田菲菲
- 作品数：4 被引量：16H指数：3
- 供职机构：西北农林科技大学林学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 百合愈伤组织的诱导及瞬时表达的研究被引量：4
- 2013年
- 以百合品种‘罗宾娜’(Robina)鳞片、花丝和花梗分化的不定芽为试材,诱导愈伤组织,并通过固体、液体和经过液体预培养后在固体上培养的方式继代增殖。结果表明:分化的不定芽在萘乙酸(NAA)0.5mg/L的培养基上愈伤组织的诱导率最高;从芽基部形成的愈伤组织以经过液体预培养后在固体上培养的方式继代,繁殖速率最大,再生率为100%。使用农杆菌介导转化pCAMBIAl301质粒后,3种不同方式培养的愈伤组织的GUS瞬时表达效率差异并不显著。
- 权永辉刘雅莉祁银燕姜玲田菲菲杜灵娟
- 关键词：百合愈伤组织植株再生
- 农杆菌介导的ACO-RNAi载体对百合胚性愈伤的转化被引量：9
- 2015年
- 【目的】建立高效稳定的百合遗传转化体系,以得到甁插寿命长、开花早的百合转基因品种。【方法】以OT百合"罗宾那"的胚性愈伤组织为供试材料,从共培养方式(固体或液体共培养)、农杆菌菌液浓度(OD600=0.4,0.6,0.8,1.0,1.2)、亚精胺浓度(0.5,1.0,1.5,2.0μmol/L)以及超声波处理(功率60 W,处理时间分别为0,1,2,3,4min)等方面对百合遗传转化体系进行优化。【结果】液体共培养能提高稳定表达率并减少褐化率,稳定表达率为13.00%,褐化率为55.00%;农杆菌菌液浓度(OD600)在0.8时为最适侵染浓度,此时稳定表达率为12.77%,褐化率为55.00%;侵染前向菌液中加入2.0μmol/L亚精胺能提高转化效率,稳定表达率为88.30%;当超声波功率为60W、处理时间为3min时,百合胚性愈伤的瞬时表达率和稳定表达率均最高,分别为88.90%和27.33%;潮霉素抗性植株经GUS组织化学染色、目标基因PCR检测及Southern blot分析,证明目的基因已整合到百合基因组中。【结论】转化条件的优化能够有效提高农杆菌介导的百合胚性愈伤组织的遗传转化率。
- 田菲菲刘雅莉杜灵娟权永辉
- 关键词：百合农杆菌亚精胺
- 超声波辅助农杆菌转化OT百合‘罗宾娜’的研究被引量：5
- 2013年
- 【目的】通过超声波处理辅助农杆菌转化OT百合小鳞片,提高农杆菌介导法转化百合的效率。【方法】以OT百合‘罗宾娜’(Lilium tenuifoliumoriental×tumpet‘Robina’)的再生小鳞片为外植体,分别以80W功率的超声波处理1,2,3,4,5min,通过超声波处理辅助根癌农杆菌进行外源基因的转化,同时以未进行超声波处理为对照;利用GUS组织化学法,分别检测转化脱菌后筛选培养7d的外植体和筛选培养60d后形成的潮霉素抗性再生植株叶片、小鳞片、根系的GUS瞬时表达和稳定表达,提取潮霉素抗性植株基因组DNA进行GUS和HPT基因的PCR扩增分析。【结果】超声波处理的农杆菌介导转化的百合外植体经GUS组织化学染色,多数可见蓝色斑点,且以3min超声波处理的蓝色最深;3min超声波处理的外植体对潮霉素的抗性率最高达48.85%,未经超声波处理的仅为15.56%,二者差异达显著水平。从53个潮霉素抗性再生植株的DNA样品中扩增得到了GUS基因和HPT基因的扩增片段,其中超声波处理3min的PCR阳性植株转化率最高,为28.30%,而未进行超声波处理的PCR阳性植株转化率仅为5.66%,初步证明外源基因可能整合到百合基因组中。【结论】20℃条件下80W功率超声波处理3min,可以有效提高农杆菌介导法转化OT百合的效率。
- 王岚刘雅莉娄倩田菲菲
- 关键词：超声波百合农杆菌转基因
- ‘Robina’百合悬浮胚性愈伤组织遗传转化的研究
- 百合（Lilium spp.）为五大鲜切花之一，花期长短决定了其切花品质和观赏价值。百合属于乙烯跃变型观赏花卉。花卉的衰老过程由乙烯调控，通过RNAi技术调控或者删除与乙烯生物合成过程中相关的关键基因（ACC氧化酶基因，...
- 田菲菲
- 关键词：百合RNA干扰
- 文献传递
