曹康
- 作品数:35 被引量:86H指数:6
- 供职机构:成都医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金四川省卫生厅科研基金四川省教育厅青年基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学生物学更多>>
- 一种用于扩增HSV-1碱性核酸酶基因的试剂盒和表达HSV-1碱性核酸酶的方法
- 本发明提供了一种用于扩增单纯疱疹病毒I型碱性核酸酶基因片段UL12的试剂盒,包括核苷酸序列如SEQ ID NO:1~2所示的引物对和其他相关试剂。本发明还提供一种利用前述试剂盒获得具有生物活性的HSV-1碱性核酸酶的方法...
- 陈恬张磊曹康郭洪秀代富英
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- 一种细菌质粒抽提的前处理试剂盒以及方法
- 本发明涉及一种本发明细菌质粒抽提的前处理试剂盒,它包括如下组分:A组分:100~200mg/ml溶菌酶;B组分:洗涤液;所述A组分为100mg/ml溶菌酶。本发明还公开了细菌质粒抽提的前处理方法。本发明还提供了一种细菌质...
- 潘渠姚芳许晓羽杜昕曹康
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- 一种福菜乳杆菌新亚种
- 本发明提供了一种福菜乳杆菌新亚种,它是由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏的保藏号:CGMCC NO:13425的福菜乳杆菌重庆亚种CQ16Z1(Lactobacillus futsaii Subsp.cho...
- 潘渠杜昕姚芳许晓羽曹康
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- 大肠杆菌菌株对HSV-1重组碱性核酸酶原核表达的影响
- 目的:构建HSV-1的UL12基因原核重组表达质粒pET32a-UL12,比较重组表达质粒pET32a-UL12在E.coli BL21和E.coli Rosetta表达产量与生物学活性.方法:使用PCR的方法扩增出HS...
- 陈恬曹康
- 迷迭香酸在制备抑制水痘-带状疱疹病毒的药物中的用途
- 本发明提供了迷迭香酸在制备抑制水痘‑带状疱疹病毒的药物中的用途。本发明迷迭香酸对VZV有显著的抑制作用,可用于制备抑制水痘‑带状疱疹病毒(VZV)的药物,也可以用于制备治疗水痘‑带状疱疹病毒所致感染性疾病的药物,所述疾病...
- 陈恬李祖锐任科曹康张倩孙宇豪
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- 2种纯化流感病毒方法的比较研究被引量:16
- 2005年
- 目的比较2种纯化浓缩鸡胚尿囊液中流感病毒方法。方法将流感病毒鸡胚尿囊液分别采用蔗糖密度梯度离心法(sucrose density gradient centrifugation,SDGC)和红细胞吸附释放法(absorptionandrelease RBC,AR RBC)进行纯化,收集纯化病毒测定血凝效价,比较2种纯化方法。结果SDGC法纯化病毒可在30%和45%蔗糖层面交界处的区带中检测到流感病毒,血凝效价为1∶2560;用AR RBC法纯化病毒过程中用新鲜鸡红细胞出现了溶血现象,而用甲醛处理过的鸡红细胞则无此现象,血凝效价均为1∶2560。结论与SDGC法纯化病毒比较,AR RBC法是一种经济实用、操作简便并有较高纯化效率的方法,尤以甲醛处理过的鸡红细胞纯化效果最好。
- 曹康张卫东施桥发李虹蒋中华李明远
- 关键词:鸡胚
- HPV16E7蛋白编码基因原核表达与鉴定被引量:2
- 2006年
- 目的研究HPV16E7蛋白的生物学特性及其细胞转化机制,对HPV16E7蛋白原核表达质粒进行构建、表达和鉴定。方法以临床确诊的HPV16感染患者子宫颈细胞DNA为模板,采用PCR方法扩增HPV16E7基因,经BamH和Hind双酶切后插入相同酶切pET32a(+)载体,转化JM109感受态细胞,并进行阳性克隆筛选。经IPTG对重组质粒进行蛋白诱导表达,SDS-PAGE和Westernblot检测目标蛋白表达情况。结果成功构建了原核表达质粒pET32/E7,HPV16E7-TRX融合蛋白在BL21(DE3)菌株中高效表达,在1mmol/LIPTG、30℃诱导条件下融合蛋白表达量占菌体总蛋白的30%左右。结论pET32/E7原核表达质粒的构建、HPV16E7融合蛋白的表达为进一步深入研究HPV16E7蛋白的生物学特性及其致细胞转化的作用机制奠定了基础。
- 施桥发王保宁李虹魏晓丽张卫东曹康蒋忠华李明远
- 关键词:HPV16免疫印迹
- P物质融合毒素的质粒构建及其原核表达被引量:1
- 2018年
- 目的构建pET-CTR-PS重组原核表达质粒,原核表达Cholix Toxin的毒性部位和P物质的融合蛋白,为探讨该融合蛋白对肿瘤细胞的靶向杀伤作用奠定基础。方法用PCR方法扩增Cholix Toxin的催化活性部分CTR,扩增后连入T载体构建T-CTR质粒。人工合成P物质双链寡核苷酸,将其插入pET32a中得到重组质粒pET-PS。将T-CTR和pET-PS分别经EcoRI和SacI双酶切后相接,构建得到重组质粒pET-CTR-PS。将测序正确的pET-CTR-PS重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),表达融合蛋白,用12%SDS-PAGE和Western-blot方法鉴定重组蛋白CTR-PS的表达。结果测序表明,CTR-PS序列与预期一致。SDS-PAGE结果表明,重组蛋白在18℃经0.02mmol/L IPTG诱导20h后,获得高效表达,Western-blot鉴定正确。结论本研究成功构建了pETCTR-PS原核表达重组子,并获得了可溶性高表达。
- 朱晓霞张露萍叶亚婷严蓉蓉代吕霞曹康
- 关键词:原核表达融合蛋白大肠杆菌质粒构建
- 人凋亡相关新基因PNAS-4的克隆、原核表达与纯化
- 2012年
- 目的克隆人的凋亡相关新基因PNAS-4到原核表达载体,表达并纯化人的PNAS-4蛋白。方法用RT-PCR的方法从人肺腺癌A549细胞中扩增出人的PNAS-4基因。将其克隆到pGEX-6P-1载体,转化到大肠杆菌BL21。用IPTG诱导表达,并用亲和层析的方法纯化出人的PNAS-4蛋白;然后使用质谱分析鉴定纯化后的蛋白质。结果扩增出的人PNAS-4基因与GenBank上的序列完全一致。纯化的人PNAS-4融合蛋白在相对分子质量约50×103处可见特异性条带;经质谱鉴定证实所纯化的蛋白质为PNAS-4融合蛋白。结论成功表达和纯化了人PNAS-4蛋白,为今后对人PNAS-4基因的功能研究打下基础。
- 曹康林超戴谦李磊雷庭钧谢意汤明海袁铸
- 关键词:蛋白表达纯化
- 流感病毒血凝素HA1基因克隆及其真核表达
- 感病毒是最常见的呼吸道致病因子,每次流感大流行的时候都有很多人死亡,例如在1918年的流感大流行就有2000万人死于流感。流感病毒常见的宿主有人、猪、马和禽类,并可以在不同宿主之间交叉传播,如1997年香港的流感病毒就是...
- 曹康
- 关键词:流感病毒血凝素PCDNA3.1(+)病毒纯化真核表达
- 文献传递