王齐
- 作品数:10 被引量:23H指数:3
- 供职机构:南方医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金教育部科学技术研究重点项目广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- Reversine对小鼠C2C12成肌细胞增殖与分化作用的初步研究被引量:2
- 2010年
- 目的初步探讨Reversine对小鼠C2C12成肌细胞增殖分化的影响。方法体外培养C2C12成肌细胞系.实验第一步分三组:A组:正常对照组,B组:1μM Reversine处理12h组,C组:1μM Reversine处理24h组。上述三组用Annexin-V/PI双染法处理C2C12成肌细胞并用流式细胞仪技术检测三组C2C12细胞凋亡的影响;实验第二步分五组:D组:正常对照组,E组:单独1μM Reversine处理7d,F组:单独成骨诱导7d,G组:1μM Reversine诱导12h+单独成骨诱导7d,H组:1μM Reversine诱导12h+1μM Reversine联合成骨诱导7d。上述五组光镜下观察细胞形态的变化,并通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测五组C2C12成肌细胞分化抑制因子(ID2),肌肉发生调节因子(Myogenin),生肌因子后结蛋白(Desmin)mRNA的表达。结果与A组相比,C组1μM Reversine处理24h能引起C2C12细胞明显的凋亡,B组1μM Reversine处理12h的C2C12细胞未见明显的凋亡。与D组相比,E组和H组的细胞增殖明显受到抑制,F组和G组细胞逐渐增殖并融合。结论 Reversine能够显著的抑制成肌细胞的增殖分化过程。
- 汪海仪吴佳明王乐禹秦建强余磊宋辰刚王齐邱小忠
- 关键词:细胞凋亡细胞增殖细胞分化
- 臂丛后束变异1例被引量:2
- 2008年
- 笔者在局部解剖学操作教学指导中,对1例成年男性尸体进行解剖操作时发现其右侧臂丛后束存在变异.
- 王齐黄美贤李鉴轶曼萍郑超
- 关键词:局部解剖学教学指导男性尸体
- 失神经萎缩肌组织中卫星细胞池的耗竭与Pax7的相关性研究被引量:6
- 2009年
- 目的探讨长期失神经骨骼肌在反复增殖分化过程中,肌卫星细胞池耗竭可能的信号通路。方法选用2月龄SD雄性大鼠9只,体重180~200g。以大鼠右侧为实验侧,制备腓肠肌失神经支配模型;左侧为对照侧,分离显示坐骨神经后缝合肌肉皮肤。观察大鼠一般情况,于术后3、7、21d各取3只大鼠,切取两侧腓肠肌进行大体观察后,行Pax7和MyoD免疫荧光染色观察及mRNA表达检测。结果9只大鼠术后均存活。实验侧后肢僵直,活动受限;对照侧肢体活动自如。术后各时间点实验侧腓肠肌均出现不同程度萎缩;对照侧腓肠肌较饱满有光泽。荧光染色观察显示,随失神经时间延长,实验侧MyoD阳性细胞数逐渐增多,21d达高峰,与对照侧比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。实验侧Pax7阳性细胞逐渐降低,3、7d与对照侧比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。实验侧MyoDmRNA表达逐渐升高,21d达高峰,各时间点实验侧均显著高于对照侧(P<0.05);实验侧Pax7mRNA表达逐渐降低,仅出现于3、7d,与对照侧比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论长期失神经肌萎缩引发的Pax7短暂上调提示卫星细胞池耗竭的原因之一在于细胞难以返回静止状态。
- 廖华王齐徐达传邱小忠余磊欧阳钧
- 关键词:失神经肌萎缩肌卫星细胞MYOD
- 三维骨骼肌组织体外构建的初步研究
- 骨骼肌组织工程的建立为各种骨骼肌病(肌营养不良、脊髓性肌萎缩等)提供了治疗希望,也为整形外科治疗创伤、肿瘤切除、失神经支配所致的肌组织缺失所期盼。尽管组织工程研究已经取得显著的进步,许多人工组织,包括皮肤、骨骼、软骨已经...
- 王齐
- 关键词:细胞基质生物相容性骨骼肌组织体外构建
- 文献传递
- C2C12细胞诱导构建三维骨骼肌组织被引量:4
- 2010年
- 目的利用修饰并铸型后的Sylgard 184凹槽与C2C12细胞复合培养、诱导分化,获取三维极性骨骼肌组织。方法 Sylgard 184双组分以10∶1的比例均匀混合并倒板,室温下静置固化并对其表面压槽铸型,Hank液冲洗凹槽,Matrigel和胶原的混合液均匀铺被凹槽底部,置生物安全柜待细胞基质自然干燥、紫外线照射消毒1h以上时接种C2C12细胞悬液,细胞增殖约80%汇合时改用分化培养基进行分化诱导,倒置显微镜下观察肌管的分化状态,RT-PCR方法检测肌管内myogenin和desmin基因mRNAs的表达,免疫荧光检测生肌转录因子myogenin和desmin蛋白的表达,扫描电镜观察肌管形态和肌管间的连接。结果 C2C12细胞在Sylgard 184弹性体铸型压槽中培养分化7d后,倒置显微镜下可见肌管呈极性分化,且肌管之间融合紧密;21d后,扫描电镜检测可见肌管之间排列紧密且相互重叠,形成膜样结构,厚度可达0.15mm,具有三维性;RT-PCR、免疫荧光检测证实极性分化肌管内具有myogenin和desmin的阳性表达。结论修饰并铸型的Sylgard 184凹槽具有一定的方向引导效应,能促进C2C12细胞分化形成多核肌管,且肌管呈极性重叠排列,形成三维极性骨骼肌组织结构。
- 王齐廖华秦建强余磊艾鹤英汪海仪邱小忠
- 关键词:MATRIGEL肌组织反转录-聚合酶链式反应C2C12细胞
- 不同基质材料修饰的Sylgard184与C2C12细胞的相容性被引量:3
- 2009年
- 目的筛选能提高硅酮橡胶弹性体(Sylgard184)与C2C12相容性的理想基质材料。方法Sylgard184双组分以10∶1的比例均匀混合,倒入6孔板的其中4孔,室温下静置固化,其余2孔做为空白对照培养组(A组);固化后的Sylgard184表面依次经过以下处理:I型胶原包被(B组)、层黏连蛋白包被(C组)、多聚赖氨酸包被(D组);未经包被(E组),每组共6个样本。在不同基质材料修饰的Sylgard184表面培养C2C12细胞,利用倒置显微镜观察5组C2C12细胞的增殖、分化状态,流式细胞术(FCM)检测增殖培养48h后C2C12细胞的分裂增殖情况,RT-PCR检测增殖和分化培养48h后C2C12细胞内MyoD、myogenin mRNA的表达。结果Sylgard184材料存在细胞毒性,E组接种的C2C12细胞在24h内全部漂浮死亡;D组的大多数细胞出现死亡,仅少数贴壁存活;而B、C两组材料包被后明显减少Sylagard184的毒性,增强其表面与C2C12细胞的相容性,且C组细胞处于合成期的百分比以及增殖期的MyoD和分化期Myogenin基因mRNA的表达水平均显著高于A、B两组(P〈0.05)。结论经层黏连蛋白包被后的Sylgard184表面更有利于C2C12细胞的增殖及分化活性的表达。
- 王齐廖华秦建强余磊邱小忠于巧莲艾鹤英
- 关键词:细胞基质相容性C2C12细胞
- IL-1β促进Schwann细胞增殖及分泌NGF的研究被引量:2
- 2008年
- 为观察白介素-1β(IL-1β)对Schwann细胞增殖及分泌神经生长因子(NGF)的影响,本研究取3d龄的大鼠坐骨神经纯化培养Schwann细胞,然后分4组进行处理。处理方法为:A组加入含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基,B组仅在纯化后第1d向培养基中加入2.0ng/mlIL-1β,C组每天向培养基中加入2.0ng/mlIL-1β,D组隔天向培养基中加入2.0ng/mlIL-1β,分别培养5d。倒置显微镜下观察Schwann细胞的形态,用抗S-100蛋白免疫组化鉴定Schwann细胞,经流式细胞仪(FCM)检测细胞的分裂增殖情况,用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测NGFmRNA表达的变化,酶联免疫吸附分析法(ELISA)检测细胞培养基中NGF蛋白的表达量。结果显示:D组Schwann细胞增殖率、NGFmRNA合成量和NGF蛋白表达量均显著高于其他三组(P<0.05)。此结果说明IL-1β能够促进Schwann细胞的分裂增殖,并且促进胞内NGFmRNA的合成及胞外NGF的分泌,其作用持续时间大约为2d。
- 于巧莲秦建强余磊邱小忠廖华王齐朴英杰
- 关键词:白介素-1ΒSCHWANN细胞神经生长因子周围神经
- PDGF-BB、IL-13和TGF-β1诱导真皮成纤维细分泌Ⅰ型胶原蛋白的比较被引量:4
- 2009年
- 目的用不同浓度的白介素13(IL-13)、转化生长因子β1(TGF-β1)和血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)在体外诱导真皮成纤维细胞,以甄选促进诱导Ⅰ型胶原蛋白高分泌的细胞因子。方法选用出生2d的SD大鼠背部皮肤进行真皮成纤维细胞原代培养,采用免疫荧光技术对其进行纯度鉴定。实验分为4组:PDGF-BB(30ng/mL)组、IL-13(100ng/m)组、TGF-β1(10ng/mL)组和不加任何处理因素的阴性对照组,用MTT法、ELISA检测在24h、48h、72h时的真皮成纤维细胞的增殖情况及培养液中Ⅰ型胶原蛋白的浓度。结果原代培养真皮成纤维细胞的纯度达90%以上。PDGF-BB、IL-13、TGF-β1均能促进真皮成纤维细胞增殖和Ⅰ型胶原蛋白分泌,在48h、72h时PDGF-BB组的培养液中Ⅰ型胶原蛋白浓度明显高于IL-13组、TGF-β1组及阴性对照组(P<0.05)。结论浓度为30ng/mL的PDGF-BB促进真皮成纤维细胞增殖和分泌Ⅰ型胶原蛋白的作用更为显著。
- 章明星侯致典周星星廖华王齐余磊丁自海
- 关键词:白介素-13血小板源性生长因子-BB
- 辛伐他汀降脂治疗对兔性激素和甲状腺激素的影响
- 近年的研究认为,由多种危险因素所导致的血管内皮细胞局部损伤后的炎症一增殖性反应是动脉粥样硬化性病变发生和进展的主要病理机制之一,而低密度脂蛋白胆固醇(LDL—C)尤其是氧化的LDL-C(oxLDL—C)在其中发挥着重要作...
- 王齐
- 关键词:降脂治疗他汀类药物性激素甲状腺激素动物实验
- 力学刺激对体外培养成肌细胞作用机制的研究进展
- 2007年
- 在体组织通常处于复杂的生长环境,其中力学刺激的作用极大地影响着组织的形态结构和功能。力学拉伸是维持细胞生存和生长的重要细胞外刺激,它能够调节细胞的新陈代谢和基因表达过程,在成肌细胞的激活、增殖与分化中扮演重要角色㈣。为克服骨骼肌组织工程研究中成肌细胞的诱导分化、三维培养及组织构建等方面的困难。使体外构建的骨骼肌更接近于在体的肌肉组织,应力拉伸在诱导成肌细胞的激活、增殖及分化方面的作用机制日益受到相关研究者的重视,并进行了大量的研究报导,本文就该领域的研究进展予以综述。
- 王齐廖华
- 关键词:细胞作用机制成肌细胞体外培养诱导分化生长环境