焦宏远
- 作品数：6 被引量：84H指数：2
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 庚型肝炎病毒的分子生物学研究
- 2000年
- 目的 了解庚型肝炎病毒的国内外研究历史及在分子生物学特征和实验室诊断方面的最新研究进展；方法 以庚型肝炎病毒 (GB virus C/hepatitis G virus)作为检索词，通过微机，在中国生物医学文献光盘数据库和 MEDLINE光盘数据库中检索 95年以后庚型肝炎病毒研究方面的有关文献，并查阅原文，认真综合分析；结果 庚型肝炎病毒是 1995年发现的一种新病毒，因其可能与人类肝炎相关，而引起生物医学界的广泛关注。目前，国内外已克隆并测定了不同庚型肝炎病毒株的全基因组序列，陆续开展了其分子生物学特征和实验室诊断方面的研究，并初步建立了检测 HGV感染的 RT-PCR法及酶联免疫法；结论 庚型肝炎病毒的有些基因结构与功能，基因变异与分型还不能完全定论， RT-PCR检测方法和酶联免疫法的灵敏度或特异度还相对较低，尚需进一步研究完善。
- 梁志明杜亚静焦宏远
- 关键词：分子生物学
- 人白细胞介素12在哺乳动物细胞中的稳定表达及其生物活性的研究被引量：2
- 2007年
- 目的采用遗传基因工程方法获得具有生物活性的人白细胞介素12，探索其治疗肿瘤和慢性肝炎的可行性。方法采用已克隆的国人IL-12基因序列，利用内部核糖体切人位点（IRES）完成IL-12P35、P40双亚基共表达载体的构建，通过转染CHODHFR缺陷细胞，双抗夹心ELISA法筛选阳性克隆，MTX加压扩增，PCR检测其基因整合，T淋巴细胞增殖和诱生γ干扰素实验检测其生物活性。结果获得了稳定高效表达人IL-12的工程细胞系，表达产物为70×10^3左右的糖蛋白。结论本研究得到的基因重组人IL-12具有良好的生物活性，有强的诱导产生γ干扰素的能力和诱导活化T淋巴细胞增殖能力。
- 焦宏远詹美云郭敏卓伊瑶丛郁田瑞光张文英毕胜利
- 关键词：白细胞介素12细胞系哺乳动物重组蛋白质类
- 庚型肝炎病毒NS5区优势抗原表位的表达及其抗原性的初步评价被引量：1
- 2002年
- 目的 表达庚型肝炎病毒 (HGV)基因组NS5区部分基因重组抗原 ,分析其抗原性。方法 分别亚克隆了HGVNS5a、NS5b以及NS5b与C区嵌和的基因至pThioC表达载体上 ,构建成 3个重组表达质粒 ,分别转化大肠埃希菌JM1 0 9(DE3) ,用IPTG诱导表达重组蛋白。表达产物经纯化后采用Westernblot和间接ELISA方法分析 3个重组蛋白的抗原性。结果 经酶切和序列分析鉴定正确 ,3种表达蛋白均高效表达且相对分子质量与预期大小相符。Westernblot分析和间接ELISA试验表明 ,3种表达蛋白均能与抗 HGV阳性血清发生特异性反应。将应用重组蛋白检测的抗 HGV抗体与混合重组抗原 (包括C区合成肽、NS5a合成肽、NS3区基因重组抗原 )的检测结果进行了比较 ,在混合重组抗原阳性的 2 2份血清中 ,P5a检出率为 68% (1 5 2 2 ) ,P5b检出率为 91 % (2 0 2 2 ) ,Pc 5b检出率为 73 % (1 6 2 2 )。在 70份阴性标本中 ,3种抗原的检出率分别为P5a:7% (5 70 ) ;P5b :1 % (1 70 ) ;Pc 5b :6 % (4 70 )。3个重组抗原单独检出阳性的标本 ,其中有一部分经RT PCR检测亦为阳性。结论 原核表达的NS5区蛋白所检测的抗 HGV抗体不能完全被其他区段的抗原所覆盖 ,是免疫诊断HGV感染所必需的抗原表位之一。
- 丛郁焦宏远张文英田瑞光詹美云
- 关键词：庚型肝炎病毒抗原
- 一个新的白血病相关基因LRP16全长cDNA的克隆、序列分析及表达特征被引量：78
- 2001年
- 克隆一个与白血病复发相关基因 (LRP1 6)的全长 c DNA序列 ,对其进行染色体定位、组织表达谱分析 ,并对该基因编码蛋白质进行原核表达 .首先用获得的一段 3kb DNA片段在 NCBI提供的 h ESTs数据库中进行电子杂交并对重叠克隆片段组装 ,再设计引物进行 c DNA末端快速扩增(RACE技术 ) .采用 Northern印迹方法进行组织表达分析 .以高通量基因组序列 (HTGS)数据库为基础进行染色体定位 .对构建的克隆菌用 IPTG诱导重组蛋白表达后进行 SDS- PAGE,同时对重组体测序确证 .钓取了该基因全长 c DNA、推导所编码的氨基酸序列 ,并将该基因定位于染色体1 1 q1 2 .2 .原核表达筛选获得了该基因重组子的一个缺失体 .对 LRP1 6基因全长 c DNA的序列分析提示 ,该基因可能编码两种 N端不同的蛋白质 ,且该基因的转录本可能存在一种丰度较低的剪接体 .
- 韩为东于力楼方定王全顺赵瑜史子江焦宏远周建军
- 关键词：白血病相关基因LRP16CDNA克隆
- 中国人白细胞介素-12cDNA基因的克隆及序列分析与比较被引量：3
- 2000年
- 为研究中国人IL 12的基因特征 ,采用逆转录巢式聚合酶链反应 (RT nPCR)从中国人脐带血单核细胞中分别克隆了P35、P40两亚基cDNA基因 ,包括完整的前体蛋白编码序列 ,其中P35cDNA编码 2 19个氨基酸的多肽 ,P40cDNA编码 32 8个氨基酸的多肽 ,与国外序列 (NKSF、CLMF)比较结果发现 :所克隆序列P35同NKSF相比 ,第44aa密码子由GTC(Val)→GTG(Val) ,但未改变氨基酸组成 ;同CLMF相比 ,2 44aaGAC(Asp)→GAT(Asp) ,2 47aa由ACG(Thr)→ATG(Met) ;P40亚基与CLMF的核苷酸、氨基酸组成完全相同 ,但与NKSF相比存在多处差异 ,2 39aaAAC(Asn)→AAG(Lys) ,2 91aaACC(Thr)→ACG(Thr) ;3株序列的变异全部集中在相同的几个碱基位置。说明IL 12cDNA基因尽管非常保守 ,但在核苷酸及氨基酸也存在一定的差异 ,其基因可能存在多态性 ,所克隆的IL 12基因具有一定的独特性。
- 焦宏远詹美云
- 关键词：白细胞介素12CDNA克隆中国人
- 具有生物活性的重组中国人白细胞介素－12及其制备方法
- 本发明涉及一种具有生物活性的重组中国人白细胞介素－12及其制备方法,其特征在于该蛋白基因表达所采用IL－12P35和P40两个亚基cDNA基因是从中国人外周血细胞克隆的,所克隆两个亚基基因采用内部核糖体切入位点(IRES...
- 焦宏远詹美云
- 文献传递
