王碧君
- 作品数：9 被引量：14H指数：2
- 供职机构：上海交通大学医学院附属第三人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 癌性锚蛋白重复序列在胃癌细胞凋亡中的作用被引量：2
- 2010年
- 目的探讨癌性锚蛋白重复序列（Gankyrin）在人胃癌细胞的表达，以及在尼荚舒利诱导细胞凋亡过程中的改变。方法培养不同分化程度的人胃癌细胞系[MKN28（高分化）、AGS（低分化）、MKN45（低分化）和SGC7901（中分化）]，以尼美舒利处理细胞，应用四甲基偶氮唑盐试验和流式细胞术检测细胞活力及细胞凋亡，实时PCR和Western印迹法检测Gankyrin基因和蛋白表达。结果在4种不同分化程度的人胃癌细胞系中，均存在不同水平的Gankyrin基因和蛋白表达。尼美舒利以时间剂量依赖方式抑制AGS、SCC7901细胞增殖。与对照组相比，尼美舒利400μmol/L处理48h可诱导AGS、SGC7901细胞显著凋亡（细胞凋亡率分别为0．57％±0．19％比23．30％±2．50‰和0．88％土0．17％比16．80％±1．55％，P均〈0．01）。在AGS细胞凋亡过程中，Gankyrin基因和蛋白表达水平下降。以尼美舒利作用后24h（0.0035±0．0014）和36h（0．0980±0．0160）改变最为显著（对照组为0．4690±0．1190，P值均〈0．01）。结论在人胃癌细胞中存在Gankyrin基因和蛋白表达。Gankyrin可能参与尼美舒利诱导的AGS胃癌细胞凋亡。
- 张燕捷王碧君程芃包王洁朱黎明杨文燕戴强江佛湖
- 关键词：胃肿瘤尼美舒利细胞凋亡
- 应用酵母双杂交技术筛选与癌性锚蛋白重复序列相互作用的蛋白
- 2011年
- 目的:筛选与癌性锚蛋白重复序列(Gankyrin)相互作用的蛋白。方法:构建诱饵(Bait)质粒pGB-Psmd10-1,采用β-半乳糖苷酶滤膜分析检测其自身转录活性,以Bait质粒筛选人Hela细胞MATCHMAKER cDNA文库,共转染重复验证阳性克隆,并测序鉴定。结果:成功构建Bait质粒,经验证对报告基因LacZ无自激活作用。以Bait质粒筛选人Hela细胞cDNA文库,获得83个克隆,其中5个克隆经重复验证确定为阳性克隆,测序结果显示其cDNA为Psmc4的3段不同剪接体(NM_006503.2,NM_153001.1)。结论:在人Hela细胞中,Psmc4为与Gankyrin相互作用的蛋白。
- 包玉洁戴强杨文燕程芃王碧君张燕捷
- 关键词：酵母双杂交HELA细胞
- 早期胃癌的胃镜特征与病理分析被引量：2
- 2010年
- 胃癌是常见的消化道恶性肿瘤之一．临床上出现症状并确诊时往往已属进展期。进展期胃癌预后不佳，5年生存率仅20％～40％，而早期胃癌（early gastric carcinoma，EGC）的5年生存率则高达80％～90％。因此，胃癌的早期诊断显得尤为重要。为提高内镜下EGC的检出率，现将我院14年问经胃镜检查并手术切除确诊的EGC作一回顾性分析。
- 朱黎明王碧君包玉洁杨文燕戴强江佛湖吴云林
- 关键词：早期胃癌胃镜病理学
- 靶向抑制磷脂酰肌醇3-激酶110β因子的表达对人胃癌细胞生长影响的实验研究被引量：1
- 2016年
- 目的探讨沉默磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)p110β因子的表达对人胃癌细胞生长的影响。方法运用RNA干扰技术,合成靶向抑制PI3Kp110β的小干扰RNA(si RNA)序列并分别瞬时转染人胃癌细胞株AGS、SGC7901和MKN45(si-PI3Kp110β),作为实验组,未转染的细胞为空白对照组(Con),转染无义序列的si RNA为阴性对照组(si-NC)。采用RT-PCR和Western Blot方法验证瞬时转染后PI3Kp110β mRNA和蛋白在空白对照组(Con)、阴性对照组(si-NC)和实验组(si-PI3Kp110β)细胞中的表达水平,并通过MTT法检测细胞增殖及Annexin V-FITC/PI双染法检测AGS细胞凋亡率的情况。结果小分子干扰RNA(si RNA)瞬时转染人胃癌细胞株AGS、SGC7901和MKN45后,能有效下调PI3Kp110β在细胞内的表达水平。与阴性对照组(si-NC)比较,静默PI3Kp110β因子可减少AGS细胞的增殖(P<0.05),并明显增加AGS细胞的凋亡率(P<0.01)。结论小分子干扰RNA可有效下调PI3Kp在人胃癌细胞中的表达,沉默PI3Kp110β因子可有效抑制胃癌肿瘤细胞的增殖,促进细胞凋亡,提示针对PI3Kp110β蛋白的干预治疗有可能成为抑制胃癌细胞生长的一个新的治疗方法。
- 许慈蔡懿婷董晴晴王碧君戴强朱黎明
- 关键词：RNA干扰胃肿瘤凋亡
- RNA干扰抑制磷脂酰肌醇3-激酶p110β的表达增加氟尿嘧啶诱导人胃癌细胞凋亡的能力被引量：2
- 2016年
- 目的探讨沉默磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)p110β因子的表达增加氟尿嘧啶(FU)诱导人胃癌细胞凋亡的能力。方法运用RNA干扰(shRNA)技术构建携带靶向抑制PI3Kp110β分子的慢病毒载体LV-sh PI3Kp110β并感染人胃癌细胞株AGS(sh PI3Kp110β组),未转染的细胞为空白对照组(Con组),转染无义序列的对照慢病毒载体LV-shRNA为阴性对照组(sh NC组),荧光显微镜观察慢病毒的感染效率,RT-PCR和Western blot方法验证慢病毒感染后PI3Kp110β mRNA和蛋白在Con、shNC和shPI3Kp110β各组细胞中的表达水平,并用嘌呤霉素筛选PI3Kp110β静默的稳转细胞。在稳转细胞中和对照细胞中加入不同浓度FU分别作用24、48和72 h,通过MTT法检测Con、shNC和shPI3Kp110β各组细胞在加入氟尿嘧啶后细胞增殖的情况,并用Western blot方法检测可能涉及的凋亡相关信号分子的变化。结果慢病毒干扰RNA(shRNA)感染人胃癌细胞株AGS后,能有效下调PI3Kp110β在细胞内的表达水平并成功筛选PI3Kp110β静默的AGS稳转细胞;FU可抑制AGS细胞的增殖,其作用呈现浓度的依赖性;在该细胞中下调PI3Kp110β的表达可增加该细胞对FU抑制细胞生长的敏感性;下调胃癌细胞AGS内shPI3Kp110β分子的表达可显著增加FU诱导凋亡相关蛋白PARP的裂解,抑制Bcl-2蛋白的表达,从而促进胃癌细胞的凋亡。结论 PI3Kp110β shRNA转染人胃癌细胞AGS可有效下调该细胞中PI3Kp110β的表达,增加5-Fu抑制人胃癌细胞生长及促进其凋亡的敏感性,促进凋亡信号通路相关蛋白的活化。
- 许慈蔡懿婷董晴晴王碧君戴强朱黎明
- 关键词：RNA干扰胃肿瘤凋亡
- 尼美舒利对人胃癌细胞株MKN28细胞周期和PTEN、mTOR基因表达的影响被引量：1
- 2008年
- 背景:环氧合酶-2(COX-2)抑制剂的肿瘤化学预防作用已被广泛研究,但其作用机制仍未明确。PTEN为一多肿瘤抑制基因,对mTOR信号途径起负调控作用。目的:探讨选择性COX-2抑制剂尼美舒利对人胃癌细胞株MKN28细胞周期和PTEN、mTOR基因表达的影响。方法:以不同浓度尼美舒利干预MKN28细胞,甲基噻唑基四唑(MTT)实验检测细胞活力,流式细胞分析检测细胞周期,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测PTEN、mTOR mRNA表达。结果:200～600μmol/L尼美舒利作用24～60h对MKN28细胞增殖有明显抑制作用,且作用呈时间-浓度依赖性。200μmol/L和400μmol/L尼美舒利作用48h可使MKN28细胞周期阻滞于G0/G1期和G2/M期。400μmol/L尼美舒利作用36h和48h可显著上调MKN28细胞PTEN mRNA表达,作用24h和36h可显著下调mTOR mRNA表达。结论:尼美舒利可通过阻滞细胞周期、调控PTEN、mTOR基因表达抑制人胃癌细胞生长。mTOR信号途径与COX-2通路之间可能存在交互作用。
- 杨文燕戴强张燕捷朱黎明王碧君江佛湖
- 关键词：环氧合酶2抑制剂尼美舒利细胞周期PTENMTOR
- Gankyrin介导的p53及Rb蛋白降解与大肠癌的关系
- 张燕捷戴强程芃包玉洁王碧君
- 随着人们生活水平的提高和饮食结构的变化，大肠癌在中国的发病率呈增高趋势，因此，探索有效的大肠癌防治策略是关乎国民健康的重要课题.但大肠癌的治疗仍以外科手段为主，放疗及化疗效果皆不尽人意；且由于大肠癌的发生机制尚不明确，故...
- 关键词：
- 关键词：大肠癌肿瘤治疗
- 长效奥曲肽影响大鼠肝纤维化形成的研究被引量：3
- 2007年
- 目的:观察和探讨长效奥曲肽对四氯化碳(CCl4)诱发的大鼠肝纤维化的影响及机制。方法:SD大鼠40只,随机分为正常对照组(n=8)、肝纤维化组(n=16)、长效奥曲肽组(n=16)。通过40%CCl4皮下注射(3ml/kg)诱导建立大鼠肝纤维化模型,长效奥曲肽组同时给与长效奥曲肽(善龙,0.8mg/kg)肌肉注射,每28天给药1次。8周后观察大鼠肝脏大体形态、肝脏重量/体重比和组织学改变;用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原N端肽(PⅢNP)含量。结果:正常对照组大鼠肝脏大体形态和组织学无异常改变。肝纤维化组及长效奥曲肽组大鼠肝脏质地变硬,表面明显结节,组织学见肝细胞脂肪变性、坏死、纤维组织增生,假小叶形成等,但后者组织学损害显著轻于前者(P<0.05)。肝纤维化组及长效奥曲肽组肝脏重量/体重比均明显高于正常对照组(P<0.01),但长效奥曲肽组低于肝纤维化组(P<0.05)。正常对照组大鼠血清HA、PⅢNP含量分别为(18.5±3.8)ng/ml、(8.2±3.4)ng/ml,肝纤维化组大鼠血清HA、PⅢNP含量分别为(179.3±33.5)ng/ml,(59.6±15.6)ng/ml。高于正常对照组(P<0.01)。长效奥曲肽组大鼠血清HA、PⅢNP含量分别为(152.4±36.1)ng/ml,(41.2±13.4)ng/ml,显著高于正常对照组(P<0.01),但低于肝纤维化组(HAP<0.05;PⅢNPP<0.01)。结论:长效奥曲肽能减缓大鼠肝纤维化形成。
- 杨文燕吴建新戴强江佛湖赵力民张燕捷朱黎明王碧君
- 关键词：肝纤维化透明质酸
- 磷脂酰肌醇3-激酶p110β在胃癌中的表达及其与预后的关系被引量：4
- 2012年
- 目的:研究磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)p110β蛋白在胃癌组织中的表达,并探讨其与预后的关系。方法:收集本院1996至2001年59例胃癌患者手术标本,应用PI3Kp110β多克隆抗体免疫组织化学方法检测其不同类型胃癌组织及癌旁正常胃组织中PI3Kp110β的表达。采用生存分析法分析其与预后的关系。结果:在59例胃癌组织中,PI3Kp110β阳性表达47例;在正常胃组织中其阳性表达13例(P<0.05)。肿瘤分化程度差的病例中PI3Kp110β阳性或强阳性表达明显高于肿瘤分化程度较好的病例(χ2=6.110,P=0.013);胃壁浸润较深(T3+T4)的病例中PI3Kp110β阳性或强阳性表达显著高于胃壁浸润浅(T1+T2)的病例(χ2=10.745,P=0.001);有淋巴结转移病例中PI3Kp110β阳性或强阳性表达高于无淋巴结转移的病例(χ2=4.511,P=0.034)。PI3Kp110β表达阳性或强阳性患者,其生存率显著低于PI3Kp110β表达弱阳性或阴性患者(P<0.01);且PI3Kp110β表达弱阳性患者其生存率也低于PI3Kp110β表达阴性患者(P<0.05)。结论:PI3Kp110β在低分化、浸润深及淋巴结转移的胃癌中高表达,PI3Kp110β的阳性表达对判断胃癌患者的预后有参考价值。
- 许慈戴强杨文燕赵力民包玉洁王碧君程芃
- 关键词：胃癌免疫组织化学法预后
