杨祥开
- 作品数：7 被引量：12H指数：2
- 供职机构：广西科学院更多>>
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- 相关领域：生物学化学工程农业科学轻工技术与工程更多>>
- 大黄欧文氏菌蔗糖异构酶基因克隆表达及其酶学特性研究被引量：1
- 2011年
- 通过PCR克隆得到了不包括信号肽序列的109～1803bp大黄欧文氏菌蔗糖异构酶基因,以pQE30为表达载体可以在大肠杆菌中高效表达SI基因,但容易形成包涵体。通过降低诱导剂IPTG至10μmol/L,28℃低温诱导表达可以改进表达产物的可溶性。重组SI的最适pH为6.0,最适反应温度为30℃。测定的Km为46.8mmol/L,Vmax为152.2U/mg。重组SI对麦芽糖、海藻糖、棉子糖、三氯蔗糖及α-甲基葡萄糖苷等均不起作用,只利用蔗糖为底物转糖苷,也可以水解对硝基苯酚-α-葡萄糖苷。同时发现重组SI具有转化异麦芽酮糖生成海藻酮糖的活性。
- 周兴韦星明杨祥开郑元涛许黎明黄日波
- 关键词：酶学特性异麦芽酮糖
- 大黄欧文氏菌蔗糖异构酶控制产物特异性基序的定点突变被引量：2
- 2011年
- 大黄欧文氏菌(Erwinia rhapontici)蔗糖异构酶催化蔗糖异构为异麦芽酮糖和海藻酮糖,具有一个可能控制产物特异性的325RLDRD329基序。本研究以定点突变方法对该基序的带电荷氨基酸进行突变,共构建R325D、R328A、R328D、R328Q和D329N5个突变体。通过对突变体的酶学特性及突变体转化蔗糖的产物组成分析,结果显示所构建突变体的Km值上升约2～5倍,比活力下降至野生型SI比活力的11.8%～25.3%。HPLC分析显示Arg325和Arg328分别突变为Asp,导致产物中异麦芽酮糖/海藻酮糖的比例从6.93分别降至0.96和2.92,并伴随一个未知寡糖出现。Arg328突变为Ala和Gln同样导致反应产物中海藻酮糖比例上升,异麦芽酮糖比例下降。但是突变体D329N反应产物比例没有变化。以上结果表明325RLDRD329基序对大黄欧文氏菌蔗糖异构酶的酶活具有重要作用,并对酶的产物特异性产生影响。本研究结果将为该酶的作用机理研究奠定基础。
- 周兴韦星明杨祥开郑元涛庞浩许黎明黄日波
- 关键词：定点突变
- 大豆β-淀粉酶基因在毕赤酵母中的高密度发酵表达被引量：3
- 2017年
- 大豆β-淀粉酶在麦芽糖浆生产上具有应用优势。该研究应用毕赤酵母表达系统异源表达大豆β-淀粉酶,并对重组酶的酶学性质进行了分析,结果显示,其酶学性质没有改变。为了增强重组β-淀粉酶的表达,采用甲醇/山梨醇混合碳源诱导的毕赤酵母表达策略,10 L发酵罐发酵表达的重组β-淀粉酶酶活力为310 U/mL,比单一甲醇诱导提高了36%。研究结果表明,发酵条件优化对提高异源β-淀粉酶在毕赤酵母中的表达有重要参考价值。
- 许黎明成春燕韦星明莫祺晖卢汉浪杨祥开
- 关键词：Β-淀粉酶毕赤酵母异源表达酶学性质山梨醇
- 一种功能性食品甜味剂及其制备方法
- 本发明公开了一种功能性食品甜味剂，其组成为：1,1-GPS2.1～6.0wt%；1,6-GPS43.9～47.1wt%；1,1-GPM49.8～50.8wt%。其制备方法，包括如下步骤：（1）蔗糖水溶液用蔗糖异构酶处理，...
- 杨祥开周兴欧娜
- 文献传递
- 鼠李糖乳杆菌L-乳酸脱氢酶基因在乳酸代谢途径中的表达和调控的鉴定
- 许黎明韦星明吕军杨祥开莫祺晖
- 课题来源与背景：L-乳酸是重要的化工原料，用途非常广泛，由L-乳酸合成的高分子材料聚乳酸（PLA）不仅能缓解全球能源紧张的问题，还能控制“白色污染”，保护环境，因而乳酸的生产和应用是全球关注的焦点，特别是高光学纯度、高产...
- 关键词：
- 关键词：L-乳酸发酵菌种高分子材料
- 红汁乳菇的组织分离及鉴定被引量：5
- 2015年
- 以广西恭城、兴安两地采到的红汁乳菇子实体进行组织分离,成功得到23个菌株。结果显示从菌盖、菌柄、菌盖和菌柄交界处采样培养均能分离到菌株。选择其中菌丝形态特征典型而且长势较好的编号为GG4-2和GX3-2的菌株经ITS序列同源性比对确认为红菇科乳菇属红汁乳菇。红汁乳菇是一种外生菌根菌,目前还不能进行人工栽培,从子实体分离菌株进行生理和营养方面的研究,对未来实施人工栽培有重要指导意义。
- 杨祥开成春燕黄雪星欧娜许黎明周兴
- 关键词：红汁乳菇外生菌根ITS序列
- 酶法生产α-熊果苷的纯化工艺被引量：1
- 2017年
- 采用乙醇发酵去除酶法合成α-熊果苷反应液中大部分糖类杂质,以活性炭纤维吸附分离α-熊果苷,选择甲醇-乙酸乙酯混合溶剂重结晶精制。结果表明,50%乙醇溶液洗脱部分α-熊果苷含量最高,此部分经甲醇-乙酸乙酯混合溶剂反复重结晶精制,可制备得到α-熊果苷无色针状结晶,HPLC检测纯度达到99%以上,收率达到80%。该工艺简单可行,稳定性高、重复性好,适合大规模制备高纯度α-熊果苷。
- 杨祥开成春燕欧娜周志鹏韦星明许黎明周兴
- 关键词：活性炭HPLC重结晶
