潘纪安
- 作品数：7 被引量：13H指数：2
- 供职机构：武汉大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- SARS冠状病毒编码的蛋白相互作用的研究
- 严重的急性呼吸道疾病综合症(SARS)是一类高传染性、高致病性的恶性疾病。二零零二年末该疾病爆发于我国的广东地区并迅速在世界范围内得到蔓延, 对人类社会、经济造成了巨大的冲击。虽然在二零零三年该疾病得到了有效的控
- 潘纪安鲁小路高雅静郭德银
- 文献传递
- 小干扰RNA对人淀粉样前体蛋白基因的沉默作用
- 2005年
- 目的观察小干扰RNA(siRNA)对人淀粉样前体蛋白(APP)基因的沉默作用。方法将设计好的一对寡核苷酸在细胞内源性地转录成小发夹RNA(shRNA),同时构建了携带2个APP亚型的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的GFPAPP重组质粒;利用EGFP作为报告基因,在COS7细胞内通过共转染siRNA表达质粒和GFPAPP重组质粒来观察沉默效应。结果针对APP的siRNA可有效地下调APP基因。结论针对APP的siRNA将不仅在研究APP基因功能和深入研究阿尔茨海默病(AD)的病理分子机制上,而且在运用siRNA这种新型的反义核酸药物治疗AD方面扮演重要角色。
- 邱昕潘纪安陈宇张苏明
- 关键词：淀粉样前体蛋白增强型绿色荧光蛋白小干扰RNA
- RNA干扰对阿尔茨海默病家族性瑞典型APP突变的沉默作用邱
- 2005年
- 目的诱导小干涉RNA (small interference RNA, siRNA )对阿尔茨海默病淀粉样前体蛋白家族性瑞典型突变(APPswe)的沉默作用。方法设计一对针对APPswe的寡核苷酸,构建成内源性表达相应siRNA的质粒,与构建的APP-EGFP重组质粒瞬时共转染COS-7细胞,利用GFP报告基因来间接观察siRNA对APPswe的沉默作用。结果siRNA可有效地下调突变型APP,相比APPwt而言,针对突变型APP的siRNA对APPswe的沉默作用更强。结论针对APPswe的siRNA可有效地沉默APPswe基因,并有一定的等位基因特异性。因此,针对APPswe的siRNA将在阿尔茨海默病治疗研究领域扮演重要角色。
- 邱昕潘纪安陈宇张玮莹杨华静张苏明
- 关键词：RNA干扰阿尔茨海默病家族性沉默作用SIRNAAD
- 人淀粉样前体蛋白基因与绿色荧光蛋白融合基因筛选系统的建立
- 2005年
- 目的构建携带人淀粉样前体蛋白(APP)的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)载体,以利于初步筛选对APPmRNA水平作用的药物。方法将pEGFP质粒和携带野生型APP695亚型的pXCJL经HindⅢ酶切,连接,PCR初筛,酶切鉴定,进一步经测序证实。携带野生型人类APP751亚型cDNA的pCDNA3.1质粒用XbaⅠ酶切,Klenow酶填平,再用HindⅢ酶切,回收APP751片段;质粒EGFP用SmaⅠ和HindⅢ酶切,将目的基因APP751片段与EGFP载体片段连接生成重组质粒,酶切鉴定,测序证实。构建好的重组质粒转染COS-7细胞,观察EGFP的表达情况。结果APP695和APP751重组质粒上的EGFP在COS-7细胞内得以表达。结论构建的APP-EGFP融合基因重组质粒,有助于方便、快速地初筛出作用于APP mRNA水平的药物。
- 邱昕潘纪安陈宇张苏明郭德银
- 关键词：淀粉样前体蛋白增强型绿色荧光蛋白ALZHEIMER病
- 冠状RNA病毒基因组复制和转录的分子机制
- RNA 病毒的基因组复制变异率高,变异速度快,因此易于产生逃逸突变株或导致跨物种传播,形成新发(emerging)病毒,例如近几年爆发的 SARS 冠状病毒和高致病性禽流感病毒(H5N1)。因此,研究 RNA 病毒的基因...
- 郭德根潘纪安刘青珍陈平陈宇杨雅玲江淼柯敏田波
- 文献传递
- 小干扰RNA对人淀粉样前体蛋白基因的沉默作用(英文)被引量：8
- 2005年
- 目的观察小干扰RNA(siRNA)对人淀粉样前体蛋白(APP)基因的沉默作用。方法该研究将设计好的一对寡核甘酸在细胞内源性地转录成小发夹RNA(shRNA),同时构建了携带两个APP亚型的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的GFP-APP重组质粒。利用EGFP作为报告基因,在COS-7细胞内通过共转染siRNA表达质粒和GFP-APP的重组质粒来观察沉默效应。结果针对APP的siRNA可有效地下调APP基因。结论针对APP的siRNA将不仅在研究APP基因功能和深入研究阿尔茨海默病(AD)的病理分子机制上,而且在运用siRNA这种新型的反义核酸药物治疗AD方面扮演重要角色。
- 邱昕潘纪安陈宇张苏明郭德银
- 关键词：淀粉样前体蛋白增强型绿色荧光蛋白小干扰RNA
- 细胞内表达的小干扰RNA靶向丙肝病毒5′保守区的研究被引量：5
- 2003年
- 将丙型肝炎病毒(HCV)基因组的5′非编码区(5′UTR)插入到报告基因绿色荧光蛋白(eGFP)和荧光素酶(luciferase)的上游,并构建基于Ⅲ型启动子的表达载体,这种载体能产生针对HCV 5′UTR的小干扰RNA。然后将含有HCV 5′UTR的eGFP/luciferase和能产生小干扰RNA的质粒共转染入Hela细胞,通过测定细胞发出的荧光和化学发光强弱来观测抑制效果。实验结果表明,与HCV 5′UTR特异性小干扰RNA表达质粒共转染的细胞无论从定性还是从定量上所测得的荧光和化学发光强度都明显低于阴性对照,且细胞密度经核染色与对照组无明显区别。这揭示了小干扰RNA确实能引起HCV特异基因如5′UTR的沉默,且转染进去的小干扰RNA表达质粒对细胞没有毒害作用。这一工作是通过载体直接在细胞内表达小干扰RNA(siRNA)而不是化学合成的,可以使小干扰RNA在细胞内得到稳定表达,因此本研究设计的siRNA表达载体不仅可以有效沉默HCV 5′UTR,而且该系统可以灵敏地筛选更有效的针对HCV的siRNA,因而这一结果为研究利用RNA干扰进行基因治疗HCV感染做了初步探索。
- 吴叔文方骢潘纪安田波郭德银
- 关键词：细胞内表达靶向丙肝病毒小干扰RNARNA干扰
