李志勇
- 作品数：77 被引量：94H指数：5
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学化学工程更多>>
- 细菌内同源重组法制备FMDV聚蛋白编码基因重组腺病毒被引量：5
- 2006年
- 采用PCR方法从重组质粒pMD18_T/PP中扩增出FMDV的聚蛋白(PP)编码基因,再亚克隆至腺病毒穿梭质粒中,形成重组穿梭质粒rpAd_CMV/PP;将获得的重组穿梭质粒与腺病毒骨架载体通过在大肠杆菌内质粒间同源重组获得重组腺病毒质粒rpAd/PP。将腺病毒载体线性化后用脂质体介导转染293细胞从而获得含有口蹄疫病毒PP编码基因的重组腺病毒。通过倒置显微镜观测,可见明显的细胞病变,利用荧光显微镜可观测到报告基因绿色荧光蛋白的表达,并在电镜下观察到FMDV的空衣壳。结果证明已成功获得了含有口蹄疫病毒PP编码基因的重组腺病毒rAd/PP,并成功表达组装FMDV空衣壳,为FMDV腺病毒活载体疫苗的研究奠定了基础。
- 张兴旺王勤柳纪省殷相平李志勇
- 关键词：FMDV编码基因同源重组重组腺病毒
- Asia I口蹄疫病毒组合基因P1-2A3C在不同家蚕品种中的表达(英文)被引量：1
- 2011年
- [目的]研究AsiaI口蹄疫病毒组合基因P1-2A3C在不同家蚕品种中的表达,以期筛选出较适合表达该组合基因的家蚕品种。[方法]将已经获得高效表达的重组家蚕杆状病毒rBmNPV(P1-2A3C)基因,分别注射原种及杂交家蚕蚕蛹。利用ELISA方法对其进行抗原表达量检测,并对表达结果进行差异比较。[结果]不同家蚕品种对rBmNPV(P1-2A3C)的表达存在着明显差异;秋丰×TQ78和秋丰×丝胶茧杂交组合可考虑作为高效表达的家蚕生物反应器专用品种。[结论]为AsiaIFMDV目的蛋白的高效表达专用品种的选育提供了依据。
- 张韵张金卫易咏竹李志勇李江涛鱼南洋丁农柳纪省
- 关键词：家蚕品种
- 一种制备狂犬病活载体疫苗的方法及其产品和用途
- 本发明公开了一种制备狂犬病活载体疫苗的方法及其产品和用途。所述方法包括如下步骤：一、设计引物，扩增出狂犬病病毒抗原蛋白G基因与细菌鞭毛蛋白FIjB或FIiC基因；二、将抗原蛋白G基因与FIjB或FIiC基因插入到复制缺陷...
- 殷相平肖星星张韵卫巧林李志勇柳纪省
- 文献传递
- 一种抗体检测用胶体金试纸条的制备方法及应用
- 本发明公开了一种抗体检测用胶体金试纸条的制备方法，包括以下步骤：制备免疫兔血清沉淀的IgG抗体的制控带；胶体金溶液的制备；金标抗体的制备；胶体金试纸条的制备。本发明的抗体检测用胶体金试纸条包括底板、样品垫、涂覆胶体金标记...
- 柳纪省王蒲张韵杨彬兰喜李志勇殷相平李学瑞李宝玉
- 文献传递
- 一种通用型的口蹄疫病毒结构蛋白抗体及其阻断ELISA检测试剂盒
- 本发明提供了通用型的口蹄疫病毒结构蛋白抗体及其阻断ELISA检测试剂盒，属于病毒检测技术领域。通用型口蹄疫病毒结构蛋白阻断ELISA抗体检测试剂盒，包括以下组成：包被抗原的酶标板、浓缩生物素标记单抗；浓缩生物素标记单抗中...
- 付元芳李坤卢曾军曹轶梅刘在新王省包慧芳李平花白兴文孙普马雪青张婧李志勇李冬陈应理
- 文献传递
- 表达狂犬病毒糖蛋白和核蛋白的重组腺病毒的生物学特性及免疫研究
- 将含有狂犬病毒G+N的重组穿梭质粒pAdTrack-CMV/G+N与腺病毒骨架载体pAdEasy-1在大肠杆菌细胞内同源重组,获得带有目的基因的重组腺病毒载体pAd/G+N。将重组腺病毒载体经PacⅠ酶切后转染HEK-2...
- 殷相平李志勇李学瑞李宝玉兰喜杨彬柳纪省
- 关键词：狂犬病毒重组腺病毒生物学特性免疫
- 文献传递
- 双表达的AAV重组病毒的制备方法
- 本发明公开了一种双表达的AAV重组病毒的制备方法，采用基因克隆技术将合成的特异性PRRSV RNA干扰寡核苷酸序列克隆至AAV Helper Free System中的表达质粒pAAV-U6-IRES-hrGFP的U6启...
- 柳纪省杨彬兰喜邱燕殷相平李学瑞李宝玉白银梅张韵李志勇方玉萍
- 文献传递
- AsiaⅠ/JQ株空衣壳疫苗对AsiaⅠ型FMDV两株不同毒株免疫效果的测定
- 本文利用家蚕杆状病毒表达系统表达了与FMDV空衣壳形成相关的P1-2A, 3C基因，并将获得的空衣壳抗原制备成空衣壳疫苗。在此基础上，按照OIE指定的半量保护率(PD50)测定方法进行疫苗的免疫效力实验，为空衣壳疫苗的最...
- 李志勇殷相平易咏竹张志芳柳纪省
- 关键词：疫苗免疫
- 文献传递
- 狂犬病病毒核蛋白的原核表达及纯化被引量：2
- 2009年
- 采用RT-PCR方法扩增出狂犬病病毒(RV)CVS株核蛋白(N)基因,并将目的基因亚克隆入原表达载体pET-28a(+)中,经PCR、双酶切以及序列分析,结果表明:已成功构建了重组质粒。将重组质粒转化至大肠埃希氏菌Rossetta(DE3),在37℃,1 mmol/LIPTG条件下进行诱导表达。诱导产物经SDS-PAGE分析,在分子量约为54 KD附近出现较粗的目的带,与预期的目的蛋白分子量相符合。经表达条件优化,用1 mmol/LIPTG在37℃诱导表达5h,表达量达到最高,Western-Blotting鉴定目的蛋白有较强的免疫原性。为狂犬病毒的N蛋白的新型疫苗的制备奠定了基础。
- 焦文强胡永浩殷相平李志勇柳纪省
- 关键词：狂犬病病毒核蛋白原核表达
- O型FMDV衣壳抗原的耐酸改造及其在昆虫细胞中的表达
- 为筛选与O型FMDV衣壳酸敏感性相关的位点,通过突变相关酸敏感性位点以提高衣壳蛋白在Bac-toBac杆状病毒表达系统中的表达量。本研究以牛源O型FMDV ON株为研究对象开展耐酸性毒株的筛选工作,筛选得到存在于Pl上的...
- 解银丽李志勇张志东赵付荣常惠芸张永光
- 关键词：O型口蹄疫病毒衣壳蛋白重组杆状病毒
- 文献传递
