栗炳南
- 作品数：16 被引量：6H指数：1
- 供职机构：新乡医学院更多>>
- 发文基金：河南省教育厅科学技术研究重点项目河南省科技攻关计划河南省省院科技合作项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程文化科学更多>>
- 医学遗传学教学过程中的一点感悟被引量：1
- 2013年
- 巧用启发式教学,激发学生学习兴趣;在教学中注重学生思维能力的培养;注重多媒体教学与传统教学的结合;注重将遗传学的基础理论与疾病案例相联系;以教学带科研,科研促教学,试图在医学生的"医学遗传学"教学中逐步实现素质教育,培养学生的自主学习能力,提高学生的整体素质,促进本学科教学的改革。
- 栗炳南
- 关键词：医学遗传学教学方法思维能力
- IL-2和MART-1双基因共表达重组载体及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种IL-2和MART-1双基因共表达重组载体，其沿载体转录方向依次连接有IL-2基因、IRES序列和MART-1基因，或者沿载体转录方向依次连接有MART-1基因、IRES序列和IL-2基因；所述IL-2基...
- 栗炳南丰慧根左百乐林俊堂曹毓林
- 文献传递
- pIRES2-NGF-NT-3真核表达载体的构建与鉴定被引量：2
- 2014年
- 构建双基因共表达载体pIRES2-NGF-NT-3并检测其在HEK293细胞中的表达。人神经生长因子(nerve growth factor,NGF)和神经营养素3(neurotrophin-3,NT-3)是采用直接PCR的方法从人外周血单个核细胞的基因组DNA中获取,将人神经生长因子的cDNA片段插入到pIRES2-EGFP多克隆位点构建成为pIRES2-NGF-EGFP。神经营养素3 cDNA片段通过替换绿色荧光蛋白基因(EGFP)的方式插入到pIRES2-NGFEGFP中构建成为pIRES2-NGF-NT-3双基因共表达载体,将pIRES2-NGF-NT-3用脂质体转染HEK293细胞并采用RT-PCR与Western-blot的方法检测其表达。人神经生长因子和神经营养素3被克隆,通过测序和酶切鉴定的得知与基因库报道序列一致。pIRES2-NGF-NT-3转染HEK293细胞后双基因在mRNA和蛋白水平均得到了表达。人神经生长因子和神经营养素3双基因真核表达载体成功构建,它提供了一个新的表达系统,为进一步研究双基因的功能奠定了基础。
- 栗炳南李卫东林俊堂丰慧根原志庆
- 关键词：人神经生长因子神经营养素3内部核糖体进入位点
- AFP和GM-CSF双基因共表达重组载体及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种AFP和GM-CSF双基因共表达重组载体，其沿载体转录方向依次连接有AFP基因、IRES序列和GM-CSF基因，或者沿载体转录方向依次连接有GM-CSF基因、IRES序列和AFP基因；所述AFP基因的核苷...
- 栗炳南丰慧根左百乐林俊堂曹毓林
- 文献传递
- MUC1和IL-2双基因共表达重组载体及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种MUC1和IL-2双基因共表达重组载体，其沿载体转录方向依次连接有MUC1基因、IRES序列和IL-2基因，或者沿载体转录方向依次连接有IL-2基因、IRES序列和MUC1基因；所述MUC1基因的核苷酸序...
- 栗炳南丰慧根左百乐林俊堂曹毓林
- 文献传递
- MUC1和IL-2双基因共表达重组载体及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种MUC1和IL-2双基因共表达重组载体，其沿载体转录方向依次连接有MUC1基因、IRES序列和IL-2基因，或者沿载体转录方向依次连接有IL-2基因、IRES序列和MUC1基因；所述MUC1基因的核苷酸序...
- 栗炳南丰慧根左百乐林俊堂曹毓林
- 文献传递
- 人胶质细胞源性神经营养因子和血管内皮生长因子165双基因真核表达载体的构建与鉴定（英文）
- 2014年
- 背景:人胶质细胞源性神经营养因子(glialcell line-derived neurotrophic factor,GDNF)和血管内皮生长因子165(vascular endothelial growth factor 165,VEGF165)在细胞分化过程中有重要作用。目的:构建双基因共表达载体pIRES2-GDNF-VEGF165并对其进行鉴定。方法:采用PCR法从人外周血单个核细胞的基因组DNA中获取人胶质细胞源性神经营养因子基因,然后将人胶质细胞源性神经营养因子的cDNA片段插入到pIRES2-EGFP多克隆位点构建成为pIRES2-GDNF-EGFP。人血管内皮生长因子165 cDNA片段是通过双PCR的方法从pIRES2-VEGF165-EGFP质粒中获取,接着将血管内皮生长因子165 cDNA片段以替换EGFP的方式插入pIRES2-BDNF-EGFP中,最后构建成为含有内部核糖体进入位点(IRES)的pIRES2-GDNF-VEGF165双基因共表达载体。通过双酶切和DNA测序方法对其鉴定,将重组的双基因共表达载体感染HEK293细胞,利用RT-PCR与Western-blot方法检测双基因的表达。结果与结论:DNA测序显示,提取的人胶质细胞源性神经营养因子和血管内皮生长因子165均与基因库报道序列一致,相对分子质量分别为636 bp和576 bp。构建的pIRES2-GDNF-VEGF165双基因共表达载体经Bgl II/Bam HI切出GDNF条带,经Bam HI/Not I双酶切后切出IRES-VEGF165片段,经Bgl II/Not I双酶切后切出GDNF-IRES-VEGF165片段。RT-PCR与Western-blot方法检测显示,此载体转染后,HEK293细胞均能表达人胶质细胞源性神经营养因子和血管内皮生长因子165 mRNA和蛋白。说明实验成功构建了能表达人胶质细胞源性神经营养因子和血管内皮生长因子165的双基因真核表达载体。
- 栗炳南李卫东林俊堂丰慧根
- 关键词：胶质细胞源性神经营养因子血管内皮生长因子载体蛋白质类血管内皮生长因子165内部核糖体进入位点
- 氯化1-辛基-3-甲基咪唑对EMT6细胞的毒性及其DNA损伤作用被引量：1
- 2014年
- 研究了氯化1-辛基-3-甲基咪唑([C8mim][Cl])对EMT6细胞的毒性大小及其可能的遗传机制.不同浓度(0.06、0.25、1.00mmol·L-1)的[C8mim][Cl]对EMT6细胞染毒12h,WST-1比色法检测了细胞活力,ELISA方法检测了Bcl-2蛋白的表达,Hoechst 33342染色检测了细胞核形态的变化,单细胞凝胶电泳(SCGE)检测了细胞DNA的损伤,流式细胞仪检测了细胞周期和细胞DNA的含量.结果显示,经[C8mim][Cl]染毒后,EMT6细胞活力下降,并且呈剂量依赖关系.当[C8mim][Cl]浓度高于0.25mmol·L-1时,与对照相比,差异显著.[C8mim][Cl]染毒使Bcl-2蛋白表达下调,引起了细胞核形态改变,造成了DNA的断裂损伤和含量下降,诱导了细胞凋亡.从而可以得出结论,DNA损伤参与了[C8mim][Cl]诱导的细胞凋亡.
- 井长勤刘振华王燕李小英齐博刘中何于毅栗炳南丰慧根
- 关键词：细胞毒性DNA损伤
- 用于治疗脊髓损伤的重组基因、重组载体和重组细胞
- 本发明公开了一种用于治疗脊髓损伤的重组基因，由LIF基因、IRES序列与NT-3基因沿转录方向依次连接而成，或者由NT-3基因、IRES序列与LIF基因沿转录方向依次连接而成。本发明还公开了所述重组基因与基因载体构建而成...
- 栗炳南李卫东丰慧根林俊堂王燕
- 文献传递
- pIRES_2-BDNF-VEGF_(165)真核表达载体的构建与鉴定（英文）
- 2013年
- 背景:人脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)和血管内皮生长因子165(vascular endothelial growth factor165,VEGF165)在细胞分化过程中有重要作用。病毒载体临床应用存在安全隐患,利用真核表达载体表达蛋白为解决安全性问题提供了一种方法。目的:构建双基因共表达载体pIRES2-BDNF-VEGF165并对其进行鉴定。方法:采用PCR的方法从人外周血单个核细胞的基因组DNA中获取人脑源性神经营养因子基因,然后将人脑源性神经营养因子的cDNA片段插入到pIRES2-EGFP多克隆位点构建为pIRES2-BDNF-EGFP。人血管内皮生长因子165 cDNA片段是通过双PCR的方法从pIRES2-VEGF165-EGFP质粒中获取,接着将血管内皮生长因子165 cDNA片段以替换EGFP的方式插入pIRES2-BDNF-EGFP中,最后构建成为含有即内部核糖体进入位点的pIRES2-BDNF-VEGF165双基因共表达载体。通过双酶切和DNA测序方法对其鉴定,将重组的双基因共表达载体感染HEK293细胞,利用RT-PCR与Western-blot方法检测双基因的表达。结果与结论:DNA测序显示,提取的人脑源性神经营养因子和血管内皮生长因子165均与基因库报道序列一致,片段长度分别为744 bp和576 bp。构建的pIRES2-BDNF-VEGF165双基因共表达载体经Eco RⅠ/Bam HⅠ切出BDNF条带,经BDNF/NotⅠ双酶切后可见IRESVEGF165基因片段,经Eco RⅠ/NotⅠ双酶切后可见BDNF-IRES-VEGF165基因片段。RT-PCR与Western-blot方法检测显示,此载体转染后,HEK293细胞均能表达人脑源性神经营养因子和血管内皮生长因子165 mRNA和蛋白。结果证实,实验成功构建了人脑源性神经营养因子和血管内皮生长因子165双基因真核表达载体。
- 栗炳南李卫东林俊堂丰慧根
- 关键词：血管内皮生长因子165内部核糖体进入位点
