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王晋星一

作品数：10 被引量：21H指数：3
供职机构：贵阳医学院更多>>
发文基金：国家自然科学基金贵州省教育厅自然科学研究项目贵州省自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 9篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 10篇医药卫生

主题

  • 7篇蛋白
  • 6篇细胞
  • 4篇蛋白酶
  • 4篇钙激活中性蛋...
  • 3篇乳腺
  • 3篇肝癌
  • 3篇癌细胞
  • 2篇整合素
  • 2篇乳腺癌
  • 2篇水解
  • 2篇腺癌
  • 2篇激酶
  • 2篇干细胞
  • 2篇肝癌细胞
  • 2篇INTEGR...
  • 1篇蛋白表达
  • 1篇蛋白水解
  • 1篇调节蛋白
  • 1篇调节性
  • 1篇信号

机构

  • 9篇贵阳医学院
  • 2篇贵阳医学院附...
  • 1篇贵州医科大学

作者

  • 10篇王晋星一
  • 6篇陈腾祥
  • 6篇胡晓霞
  • 5篇陈妮
  • 4篇潘娅
  • 3篇张金娟
  • 2篇臧贵勇
  • 2篇陈林
  • 2篇王艳
  • 1篇王寒琪
  • 1篇董宇华
  • 1篇徐国强
  • 1篇邸亚男
  • 1篇陈我婵
  • 1篇张祥令
  • 1篇毛大华
  • 1篇杨国珍
  • 1篇潘卫
  • 1篇王金利
  • 1篇王宁

传媒

  • 6篇贵阳医学院学...
  • 2篇世界华人消化...
  • 1篇中国细胞生物...

年份

  • 4篇2015
  • 4篇2014
  • 1篇2013
  • 1篇2011
共 10 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
肝星形细胞分泌的趋化因子CXCL1在肝癌转归中的作用被引量：1
2015年
该文探讨了人肝星形细胞(hepatic stellate cells,HSC)对肝癌细胞(Hep G2、SMMC-7721)的迁移、侵袭能力和上皮–间质转化(epithelial-msenchymal transition,EMT)的影响及其机制。采用条件培养法培养肝癌细胞,利用细胞划痕和Transwell实验分析肝星形细胞对肝癌细胞的迁移和侵袭作用。Western blot分析肝星形细胞自身及其分泌到培养液中趋化因子CXCL1[chemokine(C-X-C motif)ligand 1]和肝癌细胞的CXCL1受体2—CXCR2(CXCL1 receptor 2)的表达量,以及条件培养下肝癌细胞中p-PI3K、p-AKT、p-GSK-3β和Snail的表达变化。激光共聚焦显微术和Western blot检测肝癌细胞上皮标志物E-cadherin、间质标志物N-cadherin和Vimentin的表达变化。结果显示,在HSC中大量表达并分泌趋化因子CXCL1,而肝癌细胞Hep G2、SMMC-7721中高表达CXCR2。肝癌细胞通过条件培养后,细胞形态改变,细胞黏附下降,细胞迁移和侵袭能力增强,上皮标志物E-cadherin蛋白表达下调、间质标志物N-cadherin蛋白和Vimentin蛋白表达上调,PI3K/AKT信号通路中的关键成员PI3K和AKT磷酸化水平上调,p-GSK-3β和转录因子Snail表达上调。在肝癌细胞条件培养下加入CXCR2受体的特异性抑制剂(SB265610)后,肝癌细胞上皮标志物E-cadherin蛋白表达上调、间质标志物N-cadherin蛋白和Vimentin蛋白表达下调,p-PI3K、p-AKT、p-GSK-3β和Snail的表达下调。以上结果说明,肝星形细胞可能通过CXCL1/CXCR2轴活化PI3K/AKT信号通路并最终促进肝癌细胞上皮–间质转化。
黄小琼王伟孙达权陈腾祥王晋星一徐国强
关键词：肝癌肝星形细胞
汉丹肝乐对大鼠肝纤维化PI3K/Akt信号通路的影响及意义被引量：5
2014年
目的:观察磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶(phosphatidylinositol-3 kinase/Akt,PI3K/Akt)信号通路在CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝组织中的变化并探讨中药汉丹肝乐对他的影响.方法:选取SD大鼠30只,随机分为正常对照组、肝纤维化8 wk组及汉丹肝乐治疗组,每组各10只.肝纤维化组及汉丹肝乐治疗组大鼠按0.3 mL/100 g体质量的剂量皮下注射40%CCl4花生油溶液,每隔3 d注射1次,造模时间为8wk;对照组大鼠皮下注射等量花生油溶液.造模结束后汉丹肝乐治疗组大鼠给予1.0 g/kg的汉丹肝乐灌胃治疗,1次/d,治疗时间为8 wk.HE染色观察肝组织病理学改变;采用免疫组织化学技术及Western blot检测肝组织中PI3K/Akt信号通路中关键分子Akt1、磷酸化Akt1的表达变化,同时应用TUNEL法检测肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)凋亡情况.结果:与正常对照组比较,肝纤维化8 wk组大鼠肝组织中Akt1(2.73±0.52 vs 9.60±2.28,P<0.01)、磷酸化Akt1(0.92±0.40 vs 6.51±1.39,P<0.01)的表达均显著增加,差异具有显著性;经汉丹肝乐治疗后,肝组织中Akt1(9.60±2.28 vs 5.36±1.59,P<0.01)、磷酸化Akt1(6.51±1.39 vs 2.08±0.85,P<0.01)的表达均显著下降;同时,TUNEL法检测发现汉丹肝乐组大鼠肝组织中HSC凋亡率显著高于肝纤维化8 wk组(1.07±0.32 vs 4.24±0.86,P<0.01).结论:PI3K/Akt信号通路在肝纤维化的发生发展过程中发挥重要作用,而汉丹肝乐可通过抑制该信号通路,促进HSC的凋亡来发挥抗肝纤维化的作用.
胡晓霞王艳王晋星一
关键词：肝纤维化磷脂酰肌醇-3激酶肝星状细胞
细胞培养密度对MCF7细胞calpain2和FAK的水解及活性影响被引量：1
2014年
目的:探讨细胞培养密度对乳腺癌MCF7细胞钙激活中性蛋白酶2(calpain 2)和焦点黏附蛋白(FAK)的水解及活性的影响。方法:常规培养乳腺癌细胞MCF7,分别以1×106、5×106、1×107个细胞传代于不同的6 cm皿中,培养36 h后,形成不同的培养密度(分别为低密度、正常密度和高密度),裂解细胞,提取蛋白行Western blot检测calpain 2和FAK的表达,用磷酸化抗体检测FAK的Y397位点磷酸化水平;MCF7细胞高密度培养并calpain 2抑制剂处理后,用Western blot法检测FAK水解情况和磷酸化水平。结果:不同密度培养对calpain 2的表达没有明显影响,但可影响calpain 2的水解,培养密度加大,水解程度加强;培养密度也可以影响FAK的水解模式,低密度培养细胞的FAK以较大的水解片段为主,高密度培养的FAK则以较小片段为主,高密度培养细胞FAK Y397磷酸化水平比低密度的低;给予calpain 2特异性抑制剂后,高密度培养细胞FAK大片段增多,小片段减少,其Y397位点的磷酸化水平增高。结论:细胞高密度培养可使MCF7细胞calpain 2的活性增强,FAK的水解程度加大,降低FAK的磷酸化。
陈腾祥霍建云王宁王金利王晋星一陈妮陈林崔唱张金娟毛大华胡晓霞
关键词：钙激活中性蛋白酶细胞密度细胞培养
Calnexin及GRP78在大鼠非酒精性脂肪肝细胞凋亡中的作用被引量：2
2014年
目的:观察大鼠在非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)形成过程中肝细胞钙联蛋白(calnexin,CNX)及葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)的表达变化,旨在探讨CNX及GRP78在非酒精性脂肪肝发生发展中的作用.方法:♂SD大鼠20只,随机分为正常组和NAFLD组,每组各10只.NAFLD组大鼠采用高脂高糖饮食制备非酒精性脂肪肝动物模型,正常组大鼠则给予普通饲料喂养,造模时间为12 wk.测定各组大鼠血清甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白(low-density lipoprotein,LDL)、高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL)及游离脂肪酸(free fatty acids,FFA)的含量;采用实时荧光定量PCR检测肝组织中CNX和GRP78 mRNA的表达变化;采用Western blot检测肝组织中CNX、GRP78、CCATT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCATT/enhancer-binding protein homology protein,CHOP)及磷酸化JNK(p-JNK)蛋白的表达变化;同时采用TUNEL法检测肝细胞凋亡情况.结果:与正常组比较,NAFLD组大鼠血清中TG、TC、LDL、FFA含量明显增高(P<0.05或P<0.01),而HDL则明显下降(P<0.01);Western blot结果显示NAFLD组大鼠肝组织中CNX、GRP78、CHOP及p-JNK蛋白的表达显著高于正常组大鼠;实时荧光定量PCR结果显示,与正常组大鼠比较,NAFLD组大鼠肝脏中CNX及GRP78 mRNA水平明显增高(P<0.05);同时,TUNEL法检测肝细胞凋亡发现NAFLD组大鼠肝细胞凋亡数目较正常组大鼠显著增加(P<0.01).结论:钙联蛋白及GRP78表达上调可能参与了非酒精性脂肪肝的发生发展过程.
胡晓霞王艳王晋星一
关键词：葡萄糖调节蛋白78
肝癌细胞微球体培养对干细胞相关蛋白表达的影响
目的: 研究肝癌细胞系 LM3经微球体培养后对干细胞相关蛋白Oct-4、Sox2、Wnt-5b、Nanog表达的影响，同时对微球体的特征进行鉴定,为肝癌干细胞的研究提供实验基础。&lt;br&gt;　　方法: 应用干细胞...
王晋星一
关键词：肝癌微球体蛋白表达干细胞
文献传递
钙激活中性蛋白酶-2对整合素β4水解的影响被引量：3
2015年
目的:观察乳腺癌细胞系MCF7细胞中,钙激活中性蛋白酶2(calpain-2)对整合素(integrin)β4水解的影响。方法:利用"短发夹"RNA(shRNA)和微小RNA(mirRNA)技术结合的calpain-2基因沉默(gene silencing)慢病毒质粒(GIPZ lentiviral shRNAmir)转染乳腺癌细胞株MCF7,嘌呤霉素筛选稳定沉默calpain-2基因的细胞株,细胞株传4代,用荧光显微镜观察转染效率,用蛋白质印迹(Western blot)实验检测calpain-2基因沉默效率及integrinβ4水解的情况。结果:嘌呤霉素筛选、细胞传4代,荧光显微镜下观察显示转染和筛选后,EGFP表达阳性的MCF7细胞的比例分别达到(95.6±2.6)%(空shRNAmir载体)、(97.1±1.7)%(Calpain-2 shRNAmir1)和(97.7±0.2)%(Calpain-2 shRNAmir 2),差异无统计学意义(P>0.05);Western blot结果显示,基因沉默的MCF7细胞中calpain-2的表达被明显抑制,相对于空shRNAmir载体转染的MCF7细胞,差异有统计学意义(P<0.01),calpain-2的表达下调到21.5%(Calpain-2 shRNAmir 1)和18.8%(Calpain-2 shRNAmir 2),空shRNAmir载体转染的MCF7细胞中calpain-2的表达与未转染的MCF7细胞比较,差异无统计学意义(P>0.05);比较calpain-2基因沉默和空shRNAmir载体转染的MCF7细胞,发现integrinβ4均被水解,水解片段的分子量主要有200 k D、130和95 k D;calpain-2基因沉默后,calpain-2基因沉默MCF7细胞中200 k D的水解片段比空shRNAmir载体转染的MCF7细胞减少(P<0.01)。结论:在乳腺癌细胞MCF7中,calpain-2可能参与integrinβ4的200 k D片段的形成,从而参与调整integrinβ4的构象变化。
胡晓霞霍建云张金娟潘娅王晋星一陈妮张祥令陈腾祥
关键词：乳腺肿瘤蛋白水解基因沉默
细胞培养密度对MCF7乳腺癌细胞integrin β4水解的影响被引量：2
2015年
目的:研究细胞培养密度对MCF7乳腺癌细胞integrinβ4水解机制。方法:常规培养高密度和低密度MCF7乳腺癌细胞,分别给予钙离子螯合剂和肝素处理,用Western blot检测不同培养密度MCF7细胞integrinβ4的水解情况;用Fluo-3 AM作为钙离子荧光探针,激光共聚焦扫描显微镜检测细胞内钙离子的分布。结果:Western blot检测结果显示,在低密度和高密度培养的MCF7细胞中,integrinβ4的水解模式不同;在高浓度培养的细胞中,200 k D integrinβ4片段产生增多;激光共聚焦扫描显微镜观察发现,低密度培养MCF7细胞中,钙离子的绿色荧光主要成团或颗粒状分布,而且与红色荧光有较多的重合,部分钙离子分布于细胞核内;在高密度培养的细胞中,钙离子在细胞质膜和细胞核中的定位较少;钙离子螯合剂BAPTA-AM处理可使200 k D integrinβ4明显减少;10-6mol/L的肝素能够减少MCF7细胞200 k D水解片段的增多,随着肝素浓度的增高,抑制效果有所增强;相对于BAPTA-AM,10-4mol/L肝素的抑制效应减弱。结论:高密度培养的MCF7细胞中,钙离子从钙库中释放,细胞外内流增多,激活calpain 2,导致200 k D integrinβ4水解片段增多。
严莉莎霍建云董宇华潘娅王晋星一陈妮臧贵勇胡晓霞陈腾祥
关键词：钙离子肝素
雌二醇对三阴乳腺癌细胞integrin β4水解作用的影响被引量：3
2015年
目的:研究三阴乳腺癌(TNBC)MDA-MB-231细胞中雌二醇对整合素(integrin)β4水解的促进作用。方法:常规培养MDA-MB-231细胞至指数增长期,分别给予17β-雌二醇、雌激素受体(ER)特异性阻断剂4-羟基他莫西芬(OHT)和G蛋白偶联受体30(GPR30)特异性阻断剂G-15干预30 min,采用蛋白质印迹(Western blot)实验检测钙激活中性蛋白酶2(calpain 2)的表达和integrinβ4水解的情况。结果:17β-estradiol在短时间内可促进MDA-MB-231细胞130和95k D integrinβ4水解片段的产生,促进作用呈浓度依赖方式,而对calpain 2表达没有明显影响;4-OHT不能阻断17β-estradiol对integrinβ4的水解作用,且其本身可促进integrinβ4水解;G-15能阻断17β-estradiol对integrinβ4的水解。结论:在TNBC MDA-MB-231细胞中,17β-estradiol可通过GPR30促进130和95k Dintegrinβ4水解片段的产生。
陈腾祥严莉莎霍建云张金娟潘娅王晋星一陈妮臧贵勇胡晓霞
关键词：三阴乳腺癌
不同迁移能力肝癌细胞中干细胞相关基因Nanog、Sox2和Oct4的表达被引量：5
2013年
目的:观察Nanog、Sox2和Oct4干细胞相关基因在四株不同迁移能力肝癌细胞系中的表达。方法:常规细胞培养无迁移能力的HepG2细胞、低迁移能力的MHCC97-L细胞、中迁移能力的LM3细胞及高迁移能力的MHCC97-H细胞,采用免疫荧光组织化学方法观察四株肝癌细胞系中肝癌干细胞相关基因Nanog、Sox2和Oct4的表达。结果:干细胞相关基因Nanog、Oct4和Sox2在四株迁移能力不同的肝癌细胞系中不同程度表达,且在细胞膜、细胞核、细胞浆中的表达量亦不同;Nanog在细胞核表达,并随着细胞迁移能力增强而呈递增趋势;Sox2在不同迁移能力肿瘤细胞中表达无明显规律,而Oct4在高迁移能力肝癌细胞的细胞浆及核中高表达。结论:Nanog、Sox2和Oct4在不同迁移能力肝癌细胞系中均有表达,但无明显规律,推测肝癌干细胞与肝癌的发生可能有密切关系。
王寒琪王晋星一陈林陈妮陈我婵潘娅洪阳陈腾祥
关键词：肝癌细胞肝癌干细胞NANOGSOX2
MLCK定量检测的双抗体夹心ELISA方法建立被引量：1
2011年
目的:建立定量检测人肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的双抗夹心ELISA法。方法:用抗MLCK兔多克隆抗体包被酶标板,1%小牛血清白蛋白(1%BSA)作为封闭液,抗MLCK羊多克隆抗体和HRP-兔抗羊抗体分别为包被抗体和检测抗体,建立双抗体夹心ELISA法,并进行了实验条件的优化;同时对新建立方法的灵敏度、精密度进行了评价。结果:包被抗体和检测抗体最佳工作浓度分别为1∶2 000和1∶200,该方法的敏感性为5.16 mg/L,低、高浓度样本批内和批间变异系数分别为5.9%、6.1%和16.0%、19.0%。结论:建立了MLCK定量检测的ELISA方法,其灵敏度和精密度均较好,为人血清MLCK的检测提供了一种简便快捷方法。
邸亚男王晋星一王猛李兴杨国珍潘卫
关键词：肌球蛋白轻链激酶酶联免疫吸附测定生物技术
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