李春映
- 作品数：7 被引量：16H指数：2
- 供职机构：南京林业大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金江苏省政府留学基金江苏高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学化学工程更多>>
- 基于CODEHOP克隆杉木种子14-3-3基因片段被引量：1
- 2015年
- 对于未测序的物种,利用常规的引物设计很难扩增出蛋白质组获得的蛋白质基因。利用CODEHOP设计杉木种子14-3-3蛋白质的简并引物来进行反转录PCR,从杉木未成熟的种子中扩增出1 000 bp左右的产物。将PCR产物构建p MD-19Vector载体上并转化JM109菌感受态细胞中,菌落PCR扩增测序。结果显示,利用CODEHOP方法设计简并引物扩增的目标片段的大小及序列与预期的一致。这将为杉木其他蛋白质基因的克隆和研究提供参考。
- 李春映仇伟杨立伟施季森甄艳
- 关键词：CODEHOP杉木
- 鹅掌楸愈伤蛋白质组的样品比较
- 2016年
- 为建立适合鹅掌楸胚性愈伤大规模蛋白质组研究,比较分析4种蛋白质提取方案:Mg/NP-40-三氯乙酸(简称TCA)/丙酮、TCA/丙酮、裂解液-Clean-up、裂解液-TCA/丙酮,并进行蛋白质的聚丙烯酰腚凝胶电泳(简称SDS-PAGE)和双向电泳分析。SDS-PAGE图谱显示:裂解液-Clean-up、裂解液-TCA/丙酮法分离高分子量蛋白质条带相对于Mg/NP-40-TCA/丙酮、TCA/丙酮法少;Mg/NP-40-TCA/丙酮法和裂解液-Clean up法低分子量提取、分离效果较差。在SDS-PAGE基础上对Mg/NP-40-TCA/丙酮、TCA/丙酮法提取蛋白质样品进行双向电泳,结果表明:TCA/丙酮法得到的凝胶图蛋白质点分布均匀、背景清晰且纵横条纹较少,且TCA/丙酮法相对于Mg/NP-40-TCA/丙酮法来说在小分子量蛋白质、碱性蛋白质分离方面有优势。同时随机选取双向电泳分离的蛋白质进行质谱分析,结果显示,TCA/丙酮法较适合鹅掌楸胚性愈伤蛋白质组的大规模分析。
- 徐飞郑秀化李春映施季森甄艳
- 关键词：鹅掌楸愈伤组织蛋白质组SDS-PAGE双向电泳
- 蛋白质组学研究中磷酸化蛋白质(肽)富集策略及展望被引量：1
- 2015年
- 蛋白质磷酸化是细胞信号转导途径中重要的调控过程,但磷酸化蛋白质(肽)丰度低、化学计量低、易降解等限制了磷酸化蛋白质(肽)的研究。磷酸化蛋白质(肽)的制备是蛋白质磷酸化研究成功的关键步骤。笔者综述了磷酸化蛋白质(肽)的一些富集策略:基于抗体技术、亲和性标签磷酸化蛋白质富集策略,基于固相金属亲和层析、金属氧化亲和层析、IMAC连续洗脱、离子交换层析、亲水相互作用层析的磷酸化肽富集策略,熟练掌握及综合应用这些磷酸化蛋白质(肽)的富集策略,对于研究细胞信号转导途径中的调控因子具有重要作用。
- 甄艳李春映陆叶施季森
- 关键词：磷酸化蛋白质组磷酸化蛋白
- 磷酸化蛋白质组定量研究策略被引量：4
- 2014年
- 蛋白质磷酸化修饰是调控多样种生物过程的一种重要的翻译后修饰,定量分析内部和外部因子作用下磷酸化蛋白质的分子调控机制对理解生物功能非常重要。早期磷酸化蛋白质组研究的重点是定性检测、鉴定磷酸化蛋白质及磷酸化位点的定位。近年来,随着质谱技术的快速发展使得定量磷酸化蛋白质组研究有了很大的发展。利用磷酸化蛋白质组的定量分析监测蛋白质磷酸化的动态变化有助于阐明生物过程及其功能的实现机制。本文综述了磷酸化蛋白质组定量分析策略:基于2-DE的磷酸化蛋白质组定量策略,基于无胶的质谱磷酸化蛋白质组标记定量策略及无标记定量分析策略。磷酸化蛋白质组的定量分析将有助于更好的阐明生物的信号传导机制。
- 甄艳李春映施季森
- 关键词：翻译后修饰磷酸化蛋白质组质谱双向电泳
- 植物磷酸化蛋白质组研究进展被引量：9
- 2014年
- 蛋白质磷酸化是蛋白质翻译后修饰研究最深入的领域之一,蛋白质磷酸化也是信号转导的关键调控因子。磷酸化修饰可精细地协调激酶和磷酸化酶网络,进而调控细胞生长、增殖及胞内外生物刺激应急反应等。但是由于蛋白质磷酸化短暂性、高动态性及低丰度的特点,使得磷酸化蛋白质组研究具有挑战性。本文从基于2-DE的植物磷酸化蛋白质组、植物磷酸化肽富集、基于质谱植物磷酸化肽鉴定及位点分析、基于质谱植物磷酸化肽定量分析、植物磷酸化蛋白质数据库等方面综述植物磷酸化蛋白质组研究进展、策略、相应技术的优缺点及展望了未来发展的方向。
- 甄艳李春映陆叶施季森
- 关键词：植物磷酸化质谱
- 杂交鹅掌楸胚性能力获得磷酸化蛋白质组探讨
- 2020年
- 为了探索胚性能力获得过程中的蛋白质磷酸化作用,本研究利用杂交鹅掌楸未成熟种子诱导的胚性和非胚性愈伤组织为材料,通过2-DE技术分离蛋白质,Pro-Q磷酸化蛋白质染色,软件Imagemaster 6.0来检测蛋白质的差异表达。利用质谱鉴定得到了41个差异表达蛋白质。这些蛋白质参与愈伤组织胚性能力的获得,如eukaryotuc release factor1影响着细胞的伸长和径向细胞分裂,EF-hand域蛋白有助于胚性干细胞分裂和维持,Ca^2+离子信号结合蛋白、Sec14p类磷酸酰肌醇转运家族蛋白参与细胞极性和器官形态建成,Mediator of RNA polymeraseⅡtranscription subunit调控基因的转录激活及染色质重塑因子介导胚形态建成和器官发生等,为体胚发生过程中体细胞胚性能力获得提供科学依据。
- 李春映殷梓苡陈金慧施季森甄艳
- 关键词：磷酸化蛋白质组质谱
- 植物液泡蛋白质组研究被引量：1
- 2016年
- 植物液泡是植物生长、发育及逆境防御必要细胞器。细胞中有不同类型的液泡,执行不同的功能,如蛋白质降解、更新、解毒、代谢物储存和离子稳态等。随着质谱技术的快速发展,基于质谱的蛋白质组学分析将有助于鉴定液泡蛋白质组分及了解液泡膜上的一些特异载体和通道转运过程。本综述将从液泡功能,液泡蛋白质及液泡膜蛋白的提取、纯化,植物液泡蛋白质组及膜蛋白质组的研究,液泡磷酸化蛋白质组研究等方面进行阐述。
- 郑秀化李春映施季森甄艳
- 关键词：植物蛋白质组磷酸化蛋白质组
