林海龙 作品数:43 被引量:115 H指数:7 供职机构: 哈尔滨工业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 环境科学与工程 化学工程 生物学 轻工技术与工程 更多>>
土壤重金属污染的微生物修复机理研究进展 被引量:15 2014年 综述了土壤重金属污染的特征与危害,微生物修复的应用机理,并在此基础上对土壤重金属污染防治存在的问题和发展趋势进行探讨. 吴敏 王锐 关旸 林海龙关键词:土壤 微生物修复 重金属污染 阴沟肠杆菌的Hy3AL和hycA部分基因克隆及序列分析 2011年 为了克隆氢化酶3大亚基(HyA3L)和甲酸氢酶抑制因子(hycA),研究其在阴沟肠杆菌产氢代谢中的作用和机制,笔者利用CODEHOP设计阴沟肠杆菌NRRL B-414的HyA3L和hycA简并引物,选用引物HyA3J和HycAJ扩增基因组DNA,分别得到约1500、150bp的PCR产物,该产物连接pMD 18-T载体,并克隆转化至E.coli DH5α感受态细胞中,经筛选后测序。推导的HyA3J扩增产物氨基酸序列与Enterobacter cancerogenus ATCC 35316的HyA3L蛋白一致性最高达到99%,仅有3个氨基酸的差异,表明其为阴沟肠杆菌的HyA3L;推导的HycAJ扩增产物氨基酸序列与Enterobacter cloacae subsp.cloacae ATCC 13047的HycA蛋白一致性最高达到92%,仅有4个氨基酸的差异,表明其为阴沟肠杆菌的hycA。通过以上分析可得出,采用CODEHOP程序设计的简并引物可信性强,阳性率高。阴沟肠杆菌NRRL B-414的氢化酶3大亚基和甲酸氢酶抑制因子部分基因的成功克隆,为获得氢化酶3大亚基和甲酸氢酶抑制因子的基因全长克隆奠定基础,不但可以增加这2个基因的资源,也可为其基因敲除等代谢工程研究提供科学依据和工作基础。 林海龙 李伟光 任南琪关键词:CODEHOP 菌B49乙醛乙醇脱氢酶基因克隆中的引物设计 被引量:1 2008年 为研究乙醛乙醇脱氢酶基因及其在乙醇发酵生物制氢中的重要作用,采用clustalw对12个菌种的乙醛乙醇脱氢酶蛋白质序列进行多重比对分析,共得到6个保守区,以这6个保守区设计引物,共选用9对简并引物,命名为ADHJ1、ADHJ2、ADHJ3、ADHJ4、ADHJ5、ADHJ6、ADHJ7、ADHJ8、ADHJ9.用这9对引物对B49总DNA进行简并PCR,共有两对引物的扩增得到预期的结果.其PCR产物经pMD18-T克隆转化至大肠杆菌DH5α中,经筛选后测序.结果表明,这两段DNA推导的氨基酸序列与Bacillus cereus的乙醛乙醇脱氢酶基因的相似性最高为69%,证实所克隆的序列为乙醛乙醇脱氢酶基因DNA片段.尽管采用clustalw软件设计ADHJ5简并引物的简并度分别达1048576倍和98304倍,引物长度分别为30 bp和26 bp,但扩增结果特异性强.说明采用clustalw软件设计的简并引物可信度高,同时,也说明简并度不是合理评判简并引物质量的标准. 林海龙 任南琪 郑国香 张坤 段志洁蛋白质体外定向进化策略研究进展 被引量:4 2012年 定向进化已广泛应用于蛋白质的分子改造,是改善蛋白质特性的最有效策略之一。为了获得更高的突变效率,构建含有更多突变体的文库,不断地发明创新各种高效的蛋白质体外定向进化方法。对近年来出现的几种定向进化方法三核苷酸突变(TriNex)、序列饱和突变(SeSaM)、随机链交换突变法(RAISE)、重叠延伸蛋白域文库法(PDLGO)和迭代饱和突变法(ISM)的原理、特点及应用进行综述。 付畅 林海龙 李海莹 王得江关键词:定向进化 一种L-乳酸脱氢酶基因及其编码的氨基酸序列和制备过程中设计的引物 一种L-乳酸脱氢酶基因及其编码的氨基酸序列和制备过程中设计的引物,它涉及一种脱氢酶基因及其编码的氨基酸序列和制备过程中设计的引物。因为高效产氢细菌B49代谢途径中乳酸脱氢酶的基因研究对工业提高高效产氢细菌B49的产乳酸量... 林海龙 任南琪 邢德峰文献传递 6-氨基青霉烷酸降解细菌及其筛选方法 本发明涉及6-氨基青霉烷酸降解细菌及其筛选方法。具体而言,本发明涉及一株6-氨基青霉烷酸降解细菌Bordetella sp.L2,其于2012年10月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏,保藏编号为... 林海龙 陈先明 关旸 陈兆波 王晓雨 王锐 范阳文献传递 一种L-乳酸脱氢酶基因及其编码的氨基酸序列 一种L—乳酸脱氢酶基因及其编码的氨基酸序列和制备过程中设计的引物,它涉及一种脱氢酶基因及其编码的氨基酸序列和制备过程中设计的引物。因为高效产氢细菌B49代谢途径中乳酸脱氢酶的基因研究对工业提高高效产氢细菌B49的产乳酸量... 林海龙 任南琪 邢德峰文献传递 6-氨基青霉烷酸降解细菌及其筛选方法 本发明涉及6-氨基青霉烷酸降解细菌及其筛选方法。具体而言,本发明涉及一株6-氨基青霉烷酸降解细菌Bordetella sp.L2,其于2012年10月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏,保藏编号为... 林海龙 陈先明 关旸 陈兆波 王晓雨 王锐 范阳景天根际铅抗性菌株普罗维登斯菌,筛选方法及其应用 本发明涉及景天根际铅抗性菌株普罗维登斯菌(Providencia sp.)BPb7。具体而言,本发明涉及一株从景天根际分离的铅抗性菌株Providencia sp.BPb7,其于2014年12月1日保藏于中国微生物菌种保... 林海龙 范阳 冯晶石 田宇哲 李德斌文献传递 厌氧发酵产氢细菌的厌氧操作与紫外线诱变技术 被引量:6 2007年 结合几种厌氧操作,即Hungate滚管分离法、厌氧培养瓶分离法、平板夹层厌氧法和培养皿平板分离法,对乙醇型产氢发酵细菌进行紫外诱变及突变体分离筛选,比较证明在提供厌氧操作条件下(厌氧操作箱),直接涂布平板分离法是培养、分离、筛选严格厌氧产氢突变菌株的最佳方法,通过对分离培养基成分的调整及观测菌落的生长突变及分离效果,确定紫外分离厌氧产氢突变菌株的分离培养基。同时确定乙醇型发酵产氢细菌紫外辐射的最适照射时间控制在3 m in之内,突变菌株遗传稳定性的传代次数至少控制在6次。紫外诱变获得的高效稳定产氢突变体的产氢能力比对照菌株提高40%—65%。 郑国香 任南琪 林海龙 李永峰 李建政关键词:紫外诱变