李璐娜
- 作品数：7 被引量：18H指数：3
- 供职机构：山东大学医学院实验核医学研究所更多>>
- 发文基金：山东省卫生厅科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- rhTPO在大肠杆菌中的表达、纯化及生物活性分析被引量：1
- 2003年
- 目的:探讨人促血小板生成素(humanthrombopoietin,hTPO)在大肠杆菌中表达、分离纯化及生物学活性初步鉴定。方法:利用RT-PCR法从人胎肝细胞中扩增目的基因片段,将其定向插入pQE30表达质粒T5启动子下游的多克隆区,转化大肠杆菌M15,得到pQE30-TPO的工程菌,诱导目的蛋白表达、纯化。将表达产物给血小板减少模型小鼠尾静脉注射,观察注射后不同时间血小板量的改变。结果:经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropylthio-β-D-galactosideIPTG)诱导培养,该工程菌可以产生单一特异性的高表达蛋白条带。将纯化后的表达蛋白注射小鼠,结果显示对实验性小鼠血小板减少症具有一定的治疗作用。结论:在大肠杆菌中成功地高效表达了重组hTPO,该产物具有促血小板生成的活性。
- 侯桂华梁婷李璐娜刘德宜张超于新娟
- 关键词：促血小板生成素分子克隆大肠杆菌血小板减少
- MIF在小鼠同种皮肤移植排斥中作用机理的研究
- 目的：为研究MIF与同种移植排斥的关系,探讨MIF在同种移植排斥过程中的作用机理,我们利用小鼠同种皮肤移植模型,检测了移植后不同时间脾细胞和移植部位MIFmRNA的相对表达量;同时利用抗MIF单克隆抗体（Ⅲ.D.9）,研...
- 李璐娜
- 关键词：巨噬细胞移动抑制因子移植排斥放射免疫分析皮肤移植
- 文献传递
- 小鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)原核表达载体pQE31-MIF的构建被引量：3
- 2002年
- 目的 :获得小鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)全长基因克隆 ,并构建重组表达载体pQE3 1 MIF。方法 :用RT PCR技术 ,以特异性寡核苷酸为引物 ,从小鼠脾脏总RNA中扩增MIF基因 ,插入pMD1 8 T载体 ,用限制性核酸内切酶和DNA序列分析鉴定重组克隆。构建并鉴定原核表达载体pQE3 1 MIF。结果 :成功克隆了小鼠MIF基因 ,构建了重组质粒pMD1 8 MIF及重组原核表达质粒。序列分析显示获得的MIF基因cD NA序列与文献报导一致。结论 :成功构建了重组表达质粒pQE3 1 MIF 。
- 于敏侯桂华韩建奎杨富勇刘德宜张超李璐娜梁婷
- 关键词：巨噬细胞移动抑制因子原核表达小鼠
- MIF在小鼠同种皮肤移植排斥过程中的表达被引量：2
- 2004年
- 目的通过对巨噬细胞游走抑制因子MIF在小鼠同种皮肤移植排斥前后脾组织和移植皮片中的相对表达量分析探讨MIF表达与小鼠同种皮肤移植排斥的关系。方法:利用小鼠同种皮肤移植模型,对皮肤移植后不同时间的小鼠脾细胞和移植皮片进行RNA提取及逆转录聚合酶链反应RT-PCR,以β肌动蛋白β-actin作为对照,比较移植前后MIF的相对表达量。结果移植后的移植皮片中MIF的相对表达量有明显变化,移植后第1、7、14天,逐渐升高,在排斥高峰期第14天达到最高,第21天皮片完全排斥后下降,但仍比移植前水平高。在移植过程中,脾细胞MIF相对表达量无明显变化。结论在移植排斥过程中,移植物局部MIFmRNA表达增强,提示MIF可能参与了小鼠同种皮肤移植的局部排斥反应。
- 李璐娜侯桂华梁婷刘德宜张超
- 关键词：巨噬细胞游走抑制因子逆转录聚合酶链反应小鼠
- 细胞因子与移植排斥被引量：7
- 2002年
- 细胞因子在异体器官移植的排斥反应中占重要地位 ,各类细胞因子对移植排斥有不同作用。近年来 ,人们对各类细胞因子在移植排斥中的表达及作用机理、细胞因子与移植排斥的诊断及鉴别诊断的研究 ,取得了很大进展。部分细胞因子或其抗体可抑制排斥反应 ,诱导移植耐受 ,为临床治疗移植排斥、提高移植器官存活提供了依据。
- 李璐娜
- 关键词：细胞因子移植排斥
- 人促血小板生成素(TPO)原核表达载体pQE30-TPO的构建
- 2003年
- 目的:获得人血小板生成素全长cDNA克隆,并构建重组表达载体pQE30-TPO。方法:利用RT-PCR技术从人胎肝细胞mRNA中扩增目的基因,将扩增产物克隆至pMD18-T载体,经菌落PCR鉴定后,DNA序列分析重组质粒pMD18-T-TPO。构建并鉴定原核表达载体pQE30-TPO。结果:构建了重组克隆载体pMD18-T-TPO和重组表达载体pQE30-TPO,序列分析表明,获得的TPOcDNA序列与国内外报道的人促血小板生成素核苷酸序列完全一致。结论:成功构建了重组表达载体pQE30-TPO,为TPO的进一步研究奠定了基础。
- 梁婷侯桂华李璐娜
- 关键词：促血小板生成素克隆分子原核表达
- 小鼠MIF在大肠杆菌中的表达及纯化被引量：5
- 2003年
- 目的:获得足够量的高纯度小鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)重组蛋白。方法:酶切重组克隆质粒pMD18-MIF,将片段插入原核表达载体pQE31,构建相应的重组表达质粒pQE31-MIF,将此质粒转化大肠杆菌M15,得到转化子。经IPTG诱导表达后进行菌体蛋白的Westernblotting免疫印迹分析,并用Ni-NTA凝胶进行纯化。结果:MIF基因重组体构建成功,克隆的目的基因片段在M15中产生的融合表达产物在Westernblotting检测中具有与抗MIF单克隆抗体发生特异性结合反应的特性。得到了纯化的目的蛋白。结论:MIF基因片段可在大肠杆菌中有效表达,表达产物可以与抗MIF单克隆抗体发生特异性结合反应,并得到纯化的MIF。
- 侯桂华于敏李璐娜
- 关键词：巨噬细胞游走抑制因子小鼠基因表达大肠杆菌
