杨柏云
- 作品数:3 被引量:5H指数:1
- 供职机构:北京林业大学生物科学与技术学院更多>>
- 发文基金:中央高校基本科研业务费专项资金公益性行业科研专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学环境科学与工程轻工技术与工程更多>>
- 基于LAMP的人轮状病毒检测方法及其在水环境中的应用被引量:4
- 2013年
- 环介导的恒温扩增(LAMP)是新兴的一种快速DNA扩增技术,具有特异性强、敏感性高、反应迅速、设备简单等特点,在人类病毒性疾病的诊断领域有广泛的应用。为快速、高效地检测人轮状病毒,根据其特异性的VP7基因,设计了一套特异性引物对该基因进行LAMP,同时优化其反应条件。结果表明,LAMP最佳反应条件为:镁离子终浓度3 mmol/L,甜菜碱终浓度1 mol/L的25μL体系,65℃反应90min。扩增终产物酶切分析得到的条带大小与预期结果(280bp、193bp和78 bp)相吻合,以人轮状病毒、星状病毒及诺如病毒为模板进行特异性测试没有发生交叉反应。将人轮状病毒质粒等倍稀释后分别用LAMP及PCR检测其灵敏度,分别达到5.08 copies/μL和5.08×102copies/μL。用优化的LAMP分别检测北京地区12个生活饮用水及12个再生水水样,其人轮状病毒检出率分别为16.7%(2/12)和25%(3/12)。研究表明,LAMP是一种程序简单、灵敏度和特异性较高的检测手段,在人轮状病毒的快速检测方面具有一定的开发潜力。
- 杨柏云韦玉梅杨丽宋涵杨海霞何晓青
- 关键词:微生物学人轮状病毒LAMP饮用水再生水
- 基于esp基因和JCV标记的MST方法在五大流域典型水源地中的应用被引量:1
- 2015年
- 非点源污染目前已经成为影响水体环境的重要污染。微生物源示踪技术(microbial source tracking,MST)是解决非点源污染的一项新技术,它可以确定污染的宿主来源。肠球菌esp基因和多瘤病毒JCV可以作为检测水体中人源粪便污染的分子标记,其灵敏度和特异性都很高。为分析五大流域水源地是否受到人源粪便的污染,对辽河、海河、淮河、长江和黄河五大流域典型水源地水样进行采集和检测,选取人源粪便特异病原微生物肠球菌的esp基因和多瘤病毒JCV建立了相应的MST分子检测方法。结果表明,五大流域的典型水源地采样点均有可能受到了人源粪便的污染,可为当地相关部门提供技术支持和数据参考。
- 王敬琦孔维文刘婷婷陈南杨柏云何晓青
- 关键词:水源地MST
- 微生物源示踪技术(MST)识别水体中人源粪便的污染
- 非点源污染目前已成为影响水体环境质量的重要污染。为了解决这个问题,科学家提出了微生物源示踪技术(Microbial Source Tracking,MST)。传统的粪便污染监测法仅能用标记细菌的数目说明水体受粪便污染的程...
- 杨柏云
- 关键词:MST肠球菌多瘤病毒