管，真空放电检查冻干管真空度良好后，存放于室温环境，用于冻干效果观察．冻干菌株每年进行复活检查，复活时接种双份布氏血平板，置混合气体环境（１００ｍＬ／ＬＣＯ２，５０ｍＬ／ＬＯ２和８５０ｍＬ／ＬＮ２）培养５ｄ后观察细菌复活情况．结果Ｈｐ冻干菌株１５株经４ａ复苏观察发现均存活良好，其中已有２株冻干菌株观察时间已达６ａ，仍存活良好．结论以蔗糖血清为主的冻干保护液在Ｈｐ菌株冻干中具有良好的保护效果，冻干菌株可达到长期保存的目的．同时。
- 张建中蒋秀高陈晶晶孙兆军盛涛
- 关键词：幽门螺杆菌螺杆菌感染
- 幽门螺杆菌菌株存活能力及常温传递方法被引量：2
- 1998年
- 目的观察幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ，Ｈｐ）在常温保存液中的存活能力及影响因素，通过实际菌株传递实验，为我国Ｈｐ菌株库建立中各地Ｈｐ的收集和供应，提供切实可行的菌株传递方案．方法取新鲜培养３ｄ的Ｈｐ３株（ＮＣＴＣ１１６３７，ＮＣＴＣ１１６３９和ＣＡＰＭＮ６２），用Ｈｐ保存液（含１０ｇ／Ｌ蔗糖，５００ｍＬ／Ｌ小牛血清）作成１０１３ｃｆｕ／Ｌ浓度的菌悬液，分别以满管和半管形式装于１５ｍＬ灭菌小管中，经密封后放于３７℃恒温箱中，于１２，２４，３６，４８，６０，７２，９６，１２０，１４４，和１６８ｈ，按每种各取出一管，接种双份平皿（１００ｍＬ／Ｌ羊血布氏琼脂）后，于微需氧环境培养３ｄ后观察细菌生长情况．另外，将一满管１０１３ｃｆｕ／Ｌ浓度的Ｈｐ用特快专递（ＥＭＳ）自北京传送到上海，收到后马上进行接种，并连续观察传递管中菌株在不同时间内的存活情况．结果在３７℃保存液中Ｈｐ至少可存活７２ｈ，保存管中通过加满保存液减少空气残留，能明显延长Ｈｐ的存活时间；在气温２０℃～３４℃条件下，经ＥＭＳ实际传递的菌株存活良好，且在传递到达后可继续存活至５５ｈ．结论使用含１０％蔗糖的５０％小牛血清细菌传送保护液，在?
- 张建中蒋秀高陈晶晶陈晶晶盛涛孙兆军
- 关键词：幽门螺杆菌
- 幽门螺杆菌ureB基因的克隆及序列分析被引量：6
- 2001年
- 目的 对幽门螺杆菌 (Hp)ureB核苷酸序列及推定氨基酸序列进行同源性比较分析 ,确定Hp菌株的ureB基因差异性 ,为疫苗的研究和诊断用品的评价提供依据。方法 自行设计引物 ,PCR扩增来自国内不同病人的 4株Hp菌株的ureB基因 ,与pGEM T载体克隆连接、测序 ;进一步同GenBank上发表的其他 4株国外Hp菌株ureB的全基因序列进行比较分析。结果 8株Hp菌株的ureB基因序列出现了 3种长度 ,CAPMF3和CPM6 30分别为 12 6 9bp和 16 80bp ,其他为 1710bp。 6株1710bp的ureB基因序列的分析表明 ,国外 3株Hp的ureB同源性较高 ,三者氨基酸的同源性达到10 0 %。而国内 3株Hp的ureB变异较大 ,推定氨基酸同源性为 98 7%～ 98 9%。结论 UreB作为保护性抗原时存在免疫保护覆盖率问题 ,研究疫苗和诊断用品时要注意选择使用在人群中流行占优势的Hp菌株的高度保守的UreB抗原肽 ,使其具有更高的覆盖率。
- 盛涛张建中
- 关键词：幽门螺杆菌克隆
- 幽门螺杆菌诱导人胃上皮癌细胞株BGC-823环加氧酶-2的合成被引量：15
- 2001年
- 目的 :研究幽门螺杆菌对人胃上皮细胞环加氧酶 1和环加氧酶 2合成的影响。方法 :实验选用VacA(+)和CagA(+)的国际标准幽门螺杆菌菌株NCTC116 37和人胃上皮癌细胞株BGC 82 3。环加氧酶的合成用免疫蛋白印迹法 (WesternBlotting)测定。结果 :幽门螺杆菌菌体超声提取物对BGC 82 3细胞环加氧酶 2的合成有明显的诱导作用。BGC 82 3细胞环加氧酶 2的含量在幽门螺杆菌提取物作用 1h后明显增加 ,并持续至少 6h。幽门螺杆菌提取物对BGC 82 3细胞环加氧酶 1的合成没有影响。幽门螺杆菌脂多糖成分对BGC 82 3细胞环加氧酶 2的合成没有影响。结论 :幽门螺杆菌可直接诱导BGC 82 3细胞环加氧酶 2的合成 。
- 陈永昌张建中李铁盛涛朱文玉
- 关键词：幽门螺杆菌胃肿瘤环加氧酶上皮细胞BGC-823
- 幽门螺杆菌cagA基因PCR检测方法初探
- 2001年
- 目的 建立敏感性高的幽门螺杆菌菌株cagA基因PCR检测方法 ,为客观评价CagA在我国幽门螺杆菌感染致病中的作用提供基础。方法 通过分析比较GenBank中已知的cagA基因序列 ,设计了一对针对cagA基因保守序列、可扩增 2 97bp片段的PCR引物 ,用PCR方法检测幽门螺杆菌的cagA基因 ,与SDS PAGE检测CagA蛋白的结果进行比较。结果 PCR检测 82株国内幽门螺菌杆菌的cagA基因 ,77株为cagA阳性 ,阳性率为 93 .9% ,SDS PAGE显示包括所有PCR扩增阴性菌株在内的 74株幽门螺杆菌均表达CagA ,阳性率为 1 0 0 %。PCR检测cagA基因的敏感性为 93 .2 %。结论 建立了敏感性高的幽门螺杆菌cagA基因PCR检测方法。
- 周建嫦张建中徐采朴何利华张茂俊盛涛郭浩岩
- 关键词：幽门螺杆菌CAGA基因PCR
- 幽门螺杆菌CagA抗原性多态性分析被引量：2
- 2001年
- 目的 了解我国幽门螺杆菌CagA抗原性的多态性 ,为临床血清学诊断CagA阳性菌株感染提供实验依据 ,以及是否存在特定胃十二指肠疾病相关的CagA抗原性型提供线索。方法 采用Westernblots方法 ,比较 38株我国幽门螺杆菌分离株的CagA与 3种不同胃肠疾病分离株兔免疫血清的反应强度。分析不同抗原性类型CagA与疾病的关系。结果 任何一种血清均不能识别所有CagA ,但任一CagA至少可被一种血清识别 ,多数菌株CagA的抗原性与CAPMN6 2接近 ;抗原性与NCTC116 37接近的CagA可能与消化性溃疡相关 ,但不显著。结论 我国不同幽门螺杆菌菌株CagA抗原性存在明显多态性 ,血清学方法诊断CagA阳性菌株感染时应至少使用 3种抗原或抗体 ,不同抗原性类型CagA与胃十二指肠疾病的关系有待进一步研究。
- 周建嫦张建中徐采朴何利华张茂俊盛涛郭浩岩
- 关键词：幽门螺杆菌CAGA抗原多态性胃粘膜萎缩
- 幽门螺杆菌对人和大鼠胃上皮细胞细胞外信号调节激酶活性的影响被引量：3
- 2000年
- 目的 :研究幽门螺杆菌提取物对人胃上皮细胞株BGC 82 3和大鼠胃上皮细胞株RGM 1的细胞外信号调节激酶 (extracellularsignal regulatedkinase,ERK)活性的影响。 方法 :采用蛋白质免疫印迹法测定ERK酶蛋白含量和活性。结果 :在各观察时间点 ,两种细胞ERK酶蛋白含量无明显差异。在无血清存在情况下 ,幽门螺杆菌提取物使BGC 82 3细胞ERK活性持续增加而对RGM1细胞ERK活性几乎没有影响 ;在有血清存在情况下 ,Hp提取物使BGC 82 3细胞ERK活性持续增加而使RGM1细胞ERK活性一过性增加。结论 :幽门螺杆菌提取物对胃上皮细胞株BGC 82 3和RGM 1的ERK活性的影响不同。
- 陈永昌张建中李铁盛涛朱文玉
- 关键词：幽门螺杆菌信号调节激酶
- 幽门螺杆菌尿素酶研究现状被引量：22
- 1999年
- 盛涛张建中
- 关键词：幽门螺杆菌尿素酶分子生物学疫苗
- 利用ctxb的自身启动子表达CTB被引量：2
- 2001年
- 霍乱毒素B亚单位 (CTB)在大肠杆菌表达体系中不能实现良好的分泌性表达。本文拟利用ctxb的自身启动子来实现CTB的高效分泌性表达。PCR方法扩增ctxb的调控序列和结构基因 ,克隆至pGEM T载体中 ,并在其下游链上大肠杆菌核糖体基因的转录终止信号rrnBT1T2 ,构建的表达质粒 pGEM T48转化大肠杆菌JM10 9和霍乱毒素基因阴性株霍乱弧菌IEM10 1。结果ctxb在自身启动子的调控下 ,大肠杆菌JM 10 9和霍乱弧菌IEM 10 1都实现了CTB的分泌性表达。但在 pGEM T48(IEM10 1)中CTB的分泌性表达量明显高于pGEM T48(JM10 9)中的量 ,两者比例为 5 0∶1。因此 ,pGEM T48(IEM10 1)
- 盛涛张建中阚飚刘延清
- 关键词：霍乱毒素启动子分泌性表达
