张喜梅
- 作品数：23 被引量：45H指数：5
- 供职机构：哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省教育厅科学技术研究项目黑龙江省卫生厅科研项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- F9细胞的培养和全细胞抽提物获取方法的比较
- 2010年
- 目的对F9小鼠畸胎瘤细胞进行培养,探索理想的获取全细胞抽提物的方法。方法应用蛋白质抽提试剂盒、反复冻融循环和超声波裂解法进行F9全细胞抽提物的获取。结果通过蛋白质抽提试剂盒和反复细胞冻融循环的方法所获取的细胞抽提物渗透压和浓度偏低,而选用超声波裂解法所获取的细胞抽提物,无论从pH,渗透压,还是蛋白浓度方面分析均与理想值接近。结论选择超声波裂解法作为获取F9小鼠畸胎瘤全细胞抽提物的理想方法 。
- 张喜梅郭铁云王宁闫晓飞徐燕宁雷蕾金连弘张宝东池美花
- 关键词：畸胎瘤抽提物小鼠
- BHA和β-ME对表观修饰后的NIH/3T3细胞向神经方向诱导的实验研究被引量：1
- 2012年
- 目的通过联合应用表观修饰药物5-氮-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-aza-dC)和曲古抑菌素A(TrichstatinA,TSA)对NIH/3T3细胞进行重编程,应用β-羟基酸(betahydroxyacid,BHA)和β-巯基乙醇(β-mercaptoethanol,β-ME)进一步诱导,以期表达与神经细胞密切相关的基因。方法应用流式细胞技术检测实验组(4.5μM5-aza-dC+0.35μMTSA+1mMβ-ME+200μMBHA作用后的NIH/3T3细胞)和对照组中NIH/3T3细胞的DNA甲基化水平。应用RT-PCR的方法检测Oct4,Sox2,c-Myc和Klf4的表达,免疫细胞化学染色检测巢蛋白(nestin)和神经丝轻链(neurofilamentlightchain,NF-L)的表达情况。结果实验组NIH/3T3细胞DNA甲基化水平较对照组明显降低,细胞均呈现出Oct4,Sox2,c-Myc和Klf4基因的阳性表达。经过BHA和β-ME诱导后,NIH/3T3细胞呈巢蛋白和神经丝轻链阳性。结论表观修饰后的细胞经诱导后可以呈现nestin和NF-L的阳性表达。
- 张喜梅张宝东郭铁云闫晓飞陈雅隽雷蕾金连弘
- 关键词：重编程表观遗传学
- 皮肤组织工程中表皮干细胞培养的实验研究被引量：1
- 2005年
- 目的:通过表皮干细胞对基底膜的黏附性,利用层粘连蛋白和Ⅳ型胶原作为递质,探索提取和培养表皮干细胞的技术方法。方法:取新生1～3d的Wistar大鼠全层皮肤,通过酶消化法获得幼鼠表皮,并制成单表皮细胞悬液。以层粘连蛋白和Ⅳ型胶原作为基底膜的替代物,利用表皮干细胞对基底膜的吸附性筛选表皮干细胞。结果:与角质细胞对照,表皮干细胞对层粘连蛋白和Ⅳ型胶原的吸附性很好,克隆形成率较高。用SABC法对其进行整合素β1单抗的免疫组化染色;广谱角蛋白单抗的免疫组化染色观察细胞克隆的细胞浆内出现棕黄色的阳性表达。结论:用层粘连蛋白和Ⅳ型胶原快速黏附法可从大鼠皮肤分离和富集表皮干细胞。
- 张喜梅郭筠秋王少玲吴树亮金连弘刘慧雯
- 关键词：干细胞皮肤免疫组织化学
- 人骨髓间充质干细胞的生物学特性及向神经前体细胞分化的实验研究被引量：5
- 2009年
- 目的观察体外培养的人骨髓间充质于细胞（hMSCs）的生物学特性，并探讨使其转分化为神经前体细胞（NPCs）的方法。方法以密度梯度离心和贴壁法相结合分离成人骨髓间充质干细胞，并观察细胞形态、生长、表面标记以及成骨和成软骨及成脂肪能力的情况。选用第3代细胞进行诱导，先经胚胎干细胞培养液扩增，再用加有5-氮胞苷和曲古菌素A的神经诱导液诱导，7d后，一部分样本进行Nestin、Sox2免疫荧光染色和RT—PCR检测；另-部分样本在含有B27，的神经培养液中继续培养7d，然后进行NF—L的免疫荧光检测。结果分离培养的hMSCs纯度较高，CD29、CD44的阳性率均在90％以上；具有明显的成骨、成软骨和成脂肪能力；经5．氮杂胞苷和曲古菌素A作用后能向神经前体细胞分化，免疫荧光染色及RT-PCR结果显示，诱导后的细胞能特异性表达神经前体细胞标志物Nestin和Sox2；在神经培养液中继续培养后检测神经细胞标记物NF-L，可见较多阳性细胞。结论hMSCs可在体外进行分离培养扩增，经药物修饰后具有向神经前体细胞分化的潜能。
- 李秋明张喜梅单智焱张延清雷蕾金连弘
- 关键词：人骨髓间充质干细胞神经前体细胞5-氮杂胞苷曲古菌素A免疫荧光
- 骨髓间充质干细胞促进神经干细胞衍生的神经元突起生长并引导其定向延伸
- 李秋明申景岭单智焱张喜梅雷蕾金连弘
- 组织学与胚胎学多媒体实验课件的研制与应用
- 2004年
- 组织学又称显微解剖学，属形态学范畴。细胞、组织与器官三个级别的镜下形态是教学的中心内容。组织学与胚胎学实验课程内容多，抽象，易混淆，难理解，学生普遍反映此课难学。传统教学中各部分内容讲解只限于课上的录像和板图的演示，学生复习受到时间和空间的限制，因而印象不深，易造成张冠李戴。力图解决传统教学中存在的上述问题，
- 张喜梅刘慧雯
- 关键词：传统教学课件板图组织学与胚胎学显微解剖学实验课
- 组织工程化皮肤的研究进展被引量：5
- 2004年
- 人造生物皮肤是世界上第一种获得FDA(美国食品与药物管理局)批准的组织工程产品,它为临床解决皮肤缺损的修复提供了良好的前景。现从表皮、真皮、复合皮肤替代物等方面对该领域的最新研究现状进行综述,分析皮肤组织工程目前存在的问题及未来发展方向。
- 张喜梅郭筠秋刘慧雯
- 关键词：人工皮肤表皮替代物真皮替代物皮肤修复
- 对留学生教学的实践
- ＜正＞留学生不仅是各国人民友好、合作的纽带和桥梁,是多元文化交流的媒介,也是留学生派出国和接受国共同拥有的宝贵人才资源。我校的留学生工作开始于2005年。经过两个学年度的招生,现在我校学习的留学生有79人,分别来自尼泊尔...
- 张喜梅雷蕾金连弘
- 文献传递
- 人骨髓间充质干细胞对体外培养的胎儿神经干细胞向少突胶质细胞分化的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)对体外培养的神经干细胞(NSCs)向少突胶质细胞分化的影响。方法以密度梯度离心的方法获得人hMSCs,设立3个实验组,分别是hMSCs+NSCs共培养组、hMSCs条件培养基+NSCs组、NSCs自发分化组(对照组)。通过免疫细胞化学染色及RT-PCR等手段检测不同组中NSCs向少突胶质细胞分化的情况,并探讨其可能的机制。结果与自发分化组相比,共培养组及hMSCs条件培养基作用组NSCs向少突胶质细胞分化的百分率分别为(61.3±5.7)%和(58.4±6.2)%,差异均具有显著性(<0.05);且RT-PCR结果显示,共培养组及hMSCs条件培养基作用组少突胶质细胞相关基因Olig1、Olig2的表达增强。结论 hMSCs促进体外培养的NSCs向少突胶质细胞分化,可能与hMSCs分泌可溶性因子相关。
- 李秋明程琳刘春佳张喜梅申景岭雷蕾
- 关键词：人骨髓间充质干细胞少突胶质细胞分化
- 成纤维细胞重编程及诱导分化为神经前体细胞的研究
- 张喜梅
- 本项目研究表明，通过5-aza-dC和TSA，以及F9和胚胎干细胞抽提物对NIH/3T3细胞进行表观重编程，均可以使重编程后的体细胞中出现与多向分化潜能密切相关基因的表达上调；细胞的整体甲基化水平呈现明显的降低；对应用药...
- 关键词：
- 关键词：成纤维细胞诱导分化
