李洋
- 作品数:20 被引量:40H指数:4
- 供职机构:中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室更多>>
- 发文基金:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 柔嫩艾美耳球虫钙依赖蛋白激酶3的分子鉴定与分析
- 钙依赖蛋白激酶(CDPKs)是一类广泛存在于植物的蛋白激酶,目前只在植物、绿藻、纤毛虫和顶复器原虫中发现.CDPKs是依赖于Ca2+而不依赖于钙调素(CaM)的蛋白激酶,它不同于动物细胞中的蛋白激酶C和依赖于Ca2+/钙...
- 韩红玉朱顺海姜连连李洋董辉赵其平孔春林黄兵
- 柔嫩艾美耳球虫子孢子高表达新基因的克隆、表达及分析被引量:3
- 2010年
- 为克隆和研究柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)新基因,本研究在所获得的ESTs序列的基础上,应用RACE技术克隆获得了1个在子孢子阶段高表达新基因的全长cDNA序列(GU553107),命名为ZB7-C11,该基因全长1439bp,ORF为525bp,编码174个氨基酸,预测表达蛋白的分子量约为18.7ku。Real-timePCR对E.tenella不同发育阶段(未孢子化卵囊、孢子化卵囊、子孢子和裂殖子)表达量进行分析显示,该基因在子孢子阶段的表达高于其它阶段。另外,将ZB7-C11克隆于pGEX-4T中构建重组质粒pGEX-4T-C11,转化大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达6h后其表达量最高,并且重组蛋白分子量约44.7ku大部分以可溶性存在。Westernblot分析显示该重组蛋白可被抗E.tenella的多克隆抗血清识别,表明该蛋白具有较好的反应原性。该结果为进一步研究该基因的生物学功能奠定了基础。
- 李洋韩红玉董辉赵其平姜连连朱顺海郭涛平宪卿马卫娇曾艳波程军黄兵
- 关键词:柔嫩艾美耳球虫子孢子克隆
- 柔嫩艾美耳球虫钙依赖蛋白激酶基因及应用
- 本发明公开了一种柔嫩艾美耳球虫基因,所述基因编码钙依赖蛋白激酶,其核苷酸序列包含:编码SEQ ID NO.1氨基酸序列的DNA序列,或编码SEQ ID NO.1所示氨基酸序列中缺失、添加、插入或取代一个或多个氨基酸所得到...
- 董辉韩红玉黄兵李洋姜连连赵其平朱顺海马卫娇程军曾艳波
- 柔嫩艾美耳球虫钙依赖蛋白激酶3基因在毕赤酵母中的表达及分析被引量:6
- 2012年
- 旨在真核表达系统中高效表达柔嫩艾美耳球虫钙依赖蛋白激酶3(Eimeria tenellacalcium-dependent protein kinase-3,EtCDPK3),获得有活性的天然蛋白,利用毕赤酵母表达系统对该基因进行了表达。将EtCDPK3基因连接到毕赤酵母表达载体pPIC9K上,构建重组质粒pPIC9K-EtCDPK3。重组质粒通过电击转化入酵母细胞GS115后,用组氨酸缺陷培养基和G418分别进行筛选,获得含重组质粒的酵母表达细胞。重组酵母细胞在含1%甲醇的BMMY培养基中诱导产生目的蛋白,培养收集1-4 d的部分上清。经SDS-PAGE检测,所表达的蛋白相对分子质量约为49 kD。Western blotting表明,该蛋白能与兔抗EtCDPK3血清特异性结合。结果表明,柔嫩艾美耳球虫CDPK3基因在毕赤酵母中成功地进行了表达。
- 孔春林韩红玉李洋董辉姜连连李婷赵其平朱顺海黄兵
- 关键词:柔嫩艾美耳球虫真核表达毕赤酵母
- 堆形艾美耳球虫早熟株选育及相关生物学特性研究被引量:6
- 2009年
- 为了选育堆形艾美耳球虫(Eimeria acervulina)早熟株及观测其生物学特性,运用Jeffers创立的艾美耳属球虫早熟株选育方法,对实验室保存的堆形艾美耳球虫进行连续传代早熟选育,并对获得的早熟株与母株孢子化卵囊大小、繁殖能力、致病性以及免疫保护力等指标进行了测定,比较堆形艾美耳球虫早熟株与母株之间的基本生物学特性差异。经过18代早熟选育后,堆形艾美耳球虫的潜在期由母株的99h缩短至84h。与母株相比,早熟株的孢子化卵囊大小明显减小(P〈0.05),卵囊繁殖能力降低了17%~42%。致病性试验中,早熟株感染组的平均增重均高于母株,而病变记分相当。免疫保护试验中,早熟株与母株的免疫保护力相当,其卵囊抑制率略低于母株,差异不明显(P〉0.05)。结果表明,本研究成功选育出堆形艾关耳球虫早熟株,对母株攻击具有保护力,为鸡球虫疫苗的研制奠定了基础。
- 李玉剑董辉韩静芳岳城黄兵韩红玉赵其平姜连连郭涛李洋平宪卿
- 关键词:球虫堆形艾美耳球虫早熟株生物学特性
- 几种药物抗小鼠弓形虫感染的初步效果被引量:12
- 2010年
- 为寻找有效的抗弓形虫药物,选择了临床上使用较多的6种药物进行抗小鼠弓形虫感染初步实验。用刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)长宁株(CN株)速殖子,按1×104/鼠腹腔接种昆明系雄性小白鼠,接种后4 h用药组通过灌服或饮水用药,每鼠剂量分别为阿奇霉素(Azithromycin)150、120、90 mg/(kg·d),泰妙菌素(Tiamulin)100 mg/(kg·d),克拉霉素(Clarithromycin)15 mg/(kg·d),磺胺氯吡嗪钠(Sulfachloropyrazine sodium)150、120、90 mg/(kg·d),甲硝唑(Metronidazole)150 mg/(kg·d),甲氧苄胺嘧啶(Trimethoprim)10 mg/(kg·d),连续用药5~6 d,接种后10 d结束实验。结果阿奇霉素、磺胺氯吡嗪钠组的平均存活天数明显高于感染不用药组(P〈0.05),泰妙菌素、克拉霉素、甲硝唑、甲氧苄胺嘧啶组在所用剂量下的存活天数与感染不用药组无明显差异(P〉0.05);用药后4-7 d,取腹腔液镜检速殖子,与感染不用药组相比,阿奇霉素组减少70%以上,磺胺氯吡嗪钠组减少99%以上。研究结果提示,磺胺氯吡嗪钠具有良好的抗弓形虫效果,其推荐剂量与用药疗程还有待进一步研究。
- 黄兵朱顺海曾艳波董辉姜连连韩红玉李洋赵其平平宪卿程军
- 关键词:刚地弓形虫弓形虫病阿奇霉素磺胺氯吡嗪钠
- 连锁群选育法:一种新型的遗传学鉴定基因方法
- 连锁群选育法(Linkage Group Selection,LGS)是一种新型的鉴定与表型相关基因的遗传学方法,具有快速、有效、省力等优点,最早由Culleton等人于2005年提出,并首先用于疟原虫(Plasmodi...
- 郭涛黄兵董辉韩红玉赵其平姜连连李洋平宪卿
- 文献传递
- 柔嫩艾美耳球虫A08基因的阶段表达分析与毕赤酵母表达系统构建
- 平宪卿韩红玉黄兵姜连连董辉赵其平李洋郭涛朱顺海
- 安徽两个鸡场球虫的抗药性试验被引量:5
- 2010年
- [目的]研究安徽2个鸡场球虫抗药性程度,为制定出合理的用药方案提供依据。[方法]从鸡场采集新鲜粪便,经实验室分离增殖,并人工感染孢子化卵囊,测定对地克珠利、氯苯胍、二硝托胺、癸氧喹酯、尼卡巴嗪、马杜拉霉素、盐霉素和拉沙洛西钠8种药物的抗药性。[结果]安徽1号鸡场球虫对癸氧喹酯无抗药性,尼卡巴嗪中度抗药,其余6种药物完全抗药;安徽2号鸡场,对癸氧喹酯河尼卡巴嗪无抗药性,氯苯胍中度抗药,其余5种药物完全抗药。[结论]安徽两鸡场球虫对多数药物已产生抗药性。
- 赵其平倪玉明李洋董辉姜连连朱顺海韩红玉郭涛平宪卿黄兵
- 关键词:鸡球虫抗药性抗球虫药
- 柔嫩艾美耳球虫钙依赖蛋白激酶基因及应用
- 本发明公开了一种柔嫩艾美耳球虫基因,所述基因编码钙依赖蛋白激酶,其核苷酸序列包含:编码SEQ ID NO.1氨基酸序列的DNA序列,或编码SEQ ID NO.1所示氨基酸序列中缺失、添加、插入或取代一个或多个氨基酸所得到...
- 董辉韩红玉黄兵李洋姜连连赵其平朱顺海马卫娇程军曾艳波
- 文献传递