温建勋
- 作品数:6 被引量:6H指数:2
- 供职机构:内蒙古大学生命科学学院哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室更多>>
- 发文基金:内蒙古自治区自然科学基金国家高技术研究发展计划国家基础科学人才培养基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 牛和小鼠胎儿成纤维细胞混合制成的饲养层对牛胚胎干细胞的体外培养被引量:1
- 2012年
- 【目的】建立适合的牛胚胎干细胞培养环境,保持其未分化状态,保证细胞的全能性。【方法】分别培养小鼠胎儿成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast,MEF)和牛胎儿成纤维细胞(bovine embryonic fibroblast,BEF),用丝裂霉素C处理两种成纤维细胞分别计数后按1﹕0、1﹕1、2﹕1、1﹕2和0﹕1的比例制成混合饲养层,观察牛胚胎干细胞的生长状态,并对生长在混合饲养层上的牛胚胎干细胞进行碱性磷酸酶,OCT4和SSEA-1免疫组化检测,OCT4、SOX2、NANOG mRNA表达RT-PCR检测、体外分化形成拟胚体等试验。【结果】①生长在混合饲养层上的牛胚胎干细胞比单独生长在小鼠或牛胎儿成纤维细胞饲养层的结构致密、与滋养层界限明显;②小鼠胎儿成纤维细胞和牛胎儿成纤维细胞在1﹕1比例混合下牛胚胎干细胞克隆结构致密、显著堆积且边缘轮廓清晰优于其它比例组合;③获得的牛胚胎干细胞AKP染色及OCT4、SSEA-1抗原表达均成阳性,分别在体外分化培养形成了拟胚体。【结论】小鼠和牛胎儿成纤维细胞在以1﹕1的比例混合下制成的饲养层可更好地支持牛胚胎干细胞的体外培养,获得的克隆形态最好。
- 丛姗王瑞温建勋郝斐李硕梁浩刘东军
- 关键词:胚胎干细胞成纤维细胞
- 以体细胞核移植技术制备IGF1转基因白绒山羊的研究
- 究拟利用毛囊特异表达IGF1(Insulin like growth factor I)的真核表达载体pCDsR-KI转染绒山羊胎儿成纤维细胞(Caprine Fetal Fibroblast Cells, CFFCs)...
- 郭旭东朱兵仓明刘东军袁建龙王玮金永任宇温建勋肖红梁伟吴海青
- 关键词:体细胞核移植白绒山羊
- 不同代次大鼠骨髓间充质干细胞和脂肪间充质干细胞成骨分化比较被引量:2
- 2011年
- 本研究旨在观察不同代次骨髓间充质干细胞(BMSCs)和脂肪间充质干细胞(ADSCs)体外培养的生长特点和体外诱导成骨能力。通过密度梯度离心和贴壁培养法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞和脂肪间充质干细胞,用含地塞米松、抗坏血酸、β-甘油磷酸钠的培养液定向诱导传代细胞向成骨细胞分化,并利用茜素红染色、碱性磷酸酶染色及PCR方法检测成骨细胞。结果表明骨髓及脂肪间充质干细胞呈成纤维细胞样生长,增殖能力强,生长迅速。第5、10、15、20代BMSCs及ADSCs经诱导培养后茜素红染色呈阳性并且出现"矿化"、碱性磷酸酶活性强,随着细胞代次的递增,诱导后细胞碱性磷酸酶活性呈递减趋势;诱导后的两类细胞传代后细胞仍能继续分化,并形成正常的"矿化"结节,且碱性磷酸酶染色均弱于初次诱导。结果提示,BMSCs及ADSCs易于分离培养及体外扩增,诱导条件下成骨能力强且成骨细胞传代培养仍具有成骨能力,适合作为再生医学骨组织工程的种子细胞。
- 任宇马玉珍王清莲刘东军仓明温建勋靳木子
- 关键词:骨髓间充质干细胞脂肪间充质干细胞体外培养成骨诱导细胞鉴定
- 牛早期胚胎发育过程中差异表达基因及其作用的研究
- 为了研究早期牛胚胎体母性基因调控期、合子基因调控期基因表达变化的模式,研究牛早期胚胎发育中关键基因的作用,本研究使用单个胚胎mRNA差异法,筛选牛体外受精8细胞期和囊胚期胚胎中表达不同的基因。构建筛选出基因的过表达及干扰...
- 温建勋
- 关键词:发育过程差异表达基因转基因细胞