李树峰 作品数:63 被引量:192 H指数:6 供职机构: 东北农业大学 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 转基因生物新品种培育专项 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 文化科学 更多>>
牛骨骼肌卫星细胞的分离培养及诱导分化方法的建立 2013年 为了给牛骨骼肌卫星细胞的分离培养及诱导分化方法及进一步揭示肌肉分化的机理及转基因肉牛的研究提供重要帮助,试验以新生胎牛的骨骼肌为试验材料,分别采用胶原酶I和胶原酶Ⅺ与胰蛋白酶结合对其进行消化, 兴孝友 佟慧丽 李树峰关键词:骨骼肌卫星细胞 诱导分化 肉牛 胰蛋白酶 胶原酶 转基因 小鼠2-细胞、4-细胞胚胎G_1期检测及同步化的研究 2001年 目的 研究小鼠 2 -细胞、4-细胞胚胎同步化的方法 ,并检测其 G1 期的持续时间。 方法 先用低温抑制和噻胺酯哒唑阻断的方法分别将小鼠 2 -细胞和 4-细胞胚胎同步化于 G1 期 ,然后利用放射自显影技术检测胚胎DNA的合成。 结果 (1)小鼠 2 -细胞胚胎 G1 期的持续时间短于 3h。(2 )噻胺酯哒唑对胚胎细胞的抑制作用及对胚胎发育的影响有浓度依赖性。(3)小鼠 4-细胞胚胎的 G1 期约 3~ 4h。 结论 小鼠早期胚胎细胞周期的 G1 期持续时间都很短 ,利用噻胺酯哒唑阻断和低温控制的方法能够得到大量同步于 G1 期的胚胎细胞。 于元松 严云勤 刘焕奇 杨信志 李树峰 谭景和关键词:G1期 放射自显影 小鼠 胚胎 同步化 双酚A体外诱导雄性小鼠生殖细胞凋亡及其分子机制 被引量:24 2007年 目的采用双酚A(BPA,一种典型的环境雌激素)体外诱导雄性小鼠生殖细胞凋亡,并探讨其分子机制。方法对体外培养的雄性小鼠生殖细胞以不同剂量的BPA(10-7、10-6和10-5mol/L)进行诱导,检测细胞的凋亡状况;并应用RT-PCR和免疫蛋白印记技术检测凋亡相关基因(Bax/Bcl-2、Fas/FasL)的表达变化。结果低剂量的BPA(10-7mol/L)即能够引起支持细胞和精子细胞凋亡,但精原细胞对于BPA的作用却不敏感;随着BPA处理浓度的升高,支持细胞和精子细胞中Fas/FasL、Bax表达上调,Bcl-2表达下调,而精原细胞中基因表达变化不明显。结论BPA诱导的睾丸生殖细胞凋亡,不仅是依靠调节Fas/FasL系统起作用,Bax/Bcl-2基因也能够参与这一过程的调节。 孟祥东 于景华 严云勤 李树峰关键词:环境雌激素 双酚A 生殖细胞 细胞凋亡 一个牛α-actin基因的启动子及其应用 一个牛α-actin基因的启动子及其应用,属于遗传工程技术领域,其特征在于牛α-actin基因262bp启动子片段内部一段含有3个SRE正调控元件的170bp的核酸序列,将其使用不同引物进行PCR扩增,得到2个170bp... 严云勤 佟慧丽 李树峰 胡倩 赵丹丹 李光鹏 张伟伟文献传递 规模鸡场鸡传染性支气管炎感染状况调查 被引量:4 2013年 鸡传染性支气管炎(infectious bronchitis,IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)引起的一种急性、高度接触传染性呼吸道疾病,临床表现为咳嗽、打喷嚏、气管哕音、肾脏病变,蛋鸡产蛋数量和蛋的品质下降,雏鸡可因为感染后的呼吸道和肾脏的病变造成死亡。IB能够引起饲料报酬下降,增重减少,并发感染引起气囊炎,使肉鸡在加工过程中被淘汰,而产蛋下降等所造成的经济损失远远大于由本病直接致死造成的经济损失。 矫洪涛 李先军 李树峰 张加勇关键词:鸡传染性支气管炎病毒 传染性呼吸道疾病 鸡场 肾脏病变 饲料报酬 转基因细胞培养装置 转基因细胞培养装置,属于医疗和实验室设备技术领域,由瓶盖、瓶口、瓶头、瓶颈、瓶上面、瓶下面、瓶体、瓶腔、支撑柱、生长板、透液板、液盒上腔、生长板插孔、液盒、瓶底、瓶侧壁、透液板体、板间支撑、支撑轴、生长板卡槽、托层立壁、... 严云勤 佟慧丽 李树峰 金慧然 李光鹏文献传递 Egr1对小鼠成肌细胞C2C12分化的影响 被引量:6 2018年 早期生长反应蛋白1(early growth response protein 1,Egr1)作为转录因子在细胞增殖、分化及凋亡等许多生物学过程中都扮演着重要角色,但是其对小鼠成肌细胞C2C12分化的影响尚不明确。该研究采用Western blot和免疫荧光技术检测Egr1在C2C12细胞分化过程中的表达规律及定位。利用CRISPR(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)/Cas9技术分别激活和抑制Egr1的表达,进而探讨Egr1对C2C12细胞分化的影响。结果显示,随着C2C12细胞分化的进行,Egr1的表达量在分化的第5 d达到峰值,随后呈下降趋势。Egr1表达定位于C2C12的细胞核与细胞质中,随着分化的进行,其在细胞核和细胞质中的表达量均显著升高。分别激活或抑制Egr1后,C2C12细胞肌管融合率以及肌肉分化标志分子肌细胞生成蛋白(myogenin,MYOG)和肌球蛋白重链2(myosin heavy chain 2,MYH2)水平均显著增加或降低。该研究结果表明,Egr1能够促进体外小鼠成肌细胞C2C12的分化。 崔亚凤 严云勤 李树峰 佟慧丽关键词:C2C12 细胞分化 哺乳动物卵巢中的细胞凋亡及其调节 被引量:14 2003年 细胞凋亡是近几年细胞生物学研究的热点。卵巢中发生的生殖细胞减少、卵泡闭琐和黄体退化都与细胞凋亡密切相关。就上述三个过程中的细胞凋亡进行了概述 ,并简要介绍了新近发现的几种因素对卵巢细胞凋亡的调节。 郝丽 李树峰 严云勤关键词:哺乳动物 卵巢 细胞凋亡 一种肌细胞生成素(MyoG)基因的增强子 一种肌细胞生成素(MyoG)基因的增强子,属于遗传工程技术领域,由调控元件E-box、SRE、KLF3、E-box、Sp1、E-box、Sp1、TEF-1组成,其特征在于MyoG基因增强子调控元件顺序为:E-box、SR... 佟慧丽 李树峰 金慧然 严云勤 王鑫 李光鹏文献传递 转MSTN干扰载体细胞株的获得及外源基因整合情况的研究 2014年 转基因细胞株的建立能够为转基因体细胞克隆技术奠定重要基础。该实验利用MSTN干扰载体,转染鲁西黄牛胎儿成纤维细胞,获得5个相应的转基因单克隆细胞株。采用Realtime PCR和高效热不对称互交式PCR(hiTAIL-PCR)技术检测细胞克隆中MSTN表达载体的拷贝数及其在牛基因组中的整合位点。结果表明,荧光定量PCR有效检测到5个细胞克隆中质粒的拷贝数分别为2.26±0.32、1.52±0.25、25.68±1.02、8.43±0.73和6.72±0.10。hiTAIL-PCR对整合位点的检测结果表明,质粒片段在插入到基因组的过程中进行了重组,其与基因组的结点处有2或4个共同的碱基序列。该研究探索MSTN干扰载体在牛胎儿成纤维细胞中的整合机制,以期获得遗传背景清楚的转基因细胞作为体细胞核移植的重要材料,为高产转基因肉牛新品种的培育提供重要的理论和实验基础。 刘丹 佟慧丽 李树峰 常淑伟 杨翠翠 严云勤关键词:MSTN 拷贝数 整合位点 REAL-TIME