王娟萍 作品数:58 被引量:290 H指数:11 供职机构: 山西省农业科学院 更多>> 发文基金: 山西省科技攻关计划项目 山西省农业科学院科技攻关项目 山西省回国留学人员科研经费资助项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
猪繁殖与呼吸综合征病毒山西分离株ORF5基因的序列分析 2013年 采用RT-PCR方法对2009—2011年山西省疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)阳性病料进行克隆和测序,获得5个ORF5基因片段,并对其基因序列和推导的氨基酸序列与国内外毒株进行了同源性分析。序列分析结果表明,5个ORF5基因序列之间核苷酸同源性为97.7%~98.5%,与欧洲型代表株LV、美洲型代表株VR-2332、2006—2007年国内分离的PRRSV变异株(JXA1、HuN、HUN4、HUB1)、2006年以前中国分离毒株(CH-1a、HB-1(sh)、HB-2(sh))和2个疫苗株(RespPRRS MLV、MLV RespPRRS/Repro)核苷酸同源性分别为63.5%~64.0%、88.7%~89.2%、97.7%~99.3%、88.1%~96.7%和88.6%~89.1%;氨基酸同源性分别为56.1%~56.6%、87.8%~88.8%、96.6%~98.5%、85.9%~93.2%、86.8%~87.9%。结果表明山西地区的PRRSV流行毒株均属于美洲型,且毒株同源性很高,亲缘关系紧密。 刘文俊 姚敬明 吴忻 王娟萍 孟帆 韩一超 樊振华 米瑞娟 罗甜甜 温永亮关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF5基因 猪流行性腹泻病毒山西分离株S基因遗传变异分析 被引量:4 2017年 为分析山西地区猪流行性腹泻病毒(PEDV)的遗传变异情况,试验利用RT-PCR方法对2014-2015年山西省疑似猪流行性腹泻的阳性病料进行克隆和测序,获得4个S基因片段,并对其基因序列和推导的氨基酸序列与国内外毒株进行比对分析。序列分析结果显示,4株PEDV山西分离株的S基因与CV777vaccine相比,在170~171bp之间插入12个核苷酸,在401~402、454~455bp之间均插入3个核苷酸,在461~468bp之间缺失6个核苷酸。4株PEDV山西分离株S基因之间核苷酸和氨基酸同源性分别为99.2%~99.8%和98.6%~99.7%,与2011-2015年中国流行毒株、CV777vaccine、attenuated DR13、CV777的核苷酸同源性分别95.0%~98.5%、93.2%~93.6%、93.2%~93.7%、93.7%~94.4%,氨基酸同源性分别为96.2%~98.9%、91.9%~92.6%、92.1%~92.9%、92.9%~94.0%。遗传进化树分析结果表明,PEDVS基因分为3个群,4株PEDV山西分离株属于第一群,与2010年以后国内流行毒株(除AH-M、SQ2014)的亲缘关系较近,与2010年以前中国流行毒株、2个日本株、7个韩国株、2个疫苗株的亲缘关系较远。研究结果提示山西省流行的PEDV发生较明显的变异,需研发新的疫苗来控制PEDV的暴发。 刘文俊 姚敬明 吴忻 孟帆 韩一超 王娟萍 樊振华 薛翼鹏 米瑞娟 李红丽 赵岳关键词:猪流行性腹泻病毒 S基因 免疫增强剂对猪瘟疫苗细胞免疫的影响 被引量:10 2015年 为了查明免疫增强剂是否能够提高猪瘟疫苗的细胞免疫效果,采用猪用转移因子、黄芪多糖注射液和猪瘟疫苗专用稀释液直接稀释猪瘟兔化高效细胞弱毒苗的方法进行了猪瘟疫苗免疫试验,并比较免疫后不同时间段内猪血清中的白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,综合评价3种不同猪瘟疫苗稀释液对猪瘟疫苗细胞免疫效果的影响。结果表明,猪用转移因子和黄芪多糖能不同程度地提高IFN-γ和TNF-α细胞因子的含量,降低IL-4细胞因子的含量,且猪用转移因子作用较强。因此,转移因子和黄芪多糖均可以提高猪瘟疫苗的细胞免疫效果,且猪用转移因子有较强增强细胞免疫的作用。 孟帆 王娟萍 姚敬明 吴忻 刘文俊 樊振华 米瑞娟 李红丽 雷宇平 吉涛关键词:免疫增强剂 猪瘟疫苗 细胞免疫 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒山西分离株的鉴定及部分Nsp2基因序列分析 被引量:1 2012年 本研究采集山西省不同地区的发病猪脏器组织与血液样品,采用特异性RT-PCR方法检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)样品16份,应用设计的特异性引物扩增出Nsp2基因序列,利用DNAStar生物信息学分析软件,对获得的序列与国外代表毒株VR-2332、国内代表毒株CH-1a、BJ-4、HB-1及PRRSV变异毒株HuN4和JXA1的序列进行了比较,绘制系统发生树。氨基酸序列比较分析发现山西省流行毒株同源性分别在69.8%~71.7%、85.3%~87.9%、68.7%~70.6%、91.7%~94.3%、94.3%~98.5%、95.1%~98.9%。所获得的16株病毒之间的同源性在90.9%~100%之间。研究结果发现所获得的序列同源性与国内近几年流行的PRRSV的变异毒株HuN4和JXA1毒株的序列同源性最高,分别在94.3%~98.5%与95.1%~98.9%之间,Nsp2基因缺失位置一致,其Nsp2均有2个部位出现了缺失,即Nsp2基因分别为编码1个氨基酸的3个核苷酸的缺失和编码29个氨基酸的连续87个核苷酸的缺失,结果表明,山西省目前流行PRRSV的变异毒株与国内流行株属于同一分支。 吴忻 韩一超 王娟萍 刘文俊 姚敬明 孟帆 武守艳 雷宇平 陈剑波 樊振华 米瑞娟关键词:高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 NSP2基因 猪“无名高热病”的暴发与防控措施探讨 被引量:3 2007年 2006年6月份以来,华东、华南、华中、华北等省份的一些猪场暴发一种以猪食欲不振,甚至废食、高热、传染快、死亡率高达50%~100%的怪病。经过现场诊断和分析,专家组认为它是以猪瘟、蓝耳病、猪流感、猪圆环病毒为主,多种细菌、支原体和弓形体的混合感染。现对该病的流行情况和各地的防控措施总结如下,以供参考。 姚敬明 王娟萍 程海龙关键词:无名高热病 防控措施 猪场 猪圆环病毒 食欲不振 山西猪伪狂犬病毒gE基因主要抗原区的遗传变异分析 被引量:3 2017年 根据Gen Bank中收录的PRV Becker株的gE基因序列,设计了合成1对引物,对山西PRV流行株包含主要抗原表位区的gE部分基因进行了PCR扩增,并进行克隆与序列分析。经测序,山西PRV流行株包含主要抗原表位区的gE部分基因核苷酸序列长度为997 bp,编码322个氨基酸。测序后对山西流行株包含主要抗原表位区的gE基因核苷酸序列和推导出的氨基酸序列与18株PRV参考株进行了遗传变异分析,结果显示,山西PRV流行株包含主要抗原表位区的gE基因核苷酸序列与18株PRV参考株之间同源性为97.8%~100%,其中与YY株(湖南)、SC-1-2015株(四川)、HNXX2012株(湖北)、HN-DZ株(广东)及DL14-08株(长春)同源性最高,均为100%,与75V19株(比利时)同源性最低,为97.8%。山西PRV流行株包含主要抗原表位区的gE基因核苷酸序列推导的氨基酸序列与18株PRV参考株之间同源性为96.1%~100%,其中与YY株(湖南)、SC-1-2015株(四川)、HNXX2012株(湖北)、HN-DZ株(广东)及DL14-08株(长春)同源性最高,均为100%,与Rice(美国)同源性最低,为96.1%。山西PRV流行株包含主要抗原表位区的gE基因序列的遗传进化分析表明,山西PRV流行株属于2012年以来分离的PRV变异株群,与YY株和HNXX2012株亲缘关系较近,与欧洲和美洲分离株亲缘关系较远。 孟帆 樊振华 吴忻 姚敬明 王娟萍 米瑞娟 薛翼鹏 赵岳关键词:猪伪狂犬病毒 GE基因 多重PCR/RT-PCR技术检测PRRSV、PPV、PRV和PCV-2 被引量:16 2009年 根椐GenBank中已发表的猪蓝耳病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病毒(PRV)和猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)等4种病毒基因序列,对各病毒基因区进行同源性分析,确定PRRSV M和N、PPV VP2、PRVgD、PCV-2ORF2基因的保守区为各病毒的诊断靶序列。在建立各病毒单项PCR技术的基础上,优化多重PCR反应条件,建立了4种病毒的四重PCR技术,可同时扩增PRRSV的660 bp(北美株),PPV的313 bp,PRV的217 bp,PCV-2的447 bp的特异性片段。用82份临床病料对本研究多重PCR技术和单项PCR/RT-PCR技术进行对比验证,结果显示,两者的总符合率为93%以上。表明建立的多重PCR检测方法,具有特异、快速、准确的特点,可用于对这4种病毒的同时检测和鉴别诊断。 王娟萍 姚敬明 高英杰 金扩世 丁馥香 周胜花 曹日亮 贺东昌 雷宇平关键词:多重PCR PRRSV PPV PRV PCV2 山西猪瘟野毒株E_2基因序列测定与遗传变异多样性分析 被引量:7 2014年 为了解山西地区猪瘟病毒(CSFV)流行毒株的遗传变异情况,采用RT-PCR方法,2013年从山西部分地区分离出5株CSFV流行毒株,并进行了E2全基因扩增、克隆与序列测定,应用DNAStar分析软件对所测定的5株毒株与国内外参考毒株的相应序列进行了同源性分析,绘制系统发育进化树。结果表明:5株CSFV流行毒株之间E2基因核苷酸序列与所推导氨基酸序列的同源性分别为81.4%~100%和87.9%~100%,与CSFV石门毒株(Shimen株)的核苷酸与氨基酸的同源性分别为82.9%~94.8%和89.0%~94.9%,与CSFV兔化弱毒株(HCLV株)的核苷酸与氨基酸的同源性分别为81.6%~99.6%和87.9%~99.5%,与17株来自各国不同地区的CSFV参考毒株的核苷酸与氨基酸的同源性分别为81.5%~99.6%和86.3%~99.7%。经系统发育关系分析,4株属于基因2群,且705、713、725、729、734和738位氨基酸发生置换,另外1株属于基因1群。本研究揭示了山西猪瘟流行毒株的遗传变异多样性现状。 姚敬明 孟帆 雷宇平 吴忻 王娟萍 刘文俊 韩一超 樊振华 张瑞琴 米瑞娟关键词:E2基因 2016年春季山西部分种猪场乳猪暴发流行性腹泻的调查 被引量:4 2017年 2016年春季山西部分种猪场乳猪暴发腹泻,通过在山西太原、祁县、介休、昔阳、临汾、翼城、离石、朔州8个地市的10个临床表现腹泻症状的规模化种猪场进行调研,对乳猪病死情况进行了统计分析,并采集39份病死猪的小肠内容物进行猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)检测;同时采集109份血清和85份乳汁进行PEDV IgA抗体检测。结果显示:1—3月份10个猪场共有8 326头乳猪发生腹泻,死亡6 266头,死亡率为75.26%;病原检测PEDV阳性率为64.1%,TGEV阳性率为2.56%;血清中PEDV IgA抗体的阳性率为32.11%,乳汁中PEDV IgA抗体的阳性率为96.47%。病原检测结果表明,2016年春季山西省规模化种猪场乳猪腹泻的主要病原为PEDV,乳汁中PEDV IgA抗体水平与PEDV疫苗免疫效果或野毒感染呈正相关。 薛翼鹏 王娟萍 刘文俊 吴忻 孟帆 姚敬明 樊振华 李红丽 米瑞娟关键词:乳猪 腹泻 猪流行性腹泻病毒 IGA 猪瘟兔化高效细胞疫苗与猪用转移因子联合免疫程序试验 被引量:2 2015年 为提高仔猪40-70日龄猪瘟疫苗免疫抗体水平,采用猪瘟兔化高效细胞疫苗与猪用转移因子联合免疫的方法,进行了猪瘟疫苗免疫试验。在乳猪20日龄用猪用转移因子直接稀释猪瘟兔化高效细胞弱毒苗进行首免的试验1组与在断奶仔猪30日龄首免用同样方法稀释疫苗的试验2组相比,试验1组猪瘟抗体S/P平均值40日龄提高48.38%,差异显著(P〈0.05);50日龄提高54.80%,差异显著(P〈0.05);整个试验期提高14.99%。比采用常规方法常规程序的对照组猪瘟抗体S/P平均值40日龄提高104.28%,差异极显著(P〈0.01);50日龄提高97.74%,差异极显著(P〈0.01);60日龄提高111.19%,差异极显著(P〈0.01);70日龄提高37.83%,差异不显著(P〉0.05);80日龄提高37.89%,差异显著(P〈0.05);整个试验期提高39.93%。证实了在乳猪20日龄用猪用转移因子直接稀释猪瘟兔化高效细胞弱毒苗进行首免、30日龄断奶前后二免、60日龄左右三免的猪瘟疫苗程序,可以提高仔猪40-70日龄期间免疫抗体水平,阳性率在88%以上,为有效控制猪瘟流行提供了依据。 孟帆 王娟萍 姚敬明 樊振华 吴忻 刘文俊 李红丽 米瑞娟关键词:免疫程序