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苋色藜NDR1基因抗病毒特性初步研究被引量：2: 2014年; 以抗病毒植物苋色藜为材料,克隆拟南芥NDR1的同源基因,确定其亚细胞定位及该基因表达和抗病毒特性分析,为转基因抗病育种奠定技术基础。根据苋色藜转录组测序分析结果,采用RT-PCR克隆获得两个与拟南芥同源的NDR1基因,分别命名为Ca NDR1a和Ca NDR1b,并通过实时定量PCR分析病毒侵染后基因的表达情况;构建植物瞬时表达载体,发现Ca NDR1a和Ca NDR1b定位于细胞膜;构建Ca NDR1a和Ca NDR1b植物表达载体,遗传转化获得转基因烟草,经酶联免疫吸附测定(ELISA)分析T1代植株对烟草花叶病毒(TMV)和黄瓜花叶病毒(CMV)的抗性。生物信息学分析揭示Ca NDR1a和Ca NDR1b是NDR1的同源基因。Ca NDR1a和Ca NDR1b在苋色藜接种TMV和CMV后显著上调表达。Ca NDR1a和Ca NDR1b定位于细胞膜上,并且病毒对Ca NDR1a和Ca NDR1b的胞内定位没有影响。ELISA结果显示部分转基因株系对TMV和CMV的抗性增加。初步表明Ca NDR1a和Ca NDR1b是拟南芥NDR1的功能性同源基因,参与植物对病毒的内源免疫反应。; 龚前园张超吴华年李为民张永强; 关键词：转基因烟草烟草花叶病毒黄瓜花叶病毒

海岛棉GbRar1和GbSgt1基因的过量表达提高烟草离体叶片对赤星病的抗性被引量：10: 2004年; RAR1和SGT1是两个植物抗病蛋白(R)防卫反应的信号元件,在R蛋白下游和活性氧产生之间发挥作用.利用简并引物PCR及3′RACE等技术,克隆了海岛棉GbRAR1和GbSGT1的编码基因.Northern blot表明,海岛棉GbRar1和GbSgt1基因在转录水平上受棉花黄萎病菌的诱导,诱导后mRNA表达量显著增加.构建组成型植物表达载体pRar和pSgt,分别转化烟草品种NC89.离体叶片抗病性鉴定表明,两类转基因烟草对赤星病的抗性明显提高,为植物防卫反应信号元件RAR1和SGT1在广谱抗病基因工程中的应用提供了实验证据.; 李为民王志兴张永强贾士荣; 关键词：海岛棉转基因烟草赤星病抗病性

编码海岛棉防卫反应基因的核苷酸序列、含有该序列的植物表达载体及植物细胞: 本发明分离获得了海岛棉防卫反应调控基因GbRar1、GbSgt1和GbRac1，分别构建了三个组成型表达的植物表达载体，通过根瘤农杆菌法转化烟草，在烟草中过量表达这三种防卫调控基因，使转基因烟草对烟草赤星病抗病能力显著提...; 贾士荣李为民王志兴; 文献传递

苋色藜抗病性相关基因ChaNDR1a及其制备方法和应用: 本发明属于基因工程领域，公开了一种苋色藜抗病性相关蛋白ChaNDR1a，其具有序列2所示的氨基酸序列。同时，本发明还公开了编码上述蛋白的DNA分子、含有上述DNA分子的重组表达载体以及表达上述DNA分子的宿主细胞。此外，...; 张永强李为民张超龚前园; 文献传递

光诱导表达Gacab启动子及不同区段的表达功能: 本发明分离获得了金华中棉捕光叶绿素a/b蛋白复合体基因Gacab编码区5′上游的表达调控序列1009bp(SEQ ID NO：1)。对该表达调控序列及不同区段的系统分析发现，其中-199bp~-1bp为Gacab基因的基...; 贾士荣李为民王志兴; 文献传递

黄瓜细菌性角斑病菌交叉引物恒温扩增检测技术被引量：3: 2017年; 黄瓜细菌性角斑病是我国黄瓜生产上的重要病害之一,其病原菌为Pseudomonas syringae pv.lachrymans。根据该病原菌甘油醛-3-磷酸脱氢基因保守序列设计引物和探针,建立了交叉引物恒温扩增和核酸试纸条检测技术。菌体DNA检测灵敏度可达0.55 ng,纯菌直接检测灵敏度基本可达到单个细菌。所测试的5株黄瓜细菌性角斑病菌和染病黄瓜叶片均为阳性,其他13株对照菌株均为阴性。该方法灵敏度高,且操作简单,对设备要求低等,适合基层实验室应用。; 霍亚云张永江李为民朱罗罗胡林尤其敏赵文军

海岛棉Rar1、Sgt1、Rac1、KTN1基因及中棉cab基因启动子的克隆和功能分析: 棉花是一种重要的经济作物,在国民经济中具有重要作用.当前中国棉花生产中存在两个关键问题:一是棉花黄萎病危害严重,二是棉纤维品质需进一步改良.针对以上问题,该论文从基因的角度进行了以下三部分研究:(1)海岛棉(Gossyp...; 李为民; 关键词：植物基因工程

介导植物病毒病症状发生的病毒元件与寄主因子被引量：3: 2014年; 植物遭受病毒侵染后,常表现出花叶、发育畸形、褪绿、坏死等症状。在农业生产中,这些症状的发生直接导致作物的产量/品质下降,有些造成严重的经济损失。因而,病毒病症状发生的分子机制长期以来一直为人们所关注。结合近年来国内外最新的研究报道,分别从病毒和寄主两个方面,总结归纳了介导症状发生的病毒元件以及参与症状发生的寄主因子,并在此基础上分析讨论了病毒病症状发生的分子机制。; 张超龚前园张永强李为民; 关键词：植物病毒症状发生

海岛棉GbKTN1对酵母细胞伸长的影响被引量：2: 2003年; 用5’RACE/3’RACE从海岛棉(Gossypium barbadense)开花后10 d的纤维细胞中分离获得了GbKTNl cDNA序列,全长2006 bp,包括113 bp的5’非翻译区、1563 bp的可读框及327 bp的3’非翻译区(不包括终止密码子TAA)。可读框编码521个氨基酸,蛋白质分子量约为55 kD,靠近GbKTNl C末端的233～414氨基酸残基间包含一个ATP结合功能区。Southern杂交证明,GbKTNl在海岛棉基因组中以单拷贝形式存在。半定量RT-PCR结合Southern杂交分析表明,GbKTNl在海岛棉根、茎、叶及纤维细胞中均有表达,以纤维细胞中的表达最高,叶中最低。利用裂殖酵母系统,初步分析了GbKTNl对细胞伸长的功能,发现该基因在酵母细胞中诱导表达后使细胞显著伸长,平均为诱导前的2.18倍,部分细胞呈不规则形状,这是首次在活体(in vivo)中证明KTN1与细胞的伸长有关。; 李为民王志兴贾士荣; 关键词：海岛棉基因表达细胞伸长氨基酸棉纤维

国家自然科学基金加强资助植物分类学策略成效分析: 2016年; 国家自然科学基金委员会生命科学部于2002年起设立"经典分类倾斜项目",提出了新的经典分类资助策略。本文通过全面比较1986—2001和2002—2015年间植物分类学领域资助项目的数量和经费额度、项目负责人的构成特点以及资助项目的研究内容,概括性地总结了倾斜策略实施以来结题项目所取得的主要研究成果,从多角度评价了分类倾斜策略的实施成效。; 山红艳王文国李为民温明章杜全生; 关键词：国家自然科学基金植物分类

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李为民