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MDA-MSP技术检测粪便miR34b/c甲基化及其在结直肠癌早期诊断中的意义被引量：1: 2013年; 目的:探讨粪便miR34b/c甲基化状态的检测在结直肠癌早期诊断中的意义.方法:从126例结直肠癌患者癌组织、癌旁组织、粪便和64例正常对照者的粪便中分别提取DNA,采用多重置换扩增(multiple displacement amplification,MDA)技术对经过亚硫酸氢盐修饰样本进行全基因组扩增,结合甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)检测组织和粪便中miR34b/c基因甲基化状态.结果:结直肠癌癌组织miR34b/c基因的甲基化阳性率为95.2%(120/126),对应的癌旁正常组织为11.9%(15/126),两者比较有显著差异(P<0.01);miR34b/c甲基化状态与各临床病理参数无显著相关(P>0.05).结直肠癌粪便miR34b/c甲基化阳性率为90.2%(111/123),显著高于正常对照7.8%(5/64),差异有统计学意义(P<0.01).粪便DNAmiR34b/c用于结直肠癌早期诊断的敏感性为91.2%,特异性为92.2%.结论:miR34b/c甲基化是结直肠癌的重要分子特征,检测粪便miR34b/c甲基化有望成为结直肠癌早期诊断的一个全新的肿瘤标志物.MDA结合MSP为miRNA的甲基化分析提供了一种较理想的研究手段.; 张丰云管静芝赵慧霞李秋文董伟伟段昕妤朱建华王如良郝怡鑫叶明肖文华; 关键词：甲基化特异性PCR 多重置换扩增粪便

组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275显著改变肝癌HepG2细胞中exosome的免疫相关分子种类和含量被引量：3: 2012年; 目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275修饰的肝癌细胞exosome所含肿瘤抗原和免疫分子的变化。方法采用蔗糖梯度离心联合超滤技术分离和纯化肝癌HepG2细胞在MS-275处理前后分泌的exosome，并用免疫电镜和Westemblot杂交技术分别观察exosome表达热休克蛋白70、人类白细胞抗原（HLA）-Ⅰ、HLA—Ⅱ、NY-ESO-1和CD80等免疫分子的变化。MS-275处理前后样本均数的比较用配对f检验。结果经MS-275处理后，肝癌HepG2细胞分泌exosome的数量和总蛋白含量均较处理前显著增加，分别为（303．0±3．2）×10^6个／ml比（236．0±2．8）×10^6个／ml和（1．37±0．18）mg比（0．78±0．11）mg，t值分别为27．29和4．85，P值均〈0．01。免疫电镜下，100个exosome所含免疫分子HSP70、HLA—I、HLA-DR和CD80胶体金颗粒数均明显增加，分别为（79．8±5．2）个比（60．2±3．2）个、（65．6±6．3）个比（38．4±2．7）个、（26．9±2．7）个比（3．0±0．16）个和（42．7±5．2）个比（28．9±1．9）个，t值分别为5．56、6．87、15．3和4．32，P值〈0．01或〈0．05；NY—ESO-1所含胶体金颗粒数无明显变化[（40．2±4．6）个比（32．2±4．5）个，t=2．15，P〉0．051。Westernblot结果也证实了上述免疫电镜的发现。结论MS-275修饰肝癌细胞能显著改变exosome各种免疫分子的含量和种类，有利于增强exosome的免疫刺激作用，为体外大规模制备抗肝癌亚细胞瘤苗提供了新思路。; 李秋文肖文华萨仁高娃董伟伟赵惠霞段昕妤朱建华康欢荣付艳郝怡鑫王如良宋林萍叶明; 关键词：肝细胞组蛋白去乙酰化酶抑制剂 EXOSOME

NDRG4基因甲基化检测在结直肠癌早期诊断中的应用研究被引量：5: 2012年; 目的探讨NDRG4甲基化检测在结直肠癌诊断中的价值。方法从84例结直肠癌手术切除癌组织、癌旁组织及其术前粪便、尿、血中提取DNA,应用巢式甲基化特异性PCR(nested methylation specific PCR,nMSP)检测结直肠癌粪便、尿、血中NDRG4基因甲基化水平。比较结直肠癌组织和粪便、尿、血中NDRG4甲基化检测在结直肠癌诊断中的敏感性和特异性。结果在84例结直肠癌中,癌组织NDRG4检出率为81.0%,癌旁组织检出率为8.3%,敏感性为81.0%,特异性为91.7%;结直肠癌中粪便NDRG4基因甲基化的敏感性和特异性在3个微量DNA中最高,尿次之。结论结直肠癌组织NDRG4基因甲基化异常发生率高;粪便和尿中NDRG4甲基化异常可作为结直肠癌早期诊断的肿瘤标志物。; 赵慧霞李秋文董伟伟段昕妤朱建华王如良郝怡鑫叶明肖文华; 关键词：结直肠癌

转录水平RNA干扰肝素酶基因对肝癌细胞侵袭能力的影响: 2014年; 目的探讨转录水平基因沉默(TGS)技术和转录后水平基因沉默(PTGS)技术对肝素酶(HPA)基因干扰效果及其对肝癌SMCC-7721细胞侵袭能力的影响。方法从HPA基因启动子区和编码区分别设计并合成TGS和PTGS的小干扰RNA(siRNA),并转染肝癌细胞SMMC-7721;实时半定量PCR和Western blotting检测TGS和PTGS siRNA转染后48、72和96h HPA的表达,并设空白组作为对照;Transwell小室实验检测干扰后SMMC-7721细胞的侵袭能力。结果 TGS和PTGS两种技术在转染48h后,从mRNA和蛋白水平上均能成功干扰HPA表达;转染后72h,PTGS组HPA恢复表达,而TGS组仍保持沉默;转染后96h,两组HPA均恢复表达。Transwell小室实验表明,TGS和PTGS组HPA基因均能使SMCC-7721的穿膜细胞数减少,TGS组效果更明显。结论 TGS技术沉默肝癌SMMC-7721细胞中HPA基因的能力优于PTGS技术,并使肝癌细胞的侵袭能力显著降低。; 张彩虹肖文华董伟伟赵惠霞段昕妤李秋文郝怡鑫王如良朱建华叶明; 关键词：肝素酶基因肝癌细胞

踝关节扭伤的中医康复治疗及心理干预的研究进展被引量：4: 2022年; 踝关节是人体的负重关节,由于其结构的多元性和复杂性,极易扭伤。急性踝关节扭伤失治、误治,迁延导致慢性踝关节扭伤。踝关节扭伤不仅常见于军事训练,也常见于人们的日常生活。国外一项关于踝关节扭伤的调查研究显示约有30%踝关节扭伤患者进展为慢性踝关节不稳,踝关节不稳定导致踝扭伤的反复发作,从而出现踝关节周围软组织肿胀、瘀血、疼痛伴活动受限[1]。; 韩文英王兰香张秀平殷晓伟张颖刘玚段昕妤; 关键词：踝关节扭伤康复治疗针灸心理干预

nMSP-DHPLC检测粪便SEPT9基因甲基化及其在结直肠癌诊断中的应用被引量：7: 2012年; 目的探讨粪便SEPT9(septin 9)基因甲基化检测在结直肠癌早期诊断中的应用价值。方法常规提取87例结直肠癌手术切除癌组织、癌旁正常结肠组织及其术前粪便DNA,应用巢式甲基化特异性PCR(nested methyl-ation specific PCR,nMSP)结合变性高效液相色谱(denatured high performance liquid chromatography,DHPLC)技术检测结直肠癌组织、癌旁组织及粪便SEPT9基因甲基化水平;比较结直肠癌组织和粪便中SEPT9甲基化检测在结直肠癌诊断中的敏感性和特异性。结果在87例结直肠癌中,癌组织SEPT9检出率为80.5%(70/87),癌旁组织检出率为8.0%(7/87),二者比较差异有统计学意义(P<0.01),特异性为91.9%;结直肠癌粪便SEPT9基因甲基化检测结果与组织检测结果基本一致。SEPT9基因甲基化与大于65岁老年患者和右半结肠癌显著相关。结论结直肠癌组织SEPT9基因甲基化异常发生率高,尤其是老年和右半结肠癌患者;粪便SEPT9基因甲基化异常可作为结直肠癌早期诊断的肿瘤标志物。; 赵慧霞李秋文董伟伟段昕妤朱建华王如良郝怡鑫叶明肖文华; 关键词：粪便

粪便SEPT9基因甲基化检测在结直肠癌早期诊断中的应用研究被引量：19: 2012年; 目的探讨粪便SEPT9(Septin9)基因甲基化检测在结直肠癌诊断中的价值。方法从126例结直肠癌手术切除癌组织、癌旁组织及其术前粪便中提取DNA,应用多重置换扩增(MDA)结合巢式甲基化特异性PCR(nMSP)检测结直肠癌粪便SEPT9基因甲基化水平;以手术后病理诊断为标准,比较结直肠癌组织和粪便中SEPT9甲基化检测在结直肠癌诊断中的敏感性和特异性。结果在126例结直肠癌中,癌组织SEPT9检出率为84.1%,癌旁组织检出率为7.9%,二者比较有统计学差异(P<0.01),特异性为92.1%;结直肠癌粪便SEPT9基因甲基化检测结果与组织检测结果一致;在各临床分期之间,SEPT9甲基化检出率无统计学差异(P>0.05)。结论结直肠癌组织SEPT9基因甲基化异常发生率高;粪便SEPT9甲基化异常可作为结直肠癌早期诊断的肿瘤标志物。; 赵慧霞李秋文董伟伟段昕妤朱建华王如良郝怡鑫叶明肖文华; 关键词：结直肠肿瘤

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段昕妤

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