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MyoD基因诱导大鼠成纤维细胞转化为成肌细胞的研究被引量：4: 2007年; 目的探讨MyoD在体外诱导大鼠成纤维细胞分化为成肌细胞中的作用。方法将大鼠成纤维细胞分成2组:未转染组(N组)和MyoD基因转染组(M组);利用慢病毒表达系统,将大鼠MyoD基因转入大鼠成纤维细胞中,Blasticidin筛选;用RT-PCR和Western blot检测MyoD的表达;免疫组织化学检测MyoD、desmin及-αactin的表达;电子显微镜观察转染前后细胞形态的变化。结果RT-PCR和Western blot可检测出MyoD基因转染后细胞表达MyoD mRNA及蛋白质;免疫细胞化学检测MyoD表达在基因转染的细胞中为阳性,desmin、α-actin阳性表达只出现在M组;电子显微镜观察转染后的细胞胞浆中有微丝以及微管等结构。结论MyoD基因可诱导大鼠成纤维细胞分化成的细胞具有成肌细胞特征,为进一步研究MyoD基因诱导的成肌细胞及在大鼠心梗损伤修复中的作用提供了实验基础。; 范慧敏李阳卢蓉汪进益刘中民; 关键词：成纤维细胞

人真核表达的质粒载体pLenti6/V5-DEST-Cx43的构建及鉴定被引量：6: 2006年; 目的构建人真核表达的质粒载体pLenti6/V5-DEST-Cx43,为研究连接蛋白Cx43在心肌细胞间通讯、心脏胚胎发育及心肌细胞分化中的作用机制提供物质基础。方法从质粒p18-T上用限制性内切酶BamH1、Xho1切下Cx43cDNA片断,进行琼脂糖电泳,割胶回收纯化;限制性内切酶BamH1、Xho1酶切质粒pENTR11,将线形化的载体与回收的Cx43cDNA片断用T4DNA连接酶连接,测序后通过LR反应克隆到慢病毒载体pLenti6/V5-DEST中。结果凝胶电泳和测序结果均证明已将人类Cx43cDNA克隆到慢病毒载体pLenti6/V5-DEST中。结论成功构建了人真核表达的质粒载体pLenti6/V5-DEST-Cx43。; 范慧敏李阳刘中民; 关键词：连接蛋白43 慢病毒属真核细胞

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李阳