王海峰
- 作品数：5 被引量：16H指数：2
- 供职机构：内蒙古农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 抗新城疫病毒糖蛋白单克隆抗体的研制及在免疫组化中的应用被引量：2
- 2009年
- 应用纯化的新城疫病毒(NDV)La Sota野毒株免疫Balb/c小鼠,最后一次免疫后3 d取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选到3株分泌抗NDV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,对各株单克隆抗体免疫球蛋白亚类及ELISA效价进行测定。结合单克隆抗体反应结果,鉴定出抗NDV NP蛋白的单克隆抗体,利用该单克隆抗体s3e1做免疫组化试验,用rLa Sota(重组La Sota第2代毒株)免疫2日龄雏鸡,接种后第5天检测到肝脏的部分肝细胞呈阳性反应。
- 董俊斌王海峰步志高
- 关键词：新城疫病毒单克隆抗体免疫组化
- 羊口疮病毒环介导等温扩增高效检测方法的建立被引量：3
- 2018年
- 羊口疮（ORF）的快速诊断对于该病的防控至关重要，而环介导等温扩增（LAMP）技术可以满足对羊口疮病毒（ORFV）高效性的现场检测需求。本试验对ORFV VIR基因扩增，通过优化反应条件，对LAMP检测ORFV进行了显色反应、特异性和灵敏性的检测，并进行了后续的临床检测。结果显示，利用优化的LAMP染色法，将呈现绿色的阳性组与橙色的阴性组区分开。对扩增的质粒和阳性对照样品的检测呈现出了阳性条带，而对山羊痘、绵羊痘、牛传染性鼻气管炎和牛副流感3型病毒的检测并无阳性条带。优化的LAMP检测ORFV的灵敏度比传统PCR高出1000倍。对15份临床样品检测的结果表明，优化的LAMP电泳和染色法对ORFV的检出率均为100％，与传统PCR检测结果相一致。上述结果表明优化的LAMP对ORFV的检测具有特异性、高灵敏性且更加方便等优点，从而更适用于现场的高效检测。
- 王海峰张七斤
- 关键词：羊口疮病毒环介导等温扩增技术
- 新城疫病毒地方分离株生物学特性的鉴定及疫苗候选株筛选的研究
- 本研究对自2000年以来从不同地区分离到的新城疫毒株中选取8株有代表性的毒株,经鸡胚终点稀释法克隆后,利用RT-PCR技术,成功地扩增出了8株NDV分离株F基因1629bp的核苷酸片段。利用DNAStar 6.0软件进行...
- 王海峰
- 关键词：新城疫病毒F基因基因型生物学特性HN基因
- 文献传递
- 羊口疮病毒环介导等温扩增高效检测方法的建立
- 本试验按照GenBank中发布的ORFV的VIR基因序列设计2对引物(一对外引物F3、B3和一对内引物FIP、BIP)。利用基因提取试剂盒提取ORFV的D NA,用外引物对ORFV的VIR基因进行序列扩增,使用紫外凝胶成...
- 王海峰
- 关键词：羊口疮羊口疮病毒环介导等温扩增技术
- 文献传递
- 羊口疮病毒QD/2015株B2L基因克隆及生物信息学分析被引量：8
- 2017年
- 为分析羊口疮病毒(ORFV/QD/2015株)B2L基因的分子特征,预测其编码蛋白的生物学功能,对其B2L基因进行PCR扩增、克隆及序列测定,应用生物信息学相关软件及方法,对扩增所得的基因进行序列分析,并对其编码蛋白的二级结构、细胞抗原表位、三级结构、跨膜结构域和信号肽等进行预测和分析。结果显示:ORFV/QD/2015株B2L基因序列长1 137 bp,编码379个氨基酸;该毒株与其他12株羊口疮病毒参考株的B2L基因核苷酸序列同源性为96.8%~99.7%,氨基酸序列同源性为96.8%~99.2%。系统进化分析显示,ORFV/QD/2015株与2015年分离到的ORFV/Shaan Xi/2015/China株亲缘关系最近;B2L基因编码蛋白二级结构以α-螺旋区域和β-折叠区域所占比例较大,预测此蛋白可能存在7个细胞优势抗原表位,无跨膜区域,无信号肽区域;三级结构呈弯曲状螺旋结构。
- 李智仲亮张静刘春羽范俊豪王海峰牛云雷张七斤
- 关键词：羊口疮病毒B2L基因生物信息学分析蛋白结构预测
