李悟 作品数:42 被引量:78 H指数:5 供职机构: 兰州军区乌鲁木齐总医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 新疆维吾尔自治区自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
去细胞带瓣牛颈静脉管道支架的制备及形态结构观察 被引量:2 2006年 目的研究去细胞带瓣牛颈静脉组织工程支架的制备,并观察其形态结构。方法取新鲜牛颈静脉48条,随机分为对照组、实验组,每组24条。对照组为新鲜牛颈静脉;实验组为去细胞牛颈静脉,用40 g/L脱氧胆酸钠+50 m l/L Triton-X-100为主要成分的试剂进行处理,去除内皮细胞及成纤维细胞。HE染色、苦味酸-天狼猩红染色、弹力纤维染色、电子扫描显微镜检查、基因组DNA检测,观察其形态结构,评价去细胞效果。结果实验组瓣膜及血管壁中内皮细胞、成纤维细胞去除完全,无细胞核碎片;瓣膜及血管壁胶原纤维和弹力纤维呈波浪状排列、整齐,结构完整;瓣膜、血管壁基因组DNA含量,分别较对照组下降97.58%、97.25%。结论脱氧胆酸钠+Triton-X-100是一种有效的去除牛颈静脉细胞,制备组织工程带瓣管道支架的方法。 李悟 刘维永 金振晓关键词:颈静脉 去细胞牛颈静脉构建组织工程右心带瓣管道体内实验初步研究 2011年 目的:将体外构建的组织工程右心带瓣管道,以带瓣补片的形式移植于犬主肺动脉,观测带瓣管道材料体内情况。方法:去细胞处理牛颈静脉体,无菌处理后种植标记过的犬骨髓间质干细胞,构建组织工程带瓣管道,犬开胸手术,将体外构建的组织工程右心带瓣管道,以带瓣补片的形式移植于犬主肺动脉,术后4、8、12行胸部B超检查;取出补片,HE染色;荧光显微镜下标记细胞检测;样本钙含量测定。结果:术后犬胸部B超观察:瓣叶无增厚,钙化,管道血流通畅,无血栓及钙化。术后4、8、12周除了瓣叶逐渐缩小外,补片无动脉瘤形成,瓣膜表面光滑,无血栓形成,弹性良好,血管壁内面光滑,无血栓形成。种植种子细胞牛颈静脉带瓣补片成活。4周钙含量增加,8周时候,钙含量又有增加,12周时钙含量与8周相比无明显变化。结论:组织工程技术构建组织工程右心带瓣管道有可行之处。 李悟 王忠华 王卫东 张民 刘维永 金峰关键词:颈静脉 带瓣管道 电视胸腔镜手术20例报告 2000年 目的 探讨电视胸腔镜手术技巧。方法 施行 2 0例电视胸腔镜手术。其中包括肺大疱切除及胸膜粘连松解术 8例 ,肺楔形切除术 6例 ,胸膜活检 3例 ,纵隔肿瘤摘除 1例 ,创伤性血胸止血术 1例 ,肺棘球蚴内囊摘除 1例。1例中转为开胸术。结果 2 0例手术无严重并发症 ,患者均顺利康复。结论 正确掌握电视胸腔镜手术技巧 ,结合具体情况操作 ,是手术成功的关键。 冯新海 刘锟 王忠华 刘培良 李悟关键词:胸腔镜术 胸部外科手术 胸水 冠心病合并室壁瘤42例的外科治疗 被引量:1 2008年 目的:总结42例左心室室壁瘤(LVA)行室壁瘤内修补手术的治疗效果。方法:42例中男28例,女14例,平均年龄(65.42±7.61)岁,合并心绞痛24例,充血性心衰12例,室性心律失常11例,系统性栓塞2例。左室射血分数(EF)(23.7±18.0)%,均在体外循环下行室壁瘤切除手术治疗,34例同时行CABG。结果:存活40例,死亡2例,32例病症状消失或症状改善,EF为(40.7±8.5)%。结论:外科治疗室壁瘤可使心功能及心绞痛症状得到明显改善。 周仲毅 王忠华 李悟 周平 王卫东 袁源 李娟 张贵斋关键词:冠心病 左心室室壁瘤 手术 组织工程心脏瓣膜的医学伦理研究 被引量:1 2004年 简要论述构建组织工程心脏瓣膜材料和方法 ;探讨组织工程心脏瓣膜的伦理问题 ,准确、合理处理先进技术与伦理道德的关系。 李悟 刘维永 郭照江关键词:心脏瓣膜 伦理 牛颈静脉组织工程带瓣管道实验研究 被引量:3 2008年 目的:培养犬骨髓间充质干细胞,标记后种植于去细胞牛颈静脉,构建组织工程带瓣管道。方法:去除牛颈静脉细胞作为支架材料,评价去细胞效果。分离、培养和扩增犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)作为种子细胞,体外再细胞化牛颈静脉,构建组织工程带瓣管道。结果:去细胞处理后,牛颈静脉瓣叶及血管壁内皮细胞、成纤维细胞去除完全,细胞外基质纤维呈波浪状排列整齐,结构完整。由犬骨髓分离出的BMSCs,SH2、Vimentin、α-SMA呈阳性;对CD34、Ⅷ因子、Laminin呈阴性,能满足组织工程种子细胞的需求。采用Hoechst荧光标记的种子细胞,可传入子代细胞,其荧光亮度无明显衰减。种子细胞种植7d后,细胞已经贴附于去细胞牛颈静脉上,部分深入到瓣叶支架内部。结论:犬骨髓间充质干细胞Hoechst标记后种植于去细胞牛颈静脉,构建组织工程带瓣管道,方法简单、可行。 李悟 周仲毅 王忠华 王卫东 张民 刘维永 金峰关键词:颈静脉 种子细胞 带瓣管道 应用犬骨髓间充质干细胞体外构建组织工程心脏瓣膜的实验研究 被引量:3 2005年 目的:将犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)分离、自然扩增后,体外与去细胞猪主动脉瓣复合构成组织工程瓣膜(TEHV),观察其生长情况,以评价其作为组织工程心脏瓣膜种子细胞的可行性.方法:采用密度梯度离心及贴壁筛选法分离犬的BMSCs,培养扩增,用免疫组化的方法进行鉴定;采用本实验室方法构建的生物材料--去细胞猪主动脉瓣为支架,种植犬的BMSCs,静态培养7~10 d;进行组织学切片及扫描、透射电镜观察,并进行机械力学性能检测.结果:分离的BMSCs细胞免疫组化显示SH2、Vimentin、α-SMA(+),CD34、Ⅷ因子、Laminin(-),生长扩增能力强,2周内经3代培养即可扩增到(5.57±0.34)×107细胞数量级;组织工程瓣组织学示活组织和细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)形成;扫描电镜见细胞贴附均匀,透射电镜可见分泌活性的肌纤维细胞样细胞(含actin/myosin纤维、胶原纤维、弹性蛋白);机械力学性能得到保留.结论:使用本方法可以构建成功组织工程心脏瓣膜;BMSCs与去细胞猪主动脉瓣的相容性良好,可以作为种子细胞之一. 欧阳辉 刘维永 陈文生 李悟 卫向阳 顾春虎 宿学家 郑奇军关键词:干细胞 种子细胞 腋下小切口行动脉导管未闭结扎术体会 2001年 王忠华 周仲毅 李悟 张贵斋 刘培良 孙兆亮 冯新海 周平 沈磊 王卫东关键词:腋下小切口 动脉导管未闭 结扎术 PDA 自体髂骨移植在原发性胸骨肿瘤胸廓重建的临床应用 被引量:1 2010年 周平 周仲毅 王忠华 袁源 李悟 王卫东关键词:胸骨肿瘤 骨移植 自体髂骨 去细胞猪主动脉瓣膜基质支架材料体外降解的初步观察 被引量:5 2006年 目的观察去细胞猪主动脉瓣膜基质支架材料的体外降解方式和过程。方法将制备好的去细胞猪主动脉瓣膜基质支架材料90片随机分为3组,胶原酶组、弹性蛋白酶组和水解对照组,每组30片,分别用0.05m g/m l胶原酶I、0.05m g/m l弹性蛋白酶和磷酸盐缓冲液(PBS)作为降解液在体外处理去细胞猪主动脉瓣膜。于处理后第3、6、9、12、15和30d从每组取出5个平行样本观察瓣膜组织形态学改变,测定降解失重率、降解液中蛋白含量、羟脯氨酸含量等指标。结果胶原酶组和弹性蛋白酶组去细胞瓣膜基质支架材料均随降解时间延长逐渐变得菲薄、韧性差、组织疏松、纤维网孔变大、断裂,降解液外观变浑浊,瓣膜失重率增加,降解液蛋白含量和羟脯氨酸含量增加(P<0.01);胶原酶组较弹性蛋白酶组对去细胞猪主动脉瓣膜基质支架材料的降解作用强。结论胶原酶和弹性蛋白酶对去细胞猪主动脉瓣膜基质支架材料均有降解作用,且前者的降解作用强于后者。 刘洋 刘维永 顾春虎 李悟 张近宝关键词:体外降解 细胞外基质