李尚伟
- 作品数：3 被引量：17H指数：2
- 供职机构：四川大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技部专项基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 石斑鱼性反转相关基因ECaM的克隆及表达特征分析被引量：4
- 2005年
- 用甲睾酮片饲喂2～4龄赤点石斑鱼(Epinephelusakaara),6周后90%以上的雌鱼性逆转为功能性雄鱼. 运用抑制性差减杂交技术(SSH),结合SMART cDNA合成和RACE-PCR方法,从性反转雄鱼性腺中克隆到钙调蛋白基因(ECaM). 该基因cDNA全长为582 bp,开放阅读框长450 bp,编码的蛋白质由149个氨基酸组成,5'端非编码区74 bp,3'端非编码区58 bp. 虚拟RNA印迹表明,ECaM在性反转雄鱼性腺中表达,而在正常雌鱼性腺中表达微弱. 各种组织的半定量RT-PCR显示,ECaM在脑、心、肝、脾、肾都有转录,在精巢和下丘脑中表达水平较高,而在肌肉中表达甚弱. 性反转不同时期性腺的半定量RT-PCR及蛋白质印迹表明,性逆转过程中性腺里ECaM的表达量逐渐增加. 上述结果提示钙调蛋白可能在赤点石斑鱼性逆转过程中发挥着作用,ECaM可能是促使石斑鱼由雌向雄转变的重要功能基因之一.
- 李尚伟文建军刘世贵龙章富
- 关键词：石斑鱼钙调蛋白性腺性反转抑制性差减杂交
- 性逆转石斑鱼性腺差异表达基因的克隆鉴定及其表达研究
- 赤点石斑鱼(Epinephelus akaara)是名贵海水经济鱼类,雌雄同体,雌性先熟,存在天然性逆转现象.雌鱼一般在6龄性逆转为雄鱼,因而雌雄亲鱼性成熟不同步,导致受精率较低,制约着石斑鱼的人工大规模养殖.目前主要是...
- 李尚伟
- 关键词：石斑鱼性逆转抑制性差减杂交SOX9
- 性逆转石斑鱼性腺差异表达基因的克隆和筛选被引量：13
- 2004年
- 以 17α 甲基睾丸酮 (17α MT)饲喂 2～ 4龄赤点石斑鱼 (Epinephelusakaara) ,成功地促使其性转变为具有生殖功能的雄鱼 .应用抑制性差减杂交 (SSH)技术构建了石斑鱼性反转前后性腺组织的SMARTcDNA文库及其cDNA差减文库 ,从中随机挑取 12 0 0个克隆进行了PCR和斑点杂交筛选 ,得到 12 0个差异表达cDNA片段 .挑选 71个cDNA克隆测序 ,将所测序列经GenBank检索和生物信息学比较 ,发现有 5 1个cDNA片段序列无明显的同源性 ,2 0个片段与报道的基因有较高同源性 .在这 2 0个具同源性的片段中有 3个片段可能是与性别分化密切相关的重要功能基因 ,它们是钙调蛋白基因、活性蛋白激酶C受体基因和一氧化氮合酶蛋白抑制剂基因 .这 3个基因被分别命名为鱼钙调蛋白基因 (GenBankaccession :AY2 8136 3)、鱼活性蛋白激酶C受体基因 (GenBankaccession :AY2 8136 4)和鱼一氧化氮合酶蛋白抑制剂基因 (GenBankaccession :AY2 8136 5 ) .
- 李尚伟文建军庞岚刘世贵
- 关键词：性逆转石斑鱼性腺抑制性差减杂交基因克隆
