徐颖
- 作品数:50 被引量:43H指数:4
- 供职机构:复旦大学更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学经济管理理学更多>>
- 一种促凋亡重组卡介苗及其制备方法
- 本发明属于遗传工程和结核病疫苗研究技术领域,具体为一种促凋亡重组卡介苗及其制备方法。其通过在大肠杆菌—分枝杆菌穿梭质粒pMV261中依次插入结核保护性抗原Ag85B的信号肽ASP和促细胞凋亡基因BAX先得到重组质粒<...
- 王洪海李光华徐颖刘国元宋娜孔聪黄琪
- 文献传递
- 一种结核杆菌重组卡介苗
- 本发明属医药技术领域,具体为一种新型的结核杆菌重组卡介苗。该重组卡介苗为rBCG-Ag85B-Mpt64<Sub>190-198</Sub>-Mtb8.4。其制备过程包括构建重组基因rBCG-Ag85B-Mpt64<Su...
- 王洪海郄亚卿王九玲祝秉东徐颖王庆忠陈嘉臻
- 文献传递
- 结核分枝杆菌新型抗原Rv3400的免疫原性研究被引量:4
- 2016年
- 目的用结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)特异性抗原Rv3400联合弗氏不完全佐剂(incom-pleteFreund’s adjuvant,IFA)构建结核亚单位疫苗(Rv3400-IFA),在C57BL/6小鼠体内评估其免疫效应。体外用抗原Rv3400感染巨噬细胞RAW264.7并评估其免疫应答。方法PCR扩增基因Rv3400,构建重组质粒pET28a(+)-Rv3400,转人大肠埃希菌BL21(DE3)pLysS感受态细胞中,诱导表达并纯化Rv3400蛋白。用抗原Rv3400、阳性对照脂多糖(1ipop01ysaccharides,LPS),分别刺激小鼠巨噬细胞RAw264.7,阴性对照为未刺激的巨噬细胞,流式细胞术检测细胞表面分子表达,收集细胞培养上清,ELISA检测细胞因子的分泌。另一方面纯化的Rv3400蛋白与IFA充分乳化构建亚单位疫苗免疫小鼠;C57BL/6小鼠采用数字表法随机分为3组,分别为实验组Rv3400组、阳性对照组Rv3425组、阴性对照组IFA组,每组5只,每2周1次、共免疫3次。分别采用酶联免疫斑点检测技术(enzyme-linkedimmunospotassay,ELISPOT)和酶联免疫吸附测定(ELISA)技术对免疫小鼠的细胞免疫和体液免疫进行评估。结果(1)成功克隆表达并纯化结核分枝杆菌特异性抗原Rv3400。(2)体外细胞实验结果显示:Rv3400抗原刺激巨噬细胞,其表面分子CD80、CD86、CD40、MHCII表达量显著提高,阳性细胞比率[分别由未刺激的(34.70±2.40)%、(31.25±18.31)%、(41.80±6.01)%、(44.30±0.44)%提高至1μg/mlRv3400抗原刺激后的(90.45±7.71)%、(90.10±4.10)%、(89.97±7.79)%、(85.13±5.12)%];能促进细胞分泌高水平的肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor-a,TNF-a)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),分别达(49217.0±390.61)pg/ml、(1783.4±51.18)pg/ml。(3)免疫小鼠后,ELISPOT结果显示:实验组Rv3400组小鼠分泌INF-7的斑点形成细胞(spotfo
- 朱琳徐颖孔聪粟海波黄琪朱胜玲王洪海
- 关键词:分枝杆菌结核亚单位疫苗细胞免疫体液免疫
- 动态死亡率下寿险产品的定价风险分析
- 合理的产品定价技术是保险公司管理与控制风险的基础。在定价过程中,如何估计未来死亡率的变化是非常关键的环节。近年来,由于社会经济水平的整体提高,我国人口死亡率整体呈现逐年下降的趋势,而时间变动带来的不确定性却未能在寿险产品...
- 徐颖
- 关键词:死亡率寿险产品精算定价风险管理
- 文献传递
- hsa_circ_0007460通过调节巨噬细胞的自噬和凋亡影响细胞内结核分枝杆菌的存活被引量:1
- 2023年
- 环状RNA(circular RNA,circRNA)是一类缺乏5′-帽子和3′-poly(A)尾巴的非编码RNA,可以参与多种人类疾病的生物学过程。然而,对其在活动性肺结核(active pulmonary tuberculosis,ATB)中的诊断和功能价值却知之甚少。本研究旨在研究hsa_circ_0007460是否能作为ATB患者的潜在诊断生物标志物,并对其功能进行初探。通过实时荧光定量PCR(real-time quantitative fluorescent PCR,RT-qPCR)发现hsa_circ_0007460在32例ATB患者的外周血以及牛结核分枝杆菌的减毒株——BCG(bacillus Calmette-Guerin)感染的THP-1人源巨噬细胞中显著上调。受试者工作特征曲线(receiver operating curve,ROC)显示曲线下面积(the area under ROC curve,AUC)为0.7474,灵敏度76.67%,特异度78.13%。通过RNase R消化和放线菌素D抑制实验证实hsa_circ_0007460相较于其线性mRNA更加稳定,提示其有作为ATB的诊断生物标志物的潜力。通过蛋白质印迹(Western blot)、CCK-8(cell counting kit-8)、平板计数、免疫荧光等实验表明hsa_circ_0007460能调控巨噬细胞凋亡和自噬。最后,通过生物信息学分析预测下游的miRNA和mRNA,构建了hsa_circ_0007460/hsa-miR-3127-5p/PATZ1轴。上述研究结果表明,hsa_circ_0007460在ATB患者外周血中显著上调,可以作为潜在的诊断生物标志物,且hsa_circ_0007460能促进巨噬细胞凋亡、抑制巨噬细胞自噬从而促进胞内BCG的存活。
- 章金怡何禹墨周晶雨翁术锋马慧霞林太玥徐颖
- 关键词:自噬凋亡TB巨噬细胞
- 用SSR分子标记鉴定金花茶杂交种(英文)被引量:5
- 2009年
- 使用来自于叶绿体DNA,rDNA的内转录间隔区和核基因组其他区域的5对简单重复序列标记检测了6个以金花茶(Camellia nitidissi maChi)为母本,七星白(C.japonica)、茶梅(C.sasanqua)为父本的可能的杂交种.PCR结果显示,除H2以外的所有可能的杂交种应该是来自于相应父母本的真杂种,虽然这些杂交种的母本来自于金花茶的不同个体.另外,本研究揭示了山茶属的叶绿体DNA不是父系遗传的.
- 徐晶黄连冬徐颖张文驹
- 关键词:山茶SSR分子标记杂交种
- 一种结核分枝杆菌的重组DNA疫苗及其制备方法
- 本发明公开了一种结核分枝杆菌的重组DNA疫苗及其制备方法。本发明的重组DNA疫苗通过将基因Ag85B、Rv2029c和Rv1738重组入真核表达载体获得。本发明研究发现,免疫6‑8周龄C57BL/6雌性小鼠后,DNA疫苗...
- 徐颖翁术锋王洪海赵雅敏张天然章金怡
- 文献传递
- 结核分枝杆菌海藻糖磷酸磷酸酶诱导小鼠体液和细胞免疫应答
- 2006年
- 目的 研究结核分枝杆菌(M.tuberculosis)海藻糖磷酸磷酸酶(TPP)诱导小鼠体液和细胞免疫。方法 差速离心分离结核分枝杆菌H37Rv和卡介苗(BCG)的各细胞组分,通过Western杂交检测抗原TPP在结核分枝杆菌H37Rv和BCG中的亚细胞定位情况。分别用5×10^6 CFU的BCG和50μg的TPP蛋白免疫C57BL/6小鼠,检测小鼠血清中抗TPP的IgG1和IgG2a抗体效价。取免疫小鼠的脾细胞,体外抗原刺激,用酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测γ干扰素(IFN-γ)分泌细胞。结果 TPP亚细胞定位于结核分枝杆菌H37Rv和BCG的胞壁和细胞膜组分。TPP蛋白免疫后小鼠产生的TPP特异性IgG1和IgG2a抗体效价明显高于BCG免疫小鼠,并且IgG2a的抗体效价高于IgG1。体外抗原刺激TPP蛋白和BCG免疫小鼠的脾细胞,都能诱导较高的IFN-γ分泌。结论 结核分枝杆菌细胞壁蛋白TPP能诱导小鼠Ⅰ型辅助性T细胞介导的免疫反应,可作为抗结核疫苗的候选抗原。
- 张旻徐颖郄亚卿王九玲祝秉东王庆忠王洪海
- 关键词:结核分枝杆菌体液免疫应答细胞免疫应答
- 苯并异噁唑-3-甲酰胺类化合物及其合成和应用
- 本发明提供一种苯并异噁唑‑3‑甲酰胺类化合物,拥有如式(Ⅰ)所示的结构。本发明所提供的苯并异噁唑‑3‑甲酰胺类化合物是一类结构新颖的化合物,具备结构简洁、合成简单、易于放大生产等工艺优点。苯并异噁唑‑3‑甲酰胺类化合物对...
- 周璐陈国强徐颖渠志倍薛子安李慧逖
- 一种促凋亡重组卡介苗及其制备方法
- 本发明属于遗传工程和结核病疫苗研究技术领域,具体为一种促凋亡重组卡介苗及其制备方法。其通过在大肠杆菌—分枝杆菌穿梭质粒pMV261中依次插入结核保护性抗原Ag85B的信号肽ASP和促细胞凋亡基因BAX先得到重组质粒,再将...
- 王洪海李光华徐颖刘国元宋娜孔聪黄琪