王亦东
- 作品数：5 被引量：6H指数：2
- 供职机构：九江学院基础医学院更多>>
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- 逆转录病毒介导ARLTS1基因表达抑制肝癌细胞HepG2的增殖
- 2010年
- 目的构建高表达ARLTS1基因的逆转录病毒载体(PLEGFP-IRES-ARLTS1),探讨外源性ARLTS1基因对人肝癌细胞HepG2增殖的影响。方法 RT-PCR扩增ARLTS1 cDNA,克隆至重组逆转录病毒载体PLEGFP-IRES。重组质粒转染病毒包装细胞PT67,产生病毒后感染HepG2细胞,荧光显微镜检测绿色荧光蛋白表达,Western Blot检测细胞内ARLTS1蛋白表达,并对感染后细胞的增殖状况进行分析。结果酶切及基因测序证实重组质粒PLEGFP-IRES-ARLTS1构建成功;荧光显微镜观察到70%左右靶细胞内有绿色荧光蛋白表达;Western Blot证实,ARLTS1蛋白在HepG2-ARLTS1内表达显著升高;MTT实验显示,HepG-2-ARLTS1细胞组体外增殖率较各对照组明显降低(P<0.05)。结论获得了稳定表达外源性ARLTS1蛋白的HepG2细胞株,外源性ARLTS1抑制HepG2细胞增殖,为后续研究ARLTS1抗肿瘤机制奠定了基础。
- 熊建军干丽君吴周环吴萍王亦东李卫东
- 关键词：逆转录病毒载体肝癌细胞
- 水溶性壳聚糖对3T_3TK成纤维细胞生长及表型的影响被引量：2
- 2006年
- 目的：本研究利用成纤维细胞作为肌腱修复组织工程的种子细胞,采用可降解的壳聚糖作为生物材料,明确水溶性壳聚糖对3T3TK成纤维细胞生长及表型的影响,为后续研究奠定基础。方法：3T3TK成纤维细胞常规培养,采用CellTilter-GloTM细胞活力测试盒检测不同浓度壳聚糖对成纤维细胞活力的影响；运用羟脯氨酸、碱性磷酸酶(ALP)试剂盒分别检测细胞培养上清液的胶原含量与碱性磷酸酶的含量。结果：不同浓度壳聚糖组与阴性对照组相比,其发光信号值均无显著差异(P＞0．05)；0．1%和0．01%浓度壳聚糖组细胞培养上清液中的羟脯氨酸含量以及胶原含量与阴性对照组相比均有显著差异(P＜0．01),随壳聚糖浓度的上升,胶原含量下降,呈剂量依赖；与阴性对照组相比,各浓度壳聚糖组细胞培养上清液中ALP活性均无显著差异。结论：水溶性壳聚糖并不明显抑制3T_3TK成纤维细胞的活力,但能使其分泌胶原的量显著减少,提示壳聚糖具有作为肌腱修复的组织工程材料,并抑制肌腱修复中粘连形成的潜力。
- 车向新曹俊李卫东王亦东吴萍
- 关键词：水溶性壳聚糖成纤维细胞细胞活力胶原碱性磷酸酶
- 序贯法治疗绝经后骨质疏松症的对比性研究
- 2005年
- 目的探讨不同的序贯疗法治疗绝经后骨质疏松的效果。方法80例病人随机分成两组:ADFR方法组和DFR方法组;每6个月测量腰椎和股骨近端骨密度(BMD)、胸腰段X光片及实验室检查,结果作对比分析处理。结果两种方法均能使腰椎和股骨近端(股骨颈除外)的BMD增加,但并不能降低骨折发生率,两种方法的效果没有显著差异。结论ADFR疗法的A期用药并不能增加疗效,DFR疗法更适合晚期的骨质疏松患者、费用低、风险相对小。
- 李卫东吴萍颜瑞巧李光辉王亦东
- 关键词：序贯疗法绝经后骨质疏松
- 水溶性壳聚糖对体外培养成纤维细胞生长及表型的影响(英文)被引量：3
- 2007年
- 背景:研究表明壳聚糖可间接促进成纤维细胞的增生和胶原的合成。利用壳聚糖和特定的成纤维细胞一起构建肌腱损伤修复的组织工程材料,以期在促进损伤修复的同时防止粘连。目的:观察水溶性壳聚糖对3T3TK成纤维细胞生长及表型的影响。设计:观察对照实验。单位:九江学院医学院。材料:3T3TK成纤维细胞由中国科学院细胞库提供。水溶性壳聚糖(规格:60目、30CPS,济南海得贝海洋生物工程有限公司),DMEM(低糖)(美国GIBCO公司),胎牛血清(杭州四季青生物工程研究所),青霉素、链霉素(美国Biosharp公司),胰蛋白酶(北京博大泰克生物基因技术有限责任公司)。方法:实验于2004-11/2006-04在九江学院医学科研中心的系统生物学临床应用实验室(江西省高校重点实验室)完成。①常规培养3T3TK成纤维细胞至对数生长期,制成单细胞悬液,接种96孔板,共设5组,每组5孔,共25孔,每孔加细胞悬液200μL,培养24h后弃上清,前4组各孔分别加入含不同浓度壳聚糖的DMEM培养液200μL,壳聚糖终浓度分别为1,0.1,0.01,0.001g/L,第5组为阴性对照组,加不含壳聚糖的DMEM培养液,采用CellTilter-GloTM细胞活力测试盒检测不同浓度壳聚糖对成纤维细胞活力的影响。②常规培养细胞至对数生长期,制成单细胞悬液,接种24孔板,共设4组,前3组每孔分别加入含1,0.1,0.01g/L壳聚糖的DMEM培养液1mL,第4组为阴性对照组。采用羟脯氨酸、碱性磷酸酶试剂盒分别检测细胞培养上清液的胶原与碱性磷酸酶的含量。主要观察指标:①水溶性壳聚糖对体外培养成纤维细胞活力影响。②细胞培养上清液的胶原与碱性磷酸酶的含量。结果:①细胞活力检测结果:不同浓度壳聚糖组与阴性对照组相比,细胞活力差异均无统计学意义(P>0.05)。②细胞培养上清液的胶原与碱性磷酸酶的含量:1g/L和0.1g/L浓度壳聚糖组细胞培养上清液中的羟脯氨酸含量分
- 车向新曹俊李卫东王亦东吴萍
- 关键词：水溶性壳聚糖成纤维细胞细胞活力胶原碱性磷酸酶
- 成簇式三棱针髓内固定少儿股骨干骨折的可行性研究被引量：1
- 2005年
- 目的该文从临床病例及模拟手术实验的结果出发,探讨成簇式三棱针髓内固定CAFSF的合理性和可行性。方法对73例(76肢)CAFSF进行长期跟踪研究结合模手术实验的结果进行综合评价。结果成簇式三棱针髓内固定不会直接损伤LGP和TGP,不会对9岁以上男童、7岁以上女童的股骨近端生长发育产生永久影响。结论成簇三棱针髓内固定CAFSF是一种合理可行的简便方法。
- 李卫东夏仁云王亦东
- 关键词：髓内固定少年儿童股骨干骨折可行性
