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家蚕质多角体病毒RDRP的免疫电镜定位研究被引量：2: 2005年; 以原核表达BmCPV RDRP重组蛋白为抗原制备的兔抗血清为一抗,直径15nm山羊抗兔IgG 胶体金为二抗。应用3%多聚甲醛 0 1%戊二醛混和固定液、K4M低温包埋剂和紫外光聚合制备的样品进行免疫电镜观察,结果感染BmCPV(C)病蚕的中肠柱状细胞中,游离和病毒多角体中BmCPV的病毒粒子均能结合胶体金颗粒,平均标记率为25%左右,认为BmCPV(C) RDRP基因编码的蛋白应为BmCPV病毒的结构蛋白,位于病毒的衣壳上。其中一抗的使用浓度为1∶200,二抗的使用浓度为1∶40,可以获得较好的免疫标记效果和较少的非特异性标记。; 孙京臣谭玉蓉戴伟君张勤奋徐兴耀张景强; 关键词：免疫电镜免疫标记标记率兔IGG 多角体病毒

登革2型病毒的分离纯化及其核衣壳蛋白的表达: 应用冷冻电镜计算机三维重构技术研究病毒的三维结构,首要的任务是:获得足够高的数量和纯度、保持原来结构的病毒颗粒.该研究通过选取登革2型病毒(Dengue virus 2 type,Den-2)的敏感细胞株白纹伊蚊C6/3...; 戴伟君; 关键词：登革2型病毒纯化 C蛋白; 文献传递

家蚕质型多角体病毒RDRP基因的序列测定及同源性分析被引量：2: 2005年; 应用分段RTPCR方法和分子克隆技术从家蚕质型多角体病毒(Bombyxmoricytoplasmicpolyhedrosisvirus,BmCPV)中国株的dsRNA中成功地分3段克隆了RDRP基因(RNAdependentRNApolymerase),大小分别为1442、827、1675bp,进行了基因全序列拼接,获得37kb的全长RDRP基因(GenBank序列号为AY496445)。通过在线blast分析,与BmCPV1、DpCPV1、LdCPV1、LdCPV14、TnCPV15核苷酸同源性分别为89%、81%、81%、541%和509%,氨基酸同源性分别为965%、931%、929%、411%和335%。根据核苷酸同源性与氨基酸同源性构建的进化树具有较好的一致性。通过ClustalX软件分析,定位了该病毒RDRP基因的3个保守区域(酸性区,核苷酸结合的核心区和催化功能核心区)。; 孙京臣杨艺峰戴伟君谭玉蓉张勤奋张景强徐兴耀; 关键词：家蚕质型多角体病毒 DSRNA 同源性

嗜水气单胞菌外膜蛋白基因ompTS的高效表达及其免疫原性被引量：21: 2002年; 根据嗜水气单胞菌外膜蛋白基因ompTS的核苷酸序列设计引物 ,运用聚合酶链式反应 (PCR)扩增出与预期大小相符的基因片段。将此基因片段克隆至质粒pRSETA的BamHI和EcoRI位点 ,构建重组质粒 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,经IPTG诱导获得高效表达 ,SDS PAGE蛋白电泳表明在 39 9kD处出现超强特异带 ,占总蛋白的5 1%。以Ni NTA Conjugate抗体进行Westernblot分析证明该 39 9kD的蛋白为所表达的融合蛋白。纯化融合蛋白注射雄性新西兰大白兔可诱导产生特异抗体。ELISA和Westernblot检测结果显示 ,该抗体与表达的融合蛋白和从嗜水气单胞菌中提取的 36 9kD外膜蛋白均呈阳性反应 ,表明所表达的融合蛋白仍保持原有外膜蛋白的免疫原性。; 谢俊锋叶巧真何建国戴伟君黄晓何鸣筱陈诚; 关键词：嗜水气单胞菌基因表达免疫原性水产动物疫苗

新颖的NGR234Ⅲ型效应因子-NopT，宿主特异性促进或阻碍共生固氮: 宿主植物和固氮细菌(nitrogen-fixing bacteria，rhizobia)之间建立的共生关系依赖细菌的Ⅲ型分泌系统(Type three secretion system，T3SS)分泌的Ⅲ型效应因子(T3...; 戴伟君; 关键词：蛋白酶共生固氮; 文献传递

家蚕质多角体病毒中国株RNA聚合酶基因序列测定、表达及定位: 应用分段RT-PCR 的方法从家蚕质多角体病毒（Bombyx mori cytoplasmic Polyhedrosis Virus,BmCPV）中国株的dsRNA 中成功地克隆了RDRP 基因（RNA-dependen...; 孙京臣戴伟君谭佩婵谭玉蓉张景强徐兴耀; 关键词：免疫电镜; 文献传递

家蚕质型多角体病毒RNA聚合酶的基因克隆及鉴定被引量：3: 2004年; 孙京君戴伟君谭佩婵谭玉蓉张勤奋张景强徐兴耀; 关键词：质型多角体病毒家蚕 CPV 呼肠孤病毒科基因克隆 RNA聚合酶

家蚕质多角体病毒片段IV的全序列测定被引量：2: 2003年; 在随机引物建库的基础上 ,通过交叉设计引物及加单链DNA接头 ,应用RT PCR技术克隆了家蚕质多角体病毒dsRNA片段Ⅳ的全长cDNA ,并测定了它的全序列。该片段长 3,2 6 2bp ,含有一个完整的开放读码框 ,编码一个长 1 ,0 5 8氨基酸的成熟多肽。序列分析表明 ,该片段与日本BmCPV片段Ⅳ的核苷酸序列同源性为 89% ,氨基酸序列同源性为 95 %。; 林伟杨文利徐安龙梁玉尧陈森雄戴伟君张景强; 关键词：双链RNA RT-PCR

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戴伟君