楼江燕
- 作品数:45 被引量:243H指数:10
- 供职机构:四川大学华西第二医院更多>>
- 发文基金:四川省应用基础研究计划项目国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学更多>>
- RNA干扰技术逆转卵巢上皮性癌细胞多药耐药的研究被引量:13
- 2006年
- 目的探讨应用RNA干扰(RNAi)技术逆转卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞多药耐药的可行性。方法将设计合成的针对多药耐药基因MDR1的特异性小分子干扰RNA(siRNA),用脂质体转染具有MDR1基因高表达的卵巢癌紫杉醇耐药细胞株OVCAR8/TR。用荧光定量RT-PCR技术和流式细胞仪分别测定转染前后细胞MDR1mRNA及糖蛋白P-gp表达的变化;三磷酸腺苷(ATP)生物荧光法检测转染前后细胞对顺铂、氟尿嘧啶、阿霉素和紫杉醇药物敏感性(以ATP抑制率判断)的变化情况。结果转染后24、48、72、96和120h,OVCAR8/TR细胞MDR1mRNA的抑制率分别为26·42%、84·00%、78·43%、45·85%和0;转染后48h MDR1mRNA的抑制率达到最高峰。转染后24、48、72、96和120h,OVCAR8/TR细胞P-gp的抑制率分别为16·71%、49·64%、85·23%、65·98%和9·44%;转染后72h P-gp的抑制率达到最高。转染MDR1siRNA后,能够明显提高OVCAR8/TR细胞对紫杉醇和阿霉素的敏感性,在紫杉醇的作用下,转染前后OVCAR8/TR细胞的ATP抑制率分别为(25·8±3·1)%和(78·0±9·8)%,转染前后比较,差异有统计学意义(P<0·05)。结论在OVCAR8/TR细胞中,针对MDR1合成的siRNA能够有效地抑制MDR1mRNA和P-gp的表达,并能恢复其对紫杉醇和阿霉素的敏感性。应用RNAi技术,能够逆转卵巢癌细胞对化疗药物的多药耐药。
- 楼江燕彭芝兰郑莹王和何斌王红静
- 关键词:小分子干扰MDR细胞系
- ATM激酶对卵巢肿瘤发展过程影响的研究被引量:3
- 2011年
- 目的研究肿瘤的发展过程和DNA损伤应答之间的关系。方法选取临床卵巢标本39例,其中正常卵巢组织3例,交界性卵巢肿瘤6例,高分化卵巢肿瘤6例,中分化卵巢肿瘤7例和低分化卵巢肿瘤17例,分别对其进行组织分离细胞培养以及冷冻切片,采用免疫荧光和Western免疫印迹等技术检测ATM通路相关蛋白表达。结果在卵巢肿瘤的发展过程中,ATM通路的蛋白激酶在损伤时被激活,其激活的程度随着肿瘤由良性至恶性的转变而逐渐增加,即内源性损伤相应增多。在体外培养的卵巢癌细胞株OVCAR-8/TR和SKOV3中加入ATM抑制剂和造成DNA损伤的拓扑异构酶Ⅰ抑制剂——喜树碱(CPT)。其中使用ATM抑制剂的细胞凋亡率增高,ATM通路的下游激酶γ-H2AX免疫荧光染色减弱;而CPT处理的细胞凋亡率也增高,但-γH2AX免疫荧光染色增强。结论在卵巢肿瘤由良性到恶性的转变过程中,ATM通路起到了阻碍肿瘤的发展和增加基因组稳定性的作用。
- 杨月明张明楼江燕张舒郭莲娣马宏伟
- 关键词:DNA损伤卵巢肿瘤
- 三磷酸腺苷生物发光法在卵巢癌体外化疗药物敏感试验中的应用被引量:10
- 2000年
- 为探讨新鲜卵巢癌标本化疗药物敏感试验结果与临床疗效的相关性 ,采用三磷酸腺苷生物发光法(ATP- CVA) ,用液闪计数仪对 2 5份新鲜卵巢癌组织标本进行药敏检测。结果显示 :在 ATP浓度为 10 - 9~ 10 - 5mol/ m l时 ,ATP标准品与发光计数值呈一线性关系 ,Y=1.48X+ 15 .0 3,相关系数为 0 .996 3;所检测的 2 5份标本中成功 2 2份 ,试验的可评价率为 88% ,其敏感性为 85 .7% (12 / 14) ,特异性为 83.3% (5 / 6 ) ,阳性预测值为 92 .3%(12 / 13) ,阴性预测值为 71.4% (5 / 7) ,总的预测准确率为 85 % (17/ 2 0 )。上述结果表明 ,本药敏试验结果的预测准确性较高 ,与临床疗效之间具有很好的相关性 ,值得进行更深入的研究。
- 楼江燕彭芝兰刘珊玲王和
- 关键词:卵巢癌药敏试验三磷酸腺苷生物发光法
- 阴道癌新辅助化疗后全阴道切除及阴股部皮瓣阴道成形术1例报告被引量:2
- 2009年
- 吕琳彭芝兰刘辉楼江燕秦瑀
- 关键词:阴道癌新辅助化疗阴道成形术
- 卵巢癌化疗药敏试验ATP生物荧光法的建立及临床应用研究
- 彭芝兰刘珊玲楼江燕王和王红静王平张崇淑
- 技术原理及性能指标:ATP是细胞的基本能量来源,检测ATP的量可反映出细胞的数量及流行性。本试验方法基于这一原理,用生物荧光法进行检测,根据ATP下降程度评价癌细胞对药的敏感性或耐药性。该方法敏感、预测准确性高。经临床上...
- 关键词:
- 关键词:ATP生物荧光法卵巢癌化疗用药
- DNA损伤修复因子WDR70的生物学功能及其在人卵巢癌中的突变研究被引量:2
- 2016年
- 目的在细胞水平上分析新发现的DNA损伤修复因子WDR70的生物学功能,确定WDR70基因在人卵巢癌中的突变发生情况,以验证该基因的功能丢失是否与卵巢癌关联。方法在人细胞中用siRNA干扰WDR70基因表达,或用慢病毒和质粒过表达WDR70的野生型和突变体,通过免疫印迹和免疫荧光等方法研究该基因在DNA损伤后的亚细胞定位和DNA损伤信号通路中的作用;此外,抽提1例正常卵巢组织和16例卵巢癌标本的mRNA进行半定量RT-PCR扩增,对这些标本中的WDR70基因进行测序分析。结果 WDR70基因沉默和过表达其突变体导致同源重组功能蛋白——DNA复制蛋白A(RPA32)磷酸化修饰水平降低和重组酶——重组蛋白A(RAD51)向DNA损伤位点招募的能力减低;WDR70的功能障碍还导致染色体的断裂增多;同时,卵巢癌样本中发现多例WDR70突变型别。结论在体外系统中,WDR70参与DNA损伤修复过程,沉默或过表达其突变体将导致同源重组修复缺陷和染色体结构的不稳定;在卵巢癌基因组中,WDR70基因频繁出现突变,可能导致相应的DNA修复缺陷和基因组不稳定性的发生。因此,WDR70是一个潜在的卵巢癌抗癌基因。
- 郭莲娣王丹杨帆梁语珈杨雪琴覃意扬任来峰曾鸣唐子执王小军王思刘聪楼江燕陈杰
- 关键词:卵巢癌
- 联载多西紫杉醇和反义寡聚脱氧核糖核苷酸脂质体的制备工艺
- 2011年
- 目的研究联载多西紫杉醇(Doc)、反义寡聚脱氧核糖核苷酸(ODN)脂质体的制备工艺。方法采用乙醇注入法制备脂质体,以包封率和粒径为主要评价指标来考察脂质体的制备工艺,采用中心组合实验进一步优化处方;用激光粒度仪测量脂质体的粒径;采用HPLC法测定脂质体中Doc的包封率,将ODN用FITC标记,用荧光分光光度计测量荧光强度以测量ODN的包封率。结果最佳处方为磷脂-总胆固醇(3∶1),DOC药脂比为1∶50,胆固醇(Chol)-阳离子胆固醇(DC-Chol)为2.4∶1,Chol-PEG2000含量8%,Doc包封率为50%~60%,ODN包封率为60%~70%。结论用乙醇注入法成功地制备了双载药脂质体。
- 朱锋傅灵袁雯旻何勤楼江燕
- 关键词:多西紫杉醇包封率
- 宫颈癌及癌前病变HPV-16存在状态检测的研究被引量:12
- 2006年
- 目的:为建立理想的HPV存在状态检测方法,了解宫颈癌及癌前病变HPV-16DNA的整合状况,初步探讨HPV-16DNA整合在宫颈癌发生发展中的作用及HPV-16整合状态检测可能具有的临床应用价值。方法:采用多重实时PCR同管定量检测HPV-16E2和E6基因,根据E2/E6比值来判定HPV-16DNA的存在状态;并对HPV-16阳性的51例宫颈鳞癌和49例宫颈上皮内瘤样病变石蜡标本进行检测。结果:1)HPV-16E2、E6标准曲线相关系数均为1.00,扩增效率均在95%以上。2)确定0.81作为多重实时PCR区分游离型和混合型HPV-16的界值。3)CINⅠ中HPV-16大多以游离方式存在,但仍有整合的发生(42.9%);CINⅡ和CINⅢ中HPV-16以混合型为主;浸润癌中以整合型HPV-16为主。4)HPV-16整合发生率与不同程度的宫颈病变有关,并且随着宫颈病变级别的升高HPV-16整合发生率呈上升趋势。5)Ⅱ+Ⅲ期宫颈癌中整合型HPV-16所占比例显著高于Ⅰ期宫颈癌。结论:1)多重实时定量PCR是一种敏感性高、简便快速的HPV-16病毒存在状态的检测方法。2)HPV-16整合是宫颈癌变的早期事件,与宫颈癌前病变的进展有关。3)宫颈癌中整合型HPV-16的发生可能具有预后价值。
- 郑莹彭芝兰楼江燕王和
- 关键词:人乳头瘤病毒16宫颈癌
- 卵巢癌化疗药敏试验ATP生物荧光法的建立及临床应用
- 彭芝兰刘珊玲楼江燕王和王红静王平张崇淑张家文钱晓蕾杨小芸唐茜萍何斌
- 该课题用生物荧光法进行检测,根据ATP下降程度评价癌细胞对芗的敏感性或耐药性。该方法敏感、预测准确性高。经临床上对71例病人进行试验及随访,可评价率94.4%,敏感性90%,特异性88.9%,阳性预测值95.7%,阴性预...
- 关键词:
- 关键词:药敏试验ATP生物荧光法卵巢癌
- 细胞凋亡检测用于卵巢癌实体瘤体外化疗药物敏感试验被引量:3
- 2000年
- 目的 评价细胞凋亡检测用于实体瘤体外化疗药物敏感试验的可行性。方法 对Ⅲc期原发性上皮性卵巢癌实体瘤细胞行体外分离培养 ,使用 6种不同的抗肿瘤药物对其进行处理 ,经 5天培养后 ,制成细胞涂片 ,末端标记法观察不同药物作用后细胞凋亡情况。结果 发现源于不同病例的卵巢癌实体瘤细胞对不同抗癌药物的敏感性存在差异 ,同一种抗癌药物对不同病人卵巢癌实体瘤细胞产生的凋亡程度不同。结论 细胞凋亡检测用于肿瘤的药物敏感试验具有能直接了解药物诱导肿瘤凋亡情况 ,快速、操作相对简单和不需要特殊设备等优点。
- 王和楼江燕刘珊玲彭芝兰
- 关键词:药物疗法药敏试验细胞凋亡