李凌
- 作品数：77 被引量：337H指数：10
- 供职机构：南方医科大学公共卫生学院三级生物安全实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广州市重大科技攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- HIV检测长寡核苷酸芯片的研制和临床初步应用
- 2005年
- 目的研制人类免疫缺陷病毒(HIV)快速筛查的寡核苷酸芯片并初步应用于临床。方法以HIV2个基因型(包括9个亚型)的32株典型性代表株和HIV2特有的vpx序列的保守序列为靶序列,设计长寡核苷酸探针,并制备成Oligo芯片。样品经随机特异性引物PCR标记后与芯片杂交,PCR产物同时进行测序分析。结果1例HIV患者芯片杂交结果阳性,20名健康对照血清均为阴性。阳性标本的序列分析表明,芯片杂交结果符合测序的分型结果。结论此芯片可初步用于检测血清HIVRNA,并对HIV基因(亚)型进行分析。
- 温颖马文丽李凌单桂秋吕品郑文岭
- 关键词：人类免疫缺陷病毒寡核苷酸芯片限制性显示技术
- As_2O_3处理前后K562细胞基因表达变化的基因芯片检测被引量：5
- 2002年
- 目的应用基因芯片研究三氧化二砷（As2O3）处理前后K562细胞基因表达的变化。方法提取As2O3处理前后K562细胞的总RNA,纯化为mRNA后再反转录为cDNA。cDNA经限制性内切酶Sau3AI切割后,cDNA片段分别用Cy3和Cy5标记,与自制的包含348个基因片段的胎盘库芯片杂交。结果杂交结果经扫描和软件分析,发现了11个差异表达的基因片段,其中有3个基因片段与细胞凋亡密切相关。结论 我们构建的胎盘库基因芯片可以成功地用于研究药物作用前后基因表达的变化。
- 冯春琼马文丽李凌宋艳斌石嵘吴清华郭秋野祝骥郑文岭
- 关键词：基因表达基因芯片基因芯片三氧化二砷K562细胞凋亡
- HPV病毒检测分型芯片的研制和优化
- 2009年
- 研制和优化寡核苷酸芯片以初步实现对多种常见HPV（Human papillomavirus）病毒的分型检测．应用生物学软件对四型常见HPV病毒（6、11、16、18型）的全基因组序列进行分析，设计具有型特异性、熔解温度（Tm）相近的-60mer寡核苷酸探针，对玻片片基进行优化处理后，点样制备成寡核苷酸基因芯片．将含HPV全长基因序列的质粒作为阳性标准品，利用梯度限制性荧光标记技术对其进行荧光标记，标记好的样品与芯片杂交．结果显示HPV样品与相应的型特异性探针杂交有明显的荧光信号，而与阴性对照探针和空白对照探针没有杂交信号．通过对芯片片基处理和样品荧光标记方法的优化，可以提高芯片检测的杂交特异性和荧光信号强度．
- 危敏马文丽孙朝晖张晋芳李凌郑文岭
- 关键词：寡核苷酸芯片
- 绿色荧光蛋白基因在脂肪细胞分化研究中的应用被引量：2
- 2005年
- 目的建立人脂肪细胞分化的绿色荧光蛋白活体检测动态模型,为进一步进行脂肪细胞分化及其相关基因表达研究奠定基础。方法用PCR法从培养的人前脂肪细胞总DNA中扩增出过氧化物体酶增殖物激活受体γ2(PPARγ2)基因启动子,将该启动子插入真核细胞表达载体pEGFP-1后转染3T3成纤维细胞及人前脂肪细胞,并诱导脂肪细胞分化。结果在胰岛素、地塞米松及3-异丁基-1-甲基黄嘌呤诱导下,人前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞时表达绿色荧光蛋白基因,而3T3细胞则不能诱导为脂肪细胞及表达绿色荧光蛋白基因。结论脂肪组织特异表达的PPARγ2基因启动子与绿色荧光蛋白基因构成的重组基因转化人前脂肪细胞后,能够用来动态活体检测脂肪细胞分化状态。这一模型的建立为脂肪细胞分化调控的分子机制研究提供一个更加方便的检测途径。
- 祝骥马文丽毛向明李凌吴清华郑文岭
- 关键词：脂肪细胞分化绿色荧光蛋白基因
- 骨唾液酸蛋白对Caspase介导的RAW264.7细胞凋亡的抑制作用被引量：6
- 2017年
- 目的:探讨骨唾液酸蛋白(BSP)对半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)介导破骨细胞前体RAW264.7凋亡中所起的作用。方法:培养破骨细胞前体RAW264.7,加信号通路相应抑制剂和(或)BSP处理后,用Caspase3/7/8/9检测试剂盒检测细胞Caspase3/7/8/9的活性,用Co-IP检测Caspase-8与整和素ανβ3是否存在相互作用。结果:BSP处理后RAW264.7细胞的Caspase-3/8/9活性下降,显著抑制了RAW264.7细胞的凋亡;而Caspase-8活性与Caspase-3活性存在正相关关系;且Caspase-8与整合素αvβ3存在相互作用。结论:BSP对RAW264.7细胞的抗凋亡作用主要通过调节外源性细胞凋亡途径来实现,并且由Caspase-8引起的细胞凋亡可因BSP与αvβ3的相互结合而抑制。
- 张彦石羽刘思念李奕韩超李凌
- 关键词：骨唾液酸蛋白RAW264.7CASPASE凋亡
- DNA芯片技术研究进展被引量：94
- 2000年
- DNA芯片技术是近年来发展迅速的生物高技术 .其基本过程是采用寡核苷酸原位合成或显微打印手段 ,将大量探针片段有序地固化于支持物如硅芯片的表面 ,然后与扩增、标记的生物样品杂交 ,通过对杂交信号的检测分析 ,即可得出样品的遗传信息 .该技术不仅可以对遗传信息进行定性、定量分析 ,而且扩展到基因组研究和基因诊断等方面的应用 .尽管目前在硬件和软件上还面临一些困难 ,但其发展和应用的前景广阔 .
- 李凌马文丽
- 关键词：DNA芯片基因诊断基因组研究
- 预防医学创新实验竞赛的实践与选题被引量：1
- 2017年
- 预防医学创新实验竞赛是广东省大学生预防医学技能大赛中的一项重要内容，参赛学生专业不限，以三人为小组，围绕公共卫生与预防医学热点及实际问题进行自主创新实验设计，根据实验设计书与答辩的两项得分确定奖项。第一、二届省赛获奖项目的选题以环境卫生与职业卫生类最多，最新传染病疫情备受关注；且运用实验与调研相结合的选题比重增加，竞赛选题更需注重创新观、人群观、调研观、自主观等。
- 叶明旭李楚楠韩超赵卫万成松李凌
- HIV基因芯片的初步研究被引量：6
- 2002年
- 目的建立HIV基因检测芯片的分析技术。方法分离HIV1U26942基因限制性显示片段作探针,应用PixSys 5500点样仪将探针打印在氨基包被的玻片上制作基因芯片。然后与随机引物荧光标记的HIV样品进行杂交,以分析限制性显示基因片段的杂交动力学。经杂交后清洗和干燥,扫描芯片进行检测。结果对基因检测芯片的制作与检测的实验条件进行了初步研究并筛选了12个限制性显示基因探针。结论建立的检测芯片的实验方法可行且较特异。
- 李凌马文丽毛向明祝骥郑文岭
- 关键词：基因芯片HIV感染
- 应用Agilent 2100 Bioanalyzer分析限制性显示技术制备的HIV片段库被引量：1
- 2005年
- 使用Agilent 2 10 0Bioanalyzer分析限制性显示技术 (restrictiondisplay ,RD)制备的HIV片段库 .利用合适的限制酶从质粒上获得HIVB亚型代表株U2 6 94 2全基因cDNA ,然后将目的片段进行Sau3AⅠ消化 ,在消化得到的片段两端加接头 ,利用通用引物进行PCR扩增 ,扩增结果通过琼脂糖凝胶电泳以及Agilent 2 10 0Bioanalyzer两种方法分析 .结果显示 ,Agilent 2 10 0Bioanalyzer比琼脂糖凝胶电泳能更快速、直接和客观地反映RD技术制备的DNA片段的大小以及含量 ,并能对RD PCR过程中片段自身连接以及优势扩增的现象进行直接的监控作用 .
- 刘佳马文丽李凌郑文岭
- 关键词：限制性显示技术AGILENT
- 八年制医学教育PCR教学模式的系统构建与实践被引量：4
- 2012年
- 为培养八年制医学教育的高层次人才,本研究将PBL/CBL/RBL三种教学法进行系统整合、构建PCR教学模式,并应用于两个年级八年制生物化学教学。以问卷调查评价教学效果。结果表明,该教学模式在学生的能力培养等方面具有显著优势,具有重要的示范意义及推广价值,可望如聚合酶链式反应(PCR)技术的作用一样将教学质量进行高效"扩增"放大。
- 李凌朱利娜张宝肖维威危敏马文丽
- 关键词：医学教育PCR教学模式
