杨学东
- 作品数：49 被引量：275H指数：9
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金陕西省科学技术研究发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠心肌成纤维细胞组织金属蛋白酶抑制剂mRNA水平检测(英文)被引量：8
- 2003年
- 目的通过建立多重反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,旨在测定大鼠心肌成纤维细胞组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、组织金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)的mRNA水平。方法采用胶原酶-胰蛋白酶消化法培养成年雌性SD大鼠的心肌成纤维细胞,提取细胞总RNA并进行反转录反应。自行设计大鼠TIMP-1,TIMP-2和内参照GAPDH的PCR引物序列,进行多重PCR反应,PCR产物经20g/L琼脂糖凝胶电泳分析目的基因片段。结果20g/L琼脂糖凝胶电泳在同一条泳道显示TIMP-1,TIMP-2和GAPDH3条目的DNA条带,表明成功地同时扩增了TIMP-1,TIMP-2和GAPDH基因。结论采用多重RT-PCR方法,测定了大鼠心肌成纤维细胞TIMP-1,TIMP-2mRNA水平,此方法为研究高血压病心肌纤维化提供了可靠手段。
- 杨学东赵连友王士雯李立文田建伟苏明权
- 关键词：心肌成纤维细胞反转录聚合酶链反应组织金属蛋白酶抑制剂-1组织金属蛋白酶抑制剂-2
- 辛伐他汀对血管升压素诱导大鼠心脏成纤维细胞增殖的影响被引量：3
- 2001年
- 目的 探讨辛伐他汀 (Simvastatin ,Sim)对血管升压素 (AVP)诱导的新生SD大鼠心脏成纤维细胞 (CFs)增殖的影响 ,为防治高血压心肌纤维化提供理论依据。方法 采用胰酶消化、差速贴壁法培养新生SD大鼠CFs,以3H 胸腺嘧啶核苷 (3H TdR)掺入法测定DNA合成、四氮唑盐 (MTT)比色法测定细胞数目 ,分别观察不同浓度Sim对AVP诱导CFs增殖的作用及甲羟戊酸 (Meval onate,MVA)干预的影响。结果 ①CFs(2 0 0个细胞 )的3H TdR掺入率随着Sim干预浓度的增加而降低 ,其中 1 0 - 6mol/LSim和 1 0 - 5mol/LSim组的3H TdR掺入率分别为 (1 1 75± 2 0 2 6 6 )、(771± 1 6 4 86 )cpm ,明显低于对照组 (1 95 5± 3 72 45 )cpm(P <0 0 1 ) ;②MTT比色法A490 值随Sim浓度的增加而降低 ,其中 1 0 - 6、1 0 - 5mol/LSim组的A490 值分别为 0 2 1 5± 0 0 4 1和 0 1 6 3± 0 0 1 8,均较对照组A490值 0 3 93± 0 0 4 8显著降低 (P <0 0 1 ) ;③ 1 0 - 5mol/LSim +1 0 - 3mol/LMVA组的3H TdR掺入率、MTT比色法A490 值分别为 (1 995±3 5 3 83 )cpm和 0 41 8± 0 0 4 5 ,均显著高于 1 0 - 5mol/LSim组 (P <0 0 1 )。结论 辛伐他汀可抑制AVP诱导的CFsDNA的合成和细胞数目增加 ,提示Sim可抑制CFs增殖 ,其机制可能通过甲?
- 徐琳赵连友范延红田建伟杨学东张海涛陈永清彭育红
- 关键词：辛伐他汀甲羟戊酸血管升压素心脏成纤维细胞
- β_1整合素反义寡核苷酸抑制精氨酸加压素诱导下心脏成纤维细胞DNA合成的作用
- 2010年
- 目的:探讨β1整合素反义寡核苷酸(ASODN)对精氨酸加压素(AVP)诱导大鼠心脏成纤维细胞(CFs)DNA合成功能的抑制作用。方法:以胰蛋白酶消化法分离、培养SD大鼠的CFs,采用MTT吸光度法及3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法,原位酶联免疫吸附测定(ELISA)等技术,观察基础状态下β1整合素ASODN对CFs细胞数目及DNA合成功能的影响;β1整合素ASODN对AVP诱导的β1整合素表达,CFs增殖及DNA合成功能的影响;基础状态下设空白对照组、反义链组和正义链组;AVP诱导下设空白对照组、1×10-7mol/L AVP组、反义链+1×10-7mol/L AVP组和正义链+1×10-7mol/L AVP组,每组均为8个复孔。结果:①反义链组的CFs细胞数目及3H-TdR掺入率明显低于空白对照组及正义链组,并且均有统计学意义(P<0.01);正义链组与对照组比较无统计学意义。②1×10-7mol/LAVP组和正义链+1×10-7mol/LAVP组的β1整合素表达水平,CFs细胞数目均高于空白对照组(P<0.05),β1整合素ASODN与AVP共同作用组的β1整合素表达水平,CFs细胞数目明显低于1×10-7mol/LAVP组和正义链+1×10-7mol/L AVP组,并且均有非常显著性意义(P<0.01)。③1×10-7mol/L AVP组和正义链+1×10-7mol/L AVP组的CFs3H-TdR掺入率均高于空白对照组(P<0.05),β1整合素ASODN与AVP共同作用组的CFs3H-TdR掺入率明显低于空白对照组、1×10-7mol/L AVP组和正义链+1×10-7mol/L AVP组,并且均有非常显著性意义(P<0.01)。结论:β1整合素ASODN不但抑制基础状态下CFs生长及DNA合成代谢,而且抑制AVP刺激β1整合素表达、CFs增殖、DNA合成的作用,说明针对特异性靶基因片段合成的ASODN可能抑制β1整合素遗传信息传递的某个环节,干扰细胞内外信息的传递,影响β1整合素介导的CFs与细胞外基质的黏附,从而产生拮抗AVP刺激心脏间质重构形成的作用。进一步提示应用反义药物防治高血压心脏间质重构的可能性。
- 彭育红赵连友汝磊生杨学东陈永清范延红
- 关键词：心肌成纤维细胞反义寡核苷酸类
- 冠状动脉光学相干断层成像观察的重度钙化病变形态特点对支架膨胀不良的影响被引量：5
- 2018年
- 目的探讨冠状动脉光学相干断层成像(OCT)观察的重度钙化病变预处理后斑块形态学特点,对支架膨胀不良的影响。方法 2016年12月至2017年12月在中国人民解放军总医院心内科行冠状动脉旋磨术联合切割球囊成形术的重度钙化病变患者9例。对9个相关缺血病变均于旋磨联合切割预处理和支架置入后行OCT检查,记录最小管腔面积、钙化弧度、钙化长度、钙化厚度、钙化组织表面组织厚度、钙化环断裂、钙化小结、支架置入后支架面积、支架膨胀率、贴壁情况以及组织脱垂情况。2 mm为一病变节段,共收集148个病变节段,其中105个钙化节段。分析影响支架膨胀不良,贴壁不良的因素以及钙化环断裂的相关因素。结果多因素Logistic回归分析显示,最小管腔面积是支架膨胀不良的主要危险因素(OR 1.870,95%CI 1.021～3.425),而钙化环断裂是支架膨胀不良的保护因素(OR 0.160,95%CI 0.050～0.516)。钙化弧度是影响支架贴壁不良的主要预测因素(OR 1.006,95%CI1.001～1.011)。钙化表面组织厚度(OR0.000, 95%CI0.000～0.001)以及钙化弧度(OR 1.008, 95%CI1.002～1.015)是钙化环断裂的主要预测因素。在105例钙化节段中,按钙化表面组织厚度分组,厚度≤0.1mm钙化节段组47个和厚度> 0.1mm钙化节段组58个。厚度≤0.1mm钙化节段组中,钙化断裂的比例(76.6%)明显高于厚度> 0.1 mm钙化节段组(10.3%),差异有统计学意义(P <0.001)。结论重度钙化病变预处理后,钙化环断裂以及管腔面积的增加,可能有助于支架良好膨胀。有较大钙化弧度、表面组织薄的钙化环,经过旋磨联合切割预处理,易于出现钙化环的断裂。
- 汤喆白静白静薛令合杨学东王蔚然聂绍平
- 关键词：光学相干断层成像冠状动脉旋磨术切割球囊成形术
- 核因子κB在精氨酸血管升压素诱导大鼠心肌成纤维细胞一氧化氮合成中的作用被引量：15
- 2003年
- 本文探讨了精氨酸血管升压素(AVP)刺激下体外培养的大鼠心肌成纤维细胞(CFs)内一氧化氮(NO)含量、一氧化氮合酶(NOS)活性、诱导型一氧化氮合酶基因表达的变化及其与核因子κB(NF-κB)的关系。用胰酶消化法分离培养Sprague Dawley仔鼠的CFs,分别采用硝酸还原酶法、分光光度法、逆转录一聚合酶链式反应(RTPCR)、免疫荧光-共聚焦显微镜和蛋白质印迹检测AVP干预下CFs的NO含量、NOS活性、iNOS mRNA表达和NFKB的活化。结果显示,AVP浓度依赖性(0.001—0.1μmol/L)地增加CFs的NO含量,提高NOS活性,增加iNOSmRNA表达;AVP能够活化NF-κB,使其由细胞浆转位于细胞核;NF-κB特异性抑制剂吡咯啉烷二甲基硫脲(PDTC)能够抑制AVP诱导的CFs NO含量增加、NOS活性提高和iNOS mRNA表达增加。上述结果提示,AVP干预下CFsiNOS mRNA表达增加、NOS活性增高、NO合成增多可能通过NF-κB激活途径,NF-κB激活参与心肌纤维化的发生和发展。
- 范延红赵连友郑强荪薛玉生杨学东田建伟徐琳
- 关键词：精氨酸升压素一氧化氮心肌成纤维细胞核因子ΚB
- 精氨酸升压素对心肌成纤维细胞核转录因子κB活性的影响被引量：2
- 2003年
- 目的 探讨精氨酸升压素 (AVP)对心肌成纤维细胞 (CFs)核转录因子 (NF κB)活性的影响。方法 胰酶消化法分离、培养新生SD大鼠CFs,分别采用免疫荧光 -共聚焦显微镜法和蛋白质印迹技术检测基础状态下和AVP干预下CFs中NF κB的细胞内定位和CFs核中NF κB的蛋白含量。结果 基础状态下CFs的NF κB主要分布于细胞浆 ,细胞核中无NF κB蛋白表达 ,AVP干预后CFs的NF κB主要分布于细胞核 ,细胞浆中NF κB显著减少。结论 AVP能够激活CFs的NF κB ,使其从细胞浆转位至细胞核 ,提示AVP对CFs的调节作用可能是通过NF κB激活通路发挥的。
- 范延红赵连友贾国良田建伟杨学东徐琳
- 关键词：精氨酸升压素心肌成纤维细胞核因子КB
- 细胞色素P450 2C19基因对急性冠状动脉综合征患者介入术后抗血小板治疗的预后影响被引量：1
- 2020年
- 目的根据细胞色素P450(CYP)2C19基因分型对急性冠状动脉综合征患者(acute coronary syndrome,ACS)PCI术后个体化抗血小板治疗及常规治疗的临床预后影响。方法选择2018年4月~2019年6月解放军总医院第一医学中心心内科就诊的ACS患者282例,随机分为基因分型组141例,患者接受CYP2C19基因分型检测,并根据基因分型个体化抗血小板治疗;常规治疗组141例,患者为氯吡格雷75 mg/d的常规治疗。通过术后6个月随访,比较2组不良心脑血管事件(死亡、急性心肌梗死、支架内血栓、院内治疗的不稳定性心绞痛、缺血性脑卒中或短暂性脑缺血发作)、临床重大出血事件发生率。结果2组术后6个月死亡、急性心肌梗死、院内治疗的不稳定性心绞痛、缺血性脑卒中或短暂性脑缺血发作和临床重大出血事件发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。常规治疗组支架内血栓发生率明显高于基因分型组,差异有统计学意义(7.1%vs 1.4%,P=0.035)。结论CYP2C19基因分型指导ACS患者PCI术后个体化抗血小板治疗可以降低患者支架内血栓发生率。
- 周思远白静杨学东杨霞王禹
- 关键词：细胞色素P450酶系统血小板聚集抑制剂
- 急性前壁ST段抬高型心肌梗死患者经皮冠状动脉介入治疗后病理性Q波消失对临床预后的影响被引量：6
- 2021年
- 目的评价经皮冠状动脉介入术(PCI)治疗的急性前壁ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者病理性Q波变化对1年临床预后的影响。方法纳入2015年11月至2019年10月在秦皇岛市第一医院心内科行PCI治疗的急性前壁STEMI患者857例。根据患者心电图检查发现的病理性Q波情况,将患者分为无病理性Q波组(NQ组,n=76)、病理性Q波消失组(RQ组,n=416)与病理性Q波持续组(PQ组,n=365),收集三组的临床资料及肌酸激酶(CK)峰值,比较三组患者基线、随访1年超声心动图指标及预后不良情况。采用Cox风险比例模型,评价患者发生预后不良的独立相关因素。结果在纳入的857例患者中,有781例(91.1%)发生病理性Q波,其中有416例(53.3%)患者随访1年中病理性Q波消失,76例(8.7%)未发生病理性Q波。PQ组患者CK峰值较RQ组(t=6.772,P <0.001)与NQ组(t=14.002,P <0.001)明显提高,提示PQ组患者梗死面积较RQ组、NQ组明显提高。PQ组患者左心室(LV)重构较NQ组(t=23.145,P <0.001)与RQ组(t=14.090,P <0.001)明显提高。随访1年后,PQ组有26例(7.1%)死亡,RQ组有17例(4.1%)死亡,NQ组无患者死亡。多变量Cox风险比例模型分析表明,持续病理性Q波是急性前壁STEMI患者预后不良的独立相关因素(HR=1.283,95%CI 1.074~1.738,P=0.025)。结论急性前壁STEMI患者PCI治疗后,持续病理性Q波与心力衰竭或死亡风险增加独立相关,而病理性Q波消失患者预后不良率明显降低。
- 单红英杨学东徐勇王至军林剑王禹
- 关键词：病理性Q波预后前壁
- 精氨酸加压素介导心脏成纤维细胞增殖和胶原合成的作用及白介素-1干预的研究
- 该研究以培养的新生sprague-dawley(sd)大鼠cfs为实验模型,采用<'3>h-脯氨酸掺 入法、羟脯氨酸比色法、<'3>h-胸腺啶核苷(<'3>h-tdr)掺入法、mtt比色法和流式细胞仪细胞周期分析技术.综...
- 杨学东
- 关键词：心脏成纤维细胞胶原合成精氨酸加压素白介素-1Β
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- 不同性别大鼠压力感受性反射的差异及其机制的实验研究被引量：1
- 2001年
- 目的 探讨不同性别Sprague Dawley(SD)大鼠压力感受性反射 (BR)的差异及其机制。方法 以SD大鼠为实验模型 ,用生理记录仪同时记录血压和心率 ,测定BR功能 ,并采用免疫组化的方法测定颈动脉窦 (CS)处诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)的表达。结果 (1)雄性SD大鼠的BR功能较雌鼠强 ,压力感受性反射敏感度 (BRS)升高 (P <0 0 1) ,但两者的平均动脉压无差异 ;(2 )雌鼠CS的iNOS表达较雄鼠升高 ,CS处微量注射iNOS反义寡核苷酸 (iNOS ASODN)后 ,雄、雌鼠CS的iNOS表达均有明显下降 (P均 <0 ,0 1) ,而且两性之间iNOS表达差异消失 ;(3)颈动脉窦处微量注射iNOS ASODN后 ,雌鼠的BRS值明显升高 (P <0 0 1) ,升高幅度较雄鼠明显 (P <0 0 1) ,升高后的BRS值两性之间无差异 (P >0 0 5 ) :雄、雌鼠的加压反应明显降低 (P <0 0 1) ,下降幅度两性相比较无差异 (P >0 0 5 ) ;(4 )CS处微量注射iNOS ASODN对于基础平均动脉压无影响 (P >0 0 5 )。结论 不同性别SD大鼠的BR功能存在差异 ,其机制与CS的iNOS一氧化氮 (NO)
- 乔怀宇赵连友黄国明杨学东彭育红
- 关键词：一氧化氮合酶压力感受性反射颈动脉窦性别
