朱培培
- 作品数：8 被引量：8H指数：2
- 供职机构：南通大学医学院人体解剖学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目江苏高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Lhx8基因沉默抑制NGF诱导的海马NSCs向胆碱能神经元分化的研究被引量：1
- 2014年
- 目的:明确Lhx8在神经生长因子(nerve growth factors,NGF)促进海马神经干细胞向胆碱能神经元分化中的作用。方法:体外培养海马神经干细胞并应用NGF促进其向胆碱能神经元分化的过程中,将构建的Lhx8干扰慢病毒加入至培养液中,7 d后应用免疫荧光标记技术检测分化所得胆碱乙酰转移酶(choline acetyltransferase,Ch AT)和微管相关蛋白-2(microtubule-associated protein 2,MAP-2)双标阳性细胞。结果:在空白对照组中,仅检测到少量的Ch AT/MAP-2双标阳性细胞;在NGF组或是NGF联合阴性对照慢病毒组中则可检测到较多的Ch AT/MAP-2双标阳性细胞;在加入Lhx8干扰慢病毒的实验组中,分化所得的Ch AT/MAP-2双标阳性细胞数较NGF组或是NGF联合阴性慢病毒组明显减少。结论:Lhx8基因沉默抑制了NGF诱导的海马神经干细胞向胆碱能神经元的分化。
- 李浩明金国华朱培培施金洪邹琳清张新化田美玲衣昕秦建兵成翔
- 关键词：基因沉默神经生长因子神经干细胞胆碱能神经元海马
- 神经生长因子促进海马胆碱能神经再生过程中Lhx8的动态表达被引量：2
- 2014年
- 目的探讨神经生长因子(NGF)促进海马胆碱能神经再生与同源盒基因Lhx8之间的关系。方法SD大鼠72只,在制备切割右侧穹隆海马伞模型和NGF侧脑室注射的基础上,分为对照组、切割组、NGF组、切割联合NGF组;Real-time PCR和Western blotting分别检测各组动物海马中Lhx8蛋白的表达变化;免疫荧光技术检测各组动物海马齿状回颗粒下层中胆碱乙酰转移酶(ChAT)/Lhx8双标细胞数。结果切割组和NGF组中Lhx8蛋白的表达量较对照组增高,切割联合NGF组增高更为明显,且Lhx8基因表达也增高;NGF组和切割联合NGF组中海马齿状回颗粒下层(SGZ)中的ChAT/Lhx8双标细胞数也较对照组和切割组明显增多。结论侧脑室注射NGF促进海马胆碱能神经再生与Lhx8的高表达有关。
- 李浩明朱培培金国华施金洪邹琳清田美玲衣昕秦建兵
- 关键词：海马神经生长因子胆碱能神经实时定量聚合酶链反应
- 体外模拟海马神经再生微环境下的NSCs增殖和向神经元分化
- 2012年
- 目的:探讨用切割穹窿海马伞海马提取液在体外模拟体内海马神经再生微环境下,对海马神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖和向神经元分化的影响。方法:分别制备正常侧和切割穹窿海马伞侧海马提取液。实验分为对照组、正常组和切割组,分别在海马NSCs中加入DMEM/F12培养基、含正常侧海马提取液及切割侧海马提取液的DMEM/F12培养基。用WST-8和Ki67/Sox2免疫荧光检测NSCs的增殖,用DCX免疫荧光检测NSCs向神经元的分化情况。结果:切割组与正常组及对照组相比,WST-8检测OD450比值明显增高(P<0.05);Ki67阳性细胞和Sox2阳性细胞的比例均明显增高(P<0.001)。结论:用切割穹窿海马伞侧海马提取液在体外模拟海马神经再生微环境,可以促进海马NSCs的增殖和向神经元的分化。
- 秦建兵金国华朱培培李浩明田美玲杨伟伟
- 关键词：神经干细胞
- NGF促进海马神经再生过程中Brn-4、Lhx8的表达变化
- 目的：探讨NGF促进海马神经再生、神经干细胞向神经元和胆碱能神经元分化过程中,POU同源盒基因Brn-4和LIM同源盒基因Lhx8的表达变化,以及海马新生神经元过表达Lhx8后向胆碱能神经元分化的情况。 方法： 实验一：...
- 朱培培
- 关键词：神经生长因子海马神经再生神经元胆碱能神经元
- 文献传递
- Lhx8促进海马神经干细胞向胆碱能神经元分化被引量：1
- 2013年
- 目的构建大鼠Lhx8全长结构基因真核表达载体。方法 PCR法扩增Lhx8全长结构基因,经EcoRI和BamHI双酶切后连接至真核表达载体pEGFP-C3中,重组质粒pEGFP-C3-Lhx8经测序鉴定后,采用脂质体转染的方法转染至体外培养的海马神经干细胞中。结果测序鉴定表明,重组质粒pEGFP-C3-Lhx8-EGFP构建成功,该重组质粒转入体外培养的神经干细胞后,质粒转染组中ChAT阳性的细胞数较阴性对照组明显增多(P<0.05)。结论重组质粒pEGFP-C3-Lhx8-EGFP构建成功,Lhx8能够促进NSCs向ChAT阳性的细胞分化。
- 田美玲朱培培金国华李浩明秦建兵施金洪
- 关键词：神经干细胞海马基因表达聚合酶链反应
- 激活的星形胶质细胞分泌聚集素蛋白及其对海马神经干细胞向神经元分化的促进作用被引量：4
- 2013年
- 目的探讨切割穹隆海马伞的侧海马提取液"激活"的星形胶质细胞分泌聚集素蛋白(CLU)及体外CLU诱导海马神经干细胞分化为神经元的情况。方法分别用切割穹隆海马伞的海马提取液、正常海马提取液、DMEM/F12培养基培养星形胶质细胞,制备切割12h、24h、48h组,正常组和对照组条件培养基;ELISA检测比较不同条件培养基中CLU蛋白的浓度;体外细胞培养采用CLU诱导海马神经干细胞分化,设诱导组和空白对照组,7d后通过微管相关蛋白2(MAP-2)免疫荧光及Hoechst标记观察海马神经干细胞向神经元的分化情况。结果正常组和对照组条件培养基中CLU浓度较低,约为(0.1037±0.0119)ng/L和(0.1170±0.0078)ng/L;切割组12h、24h、48h条件培养基中其浓度明显增高,分别为(0.1940±0.0364)ng/L、(0.4250±0.0724)ng/L和(0.2903±0.0472)ng/L,以24h组最高,约为正常组和对照组的4倍。CLU诱导组中MAP-2阳性细胞数明显高于空白对照组(P<0.05),其占总细胞数的百分比分别为(11.67±2.57)%和(4.52±1.54)%,且诱导组中MAP-2阳性细胞突起更长、更丰富。结论切割穹隆海马伞侧海马提取液"激活"的星形胶质细胞可分泌更多的CLU,体外细胞培养中CLU可促进海马神经干细胞向成熟的神经元分化。
- 邹琳清金国华李浩明秦建兵田美玲朱培培王海琴
- 关键词：星形胶质细胞海马神经干细胞神经元免疫荧光
- 穹隆海马伞切割后大鼠海马内RUNX1T1 mRNA和蛋白的表达变化被引量：1
- 2013年
- 目的观察穹隆海马伞切割后不同时间点海马内RUNX1T1 mRNA和蛋白的表达变化及定位。方法行穹隆海马伞切割术,制备模型大鼠。实验分为正常组、切割3d组、切割7d组、切割14d组、切割21d组、切割28d组。1.提取海马组织总mRNA,用Real-time PCR检测大鼠海马组织中RUNX1T1mRNA的表达;2.提取海马组织总蛋白,用Western blotting检测海马内RUNX1T1蛋白的表达;3.行脑冷冻切片,行RUNX1T1免疫荧光检测和Hoechst标记,观察海马齿状回中RUNX1T1/Hoechst双标阳性细胞。结果 Real-time PCR检测显示,切割3d组海马组织中RUNX1T1 mRNA的表达明显上调,其余各组差异不明显;Western blotting检测结果显示,正常组海马中有微量RUNX1T1蛋白表达,而切割3d组海马组织中RUNX1T1蛋白表达量明显上升,并达到高峰,7d时仍有较多的表达,此后,14d、21d、28d组中RUNX1T1蛋白表达很快又恢复到正常水平;免疫荧光检测结果表明,正常组海马齿状回中有少量的RUNX1T1/Hoechst阳性细胞,切割3d组海马齿状回中RUNX1T1/Hoechst阳性细胞数量最多,切割7d组逐渐减少,切割14d组、21d组和28d组与正常组差别不明显。结论穹隆海马伞切割后海马内RUNX1T1mRNA和蛋白表达在早期呈短暂性上调,并定位于海马齿状回颗粒下层,推测可能与海马神经再生过程中神经干细胞向神经元分化有关。
- 邹琳清金国华王海琴李浩明朱培培秦建兵
- 关键词：海马神经再生免疫荧光
- 切割穹窿海马伞后海马齿状回内Lhx8的表达变化及其对RGCs向胆碱能神经元分化的影响
- 2014年
- 目的:明确Lhx8在SD大鼠切割穹窿海马伞后海马齿状回颗粒下层和门区中的表达变化。方法:切割SD大鼠穹窿海马伞,成功制备海马去神经支配动物模型后,通过Western Blot的方法检测切割后第1、3、7、14、21、28 d海马中Lhx8蛋白的表达变化;通过免疫组织化学方法检测切割后第7天海马齿状回颗粒下层和门区中Lhx8阳性细胞的表达定位,并通过免疫荧光化学方法检测Lhx8/ChAT双标阳性细胞的共定位情况;切割SD大鼠穹窿海马伞并制备海马提取液,将其加入至细胞培养液中,模拟体内海马神经再生微环境,检测培养的海马放射状胶质细胞(radial slia cells,RGCs)向胆碱能神经元分化的情况。结果:切割穹窿海马伞后第7 d,Lhx8蛋白表达量较其他各时相点明显增高;海马齿状回颗粒下层和门区中Lhx8阳性细胞数目和光密度也明显高于正常侧,Lhx8/ChAT双标阳性细胞数目也较正常侧增多;体外细胞培养,切割穹窿海马伞侧海马提取液也较正常侧海马提取液更能促进海马放射状胶质细胞向胆碱能神经元的分化。结论:切割穹窿海马伞后,Lhx8表达明显上调,与海马齿状回的胆碱能神经再生有关。
- 田美玲李浩明金国华朱培培施金洪邹琳清秦建兵
- 关键词：胆碱能神经元海马
