杨东
- 作品数:3 被引量:9H指数:2
- 供职机构:山东大学附属省立医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金山东省优秀中青年科学家科研奖励基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 重组共表达载体pSNAV2.0-HSV1-tk-IRES-hIL-1Ra的构建及其在滑膜细胞中的表达被引量:2
- 2009年
- 目的引入内部核糖体进入位点(IRES),构建HSV1-tk与hIL-1Ra双基因共表达AAV重组载体并检测其在滑膜细胞中的表达。方法PCR扩增HSV1-tkI、RES及hIL-1Ra基因片段,分别与pMD18-T simple载体连接,测序后,hIL-1Ra与HSV1-tk先后插入pMD-IRES,构建重组质粒pMD-HSV1-tk-IRES-hIL-1Ra,酶切出HSV1-tk-IRES-hIL-1Ra片段,克隆至AAV载体质粒pSNAV2.0上,构建成重组共表达质粒pSNAV2.0-HSV1-tk-IRES-hIL-1Ra,酶切鉴定后,用脂质体转染上述质粒至原代骨关节炎(OA)滑膜细胞,RT-PCR法鉴定共表达质粒在滑膜细胞中的表达。结果酶切鉴定证实重组共表达质粒构建正确;RT-PCR检测到转染后的OA滑膜细胞中表达HSV1-tk与hIL-1Ra。结论成功构建了重组共表达质粒pSNAV2.0-HSV1-tk-IRES-hIL-1Ra;重组质粒转染OA滑膜细胞后,能表达HSV1-tk与hIL-1Ra。这为OA的基因治疗研究提供了理论依据。
- 刘青春李伟张伟王来城张捷杨东吴帅
- 关键词:胸苷激酶白细胞介素滑膜骨关节炎
- 初次全髋关节置换术后引流管应用的必要性探讨被引量:5
- 2008年
- 将102例初次行全髋关节置换术的患者随机分为两组,各51例。一组于手术完毕放置常压引流管(引流组),一组不放置引流管(非引流组)。引流组术后红细胞比容明显低于非引流组(P<0.05),需输血者数明显多于非引流组(P<0.05),而在术后血肿形成、浅部及深部感染发生率、深静脉血栓形成率、住院时间、Harris评分等方面两组相近(P均>0.05)。认为初次全髋关节置换术后引流管应用的必要性不大。
- 杨东张伟孙水王健李伟任强刘青春
- 关键词:全髋关节置换术引流管红细胞比容输血血肿
- 腺病毒介导的HSV-TK/GCV系统对PVNS滑膜细胞的杀伤作用被引量:3
- 2008年
- 目的探讨腺病毒介导HSV-TK/GCV系统对色素沉着绒毛结节滑膜炎(PVNS)滑膜细胞的体外杀伤作用。方法将含LacZ基因的重组腺病毒载体Ad-LacZ转染PVNS滑膜细胞,X-gal染色法确定腺病毒对该细胞的转染效率,PCR检测转染细胞中HSV-TK基因的表达,MTT法检测TK阳性细胞对GCV的体外敏感性及旁观者效应,流式细胞仪检测HSV-TK/GCV系统作用后细胞的凋亡及坏死。结果感染复数为120时,近100%的细胞可被转染。HSV-TK/GCV系统对PVNS滑膜细胞的杀伤作用十分明显,且存在明显的旁观者效应。HSV-TK/GCV系统作用后细胞出现明显的凋亡及坏死。结论HSV-TK/GCV系统可明显杀伤PVNS中过度增殖滑膜细胞,可望用于PVNS的治疗。
- 杨东张伟李伟任强刘青春
- 关键词:胸苷激酶旁观者效应色素绒毛结节性