- 2008年度某医院成人下呼吸道感染药敏结果及分析被引量：6
- 2009年
- 目的通过对本院呼吸科、老年科送检的成人下呼吸道感染患者痰样本进行总结、分析，评估本院下呼吸道感染患者感染的病原体分布及对抗菌药物的耐药情况，为临床治疗选择抗菌药物提供参考意见。方法收集本院2008年1月-2008年12月呼吸科、老年科成人下呼吸道感染住院病人痰样本，进行常规细菌及真菌培养，分离菌株采用法国生物梅里埃公司生产的VrrEK～32全自动微生物鉴定仪，进行细菌鉴定及药敏试验。结果共送检痰样本1100例，培养分离出病原菌224株，其中G^＋56株（25．0％），G^-136株（60．7％），真菌32株（14．3％）。G^＋菌对青霉素类，第一代、第二代头孢菌普遍耐药（〉60％），对肛内酰胺类加抑酶复合制剂的耐药率较低（〈40％），对氟喹诺酮类、多西环素的耐药率中等（〈50％），对替考拉宁、万古霉素的耐药率为0；G^-菌对第一代、第二代头孢菌素普遍耐药（980％），对第三代、第四代头孢菌素的耐药率亦较高（〉60％），对氟喹诺酮类、氨基苷类（半合成类）、多西环素、β-内酰胺类加抑酶复合制剂的耐药率中等（〈60％），对碳青酶烯类、多黏菌素的耐药率为0。结论本院下呼吸道感染病原菌主要为条件致病菌，以G^-菌为主，真菌感染率较高，细菌耐药率普遍较高，临床医师应重视病原学检查和药敏监测，以便更合理选择和使用抗菌药物。
- 吴合林汪文玉
- 关键词：下呼吸道感染病原菌耐药性
- 钩端螺旋体lipL21基因真核表达质粒的构建及其在HeLa细胞中的表达被引量：2
- 2006年
- 目的构建钩端螺旋体外膜脂蛋白LipL21基因片段的真核表达重组质粒,利用脂质体体外转染HeLa细胞,探讨其在体外真核细胞中的表达情况,为寻找新的预防钩端螺旋体病的候选疫苗分子提供实验依据。方法应用PCR技术从钩端螺旋体黄疸出血群赖型56601株基因组模板中扩增lipL21基因,纯化回收后克隆入pUCM-T载体,再亚克隆入真核表达载体pcD-NA3.1(+),运用脂质体2000将重组体pcDNA3.1(+)-lipL21转染入HeLa细胞,细胞免疫组化法观察目的基因的表达。结果双酶切及测序鉴定证明成功构建了lipL21真核表达重组体pcDNA3.1(+)-lipL21,DNA测序显示重组质粒含有561bp的目的基因片段,读码框架正确,无碱基错配及移码突变。重组质粒pcDNA3.1(+)-lipL21体外在HeLa细胞中能有效表达目的蛋白LipL21。结论成功构建了钩端螺旋体lipL21基因真核表达质粒pcDNA3.1(+)-lipL21,且能够在体外真核细胞中表达;为进一步筛选新的预防钩端螺旋体病的候选疫苗分子奠定了一定的实验基础。
- 汪文玉何汉江谭立志刘传爱占利生蒋显勇
- 关键词：钩端螺旋体DNA疫苗真核表达
- 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌临床感染现状及耐药性分析
- 2014年
- 目的了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌临床感染现状及其耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供科学依据。方法采用ATB Expression对225株金黄色葡萄球菌进行鉴定和药敏试验,数据统计使用WHONET5.6软件进行。结果共分离出225株金黄色葡萄球菌,3年分离率呈逐年上升趋势,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)88株,占39.1%,3年分离率呈逐年下降趋势,标本来源以脓分泌物为主,占40.9%,其次是痰液占26.1%;MRSA对万古霉素、替考拉宁、呋喃妥因无耐药,MRSA对红霉素、克林霉素、四环素、左氧氟沙星、庆大霉素、利福平、磺胺甲噁唑辕甲氧苄啶、夫西地酸的耐药率分别为87.8%、81.3%、70.6%、41.2%、36.4%、39.8%、29.5%、8.3%。结论MRSA分离率较高,耐药性较严重,应引起重视,临床应根据药敏试验结果合理选择抗菌药物。
- 汪文玉兰彩霞杨紧根
- 关键词：金黄色葡萄球菌耐药性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
- 钩端螺旋体LipL21基因真核表达载体pcDNA3.1(+)/LipL21的构建与鉴定
- 2006年
- 目的构建钩端螺旋体外膜脂蛋白LipL21基因片段的真核表达载体,寻找新的预防钩端螺旋体感染的候选疫苗。方法应用PCR技术从钩端螺旋体黄疸出血群赖型56601株基因组模板中扩增LipL21基因,纯化回收后克隆入pUCm-T载体,再亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)。结果双酶切及测序鉴定证明成功构建了LipL21真核表达载体pcDNA3.1(+)/LipL21,DNA测序显示重组质粒含有561 bp的目的基因片段,读码框架正确,无碱基错配及移码突变。测序后结果经与GenBank登录的序列做blast比较,载体上所连目的基因片段序列与GenBank登录的LipL21基因序列完全一致。结论成功构建了钩端螺旋体LipL21基因真核表达载体pcDNA3.1(+)/LipL21。
- 汪文玉何汉江谭立志刘传爱詹利生
- 关键词：DNA疫苗
- 人子宫肌瘤上皮细胞的分离培养及GnRH I在其中的表达与意义
- 2009年
- 目的分离培养人子宫内膜上皮细胞,初步探讨GnRH I在其中的表达与意义。方法分离正常人子宫内膜上皮细胞与子宫肌瘤患者子宫内膜上皮细胞并传代培养,采用角蛋白单克隆抗体进行鉴定后,免疫组化检测GnRH I蛋白的表达,流式细胞术检测GnRH I对子宫内膜上皮细胞凋亡的影响。结果分离的子宫内膜上皮细胞在体外能够生长良好并能稳定传代,GnRH I在正常子宫内膜上皮细胞不表达或弱表达,在子宫肌瘤患者子宫内膜上皮细胞中高表达或表达增强;流式细胞术检测提示在人子宫肌瘤上皮细胞发生的凋亡率高于正常子宫内膜上皮细胞,两者比较差异有统计学意义。结论体外分离培养子宫内膜上皮细胞成功;GnRH I在正常子宫上皮细胞与子宫肌瘤上皮中存在差异表达;GnRH I蛋白能够引起子宫肌瘤上皮细胞发生凋亡,可能通过信号传导通路参与了子宫肌瘤的发生与发展。
- 曾伟前汪文玉王燕
- 关键词：子宫内膜上皮细胞凋亡
- 钩端螺旋体外膜脂蛋白LipL21核酸疫苗的研制及对豚鼠的免疫保护作用
- 目的;构建钩端螺旋体外膜脂蛋白lipL21基因的真核表达载体pcDNA3.1（+）-lipL21，直接肌注免疫豚鼠，观察其在豚鼠体内所产生的体液免疫和细胞免疫应答水平，研究其对豚鼠的兔疫保护作用，为研制高效的钩端螺旋体新...
- 汪文玉
- 关键词：钩端螺旋体DNA疫苗免疫免疫保护
- 文献传递
- 问号状钩端螺旋体外膜蛋白Loa22的克隆、表达及对豚鼠的免疫保护作用研究被引量：4
- 2007年
- 目的构建问号状钩体强毒赖型56601株外膜蛋白Loa22的重组质粒,表达Loa22蛋白,研究该蛋白对豚鼠的保护作用。方法以问号状赖型钩体56601株基因组为模板扩增目的基因,将Loa22基因克隆至原核表达载体PQE-31,构建PQE31-Loa22重组体,将其转入大肠杆菌M15中诱导表达目的蛋白。于0、2、4周将蛋白及对照PBS分别经豚鼠腹股沟、腋下免疫豚鼠。每次剂量为蛋白50μg/只,末次免疫后2周,用培养3d的56601株钩体从腹腔攻击各免疫组豚鼠(1ml/只)。连续观察15d,观察各免疫组豚鼠发病情况,并取各免疫组豚鼠的肺、肝、肾做病理切片。分析蛋白Loa22对豚鼠的免疫保护作用。结果成功扩增出Loa22基因,构建原核重组质粒PQE31-Loa22。重组质粒能在大肠杆菌M15中高效表达Loa22蛋白。用Loa22蛋白主动免疫的豚鼠用56601株钩体攻击,结果显示无发病现象,而免疫对照组的豚鼠中出现了食欲不振、活动减少等现象,病理切片有明显改变。结论成功构建了Loa22重组原核表达质粒,表达纯化的蛋白可以使豚鼠抵抗同型钩体的攻击,免疫保护作用为82%。
- 张连英何汉江尹卫国汪文玉占利生谭立志
- 关键词：钩端螺旋体外膜蛋白免疫保护
- 221株产ESBLs大肠埃希菌的分布及耐药性分析
- 目的：调查本院2014 年1-9 月分离的大肠埃希菌临床分布及耐药现状，为我院感控科对耐药菌管理和临床抗感染治疗提供实验依据。方法：回顾性统计分析本院2014 年1-9 月临床各病区送检标本中分离的大肠埃希菌对临床常用抗...
- 汪文玉杨紧根赵晖刘伯萍贺雄飞
- 关键词：大肠埃希菌耐药性合理用药
- 头孢哌酮/舒巴坦对3种非发酵菌的体外抗菌作用
- 目的：了解头孢哌酮/舒巴坦对3种非发酵菌的体外抗菌作用，为临床治疗非发酵菌感染提供理论依据.方法：收集医院2012年1月1日-2012年6月30日临床标本中分离到非发酵菌207株，并检测其对头孢哌酮/舒巴坦和其它14种抗...
- 汪文玉兰彩霞杨紧根
- 关键词：非发酵菌感染药敏试验
- 文献传递
- 钩端螺旋体Lipl21基因真核质粒构建及在HeLa细胞的表达
- 2006年
- 目的构建钩端螺旋体外膜脂蛋白Lipl21基因片段的真核表达重组质粒,利用脂质体体外转染HeLa细胞,探讨其在体外真核细胞中的表达情况,为寻找新的预防钩端螺旋体病的候选疫苗分子提供实验依据。方法应用PCR技术从钩端螺旋体黄疸出血群赖型56601株基因组模板中扩增Lipl21基因,纯化回收后克隆入pUCM-T载体,再亚克隆入真核表达载体pcDNA3·1(+),运用脂质体2000将重组体pcDNA3·1(+)/LipL21转染入HeLa细胞,免疫组化法观察目的基因的表达。结果双酶切及测序鉴定证明成功构建LipL21真核表达重组体pcDNA3·1(+)/LipL21,DNA测序显示重组质粒含有561bp的目的基因片段,读码框架正确,无碱基错配及移码突变。重组质粒pcDNA3·1(+)/LipL21在体外HeLa细胞中能有效表达目的蛋白LipL21。结论成功构建了钩端螺旋体Lipl21基因真核表达质粒pcDNA3·1(+)/Lipl21,且能够在体外真核细胞中表达,为进一步筛选新的预防钩端螺旋体病的候选疫苗分子奠定了一定的实验基础。
- 何汉江汪文玉李丽华谭立志刘传爱占利生
- 关键词：钩端螺旋体DNA疫苗
