彭霞
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 供职机构：山西医科大学更多>>
- 发文基金：山西省科技攻关计划项目博士科研启动基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- WT1蛋白CTL表位肽基因载体的构建与鉴定
- 2013年
- 目的构建WT1(Wilms’tumor gene 1)蛋白CTL表位肽基因载体,并检测其在293T细胞中的转录。方法设计分别含WT1-126肽、WT1-235肽以及这两种肽的基因载体,并加入Th通用表位Pan-DR-Th(PADRE),应用蛋白酶体切割软件PAProC和NetChop优化各表位和间隔序列,DNA疫苗在线预测工具DyNAVacS优化真核密码子后,人工合成核苷酸序列,分别插入pUC57载体,构建pUC57-WT1质粒,测序鉴定后,酶切回收各目的片段,亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒,转染293T细胞,RT-PCR检测各目的基因在293T细胞中的转录。采用无内毒素质粒大量提取试剂盒提取各重组质粒,采用紫外分光光度计测定质粒的纯度和浓度。结果各重组真核表达质粒经双酶切及测序鉴定证实构建正确;重组质粒携带的目的基因可在293T细胞中成功转录;各重组质粒DNA的纯度均合格,浓度在864.6～883.9μg/ml之间。结论成功构建了WT1蛋白CTL表位肽基因载体,并能在真核细胞中正常转录,为下一步在小鼠体内探讨特异性不同的CTLs群发挥抗肿瘤作用的机制奠定了基础。
- 彭霞樊卫平张凯苑晓娟刘玲玲王亮
- 关键词：细胞毒性T淋巴细胞表位肽DNA疫苗
- 超声抗原树突状细胞瘤苗抗肿瘤效应的体外研究被引量：2
- 2010年
- 目的 探讨结肠癌肿瘤超声抗原致敏的树突状细胞（DC）疫苗体外对结肠癌细胞的杀伤作用.方法分离HLA-A＊0201型健康供者的外周血单个核细胞（PBMC）,重组人细胞因子rhGM-CSF、rh IL-4、rh TNF-α体外诱导DC成熟,负载SW480超声抗原后体外刺激同一供者的细胞毒性T淋巴细胞（CTL）前体,MTT法检测CTL杀伤SW480（HLA-A＊0201阳性）、K562（HLA-A＊0201阴性）的细胞毒实验.结果在效靶比20∶1、10∶1、5∶1、2.5∶1作用时,CTL对SW480的杀伤率分别为51.12%、46.67%、52.60%、40.00%;对K562的杀伤率分别为29.26%、31.98%、39.46%、31.30%,证明在各种效靶比作用时,CTL对SW480的作用均强于K562（P＜0.05）.结论肿瘤超声抗原致敏的DC瘤苗能激发具有特异杀伤功能的CTL,并且体外杀伤靶细胞具有MHC限制性.
- 谢艳云樊卫平李娜苑晓娟彭霞
- 关键词：肿瘤癌症疫苗树突细胞SW480
- 小鼠体内相同MHC限制性CTL表位DNA疫苗共同抗肿瘤效应的研究
- 彭霞
- 文献传递网络资源链接
- 小剂量环磷酰胺对正常小鼠CD4^+CD25^+Treg细胞的调节作用被引量：6
- 2011年
- 目的比较多次与单次应用小剂量环磷酰胺(CTX)对小鼠CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)数量及功能的影响,明确小剂量CTX可否多次用于下调Treg细胞。方法 C57BL/6小鼠32只,随机分为正常对照、单次、两次及三次CTX注射组共4组,各组每10天腹腔注射20 mg/kg CTX或等体积PBS,末次给药后3 d,流式细胞技术测小鼠脾细胞中Treg细胞占CD4+T细胞百分比;同时3-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法比较各组脾细胞中T、B细胞增殖功能,中性红吞噬试验比较各组巨噬细胞吞噬功能。结果各实验组小鼠脾细胞中Treg细胞占CD4+T细胞百分比显著低于对照组(P<0.05),而各实验组间差异无统计学意义(P>0.05)。各实验组T、B细胞增殖指数及巨噬细胞吞噬功能明显高于对照组(P<0.05),但各实验组间差异无统计学意义(P>0.05)。应用CTX后Treg细胞数量与T、B细胞增殖功能及巨噬细胞吞噬功能呈线性负相关。结论多次与单次小剂量应用CTX对小鼠Treg细胞数量的下调作用无差异,下调Treg细胞后对免疫细胞的调节功能也无差异,小剂量CTX可多次用于下调正常小鼠Treg细胞。
- 苑晓娟樊卫平张凯刘玲玲彭霞谢艳云
- 关键词：环磷酰胺CD4+CD25+调节性T细胞免疫疗法
