张华耀
- 作品数：6 被引量：38H指数：4
- 供职机构：中山大学孙逸仙纪念医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- siRNA沉默多药耐药相关蛋白3基因对肝癌细胞耐药性的影响被引量：1
- 2014年
- 目的研究小干扰核糖核酸(siRNA)沉默多药耐药相关蛋白(MRP)3基因(MRP3-siRNA)对原发性肝癌(肝癌)细胞耐药性的影响。方法应用不同梯度浓度的多柔比星(ADM)制备肝癌耐药细胞株HepG2/ADM,用携带MRP3-siRNA的lipofectamine 2000脂质体转染HepG2/ADM细胞。分为HepG2细胞组(对照组)、HepG2/ADM细胞组(耐药组)和转染MRP3-siRNA的HepG2/ADM细胞组(干扰组)。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测3组细胞MRP3基因信使核糖核酸(mRNA)含量,用蛋白质印迹法检测MRP3蛋白表达,噻唑蓝法检测肝癌细胞对ADM、氟尿嘧啶(5-FU)、长春新碱、奥沙利铂的半数抑制浓度(IC50),并计算耐药指数(RI)。3组实验数据比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t或t检验。结果耐药组的MRP3 mRNA平均含量(5.16±0.31)较对照组(3.08±0.27)和干扰组(2.85±0.23)明显升高(LSD-t=8.765,10.363;P<0.05)。耐药组的MRP3蛋白含量(21 063±274)较对照组(14 476±217)和干扰组(6 660±153)明显升高(LSD-t=21.836,79.578;P<0.05)。耐药组对ADM、5-FU、长春新碱、奥沙利铂的RI分别为14.40±0.31、26.68±0.22、28.70±0.49、20.23±0.54,干扰组相应为3.55±0.16、9.60±0.27、2.11±0.17、3.15±0.13,干扰组的RI明显低于耐药组(t=53.873,84.933,88.811,53.258;P<0.05)。结论 siRNA沉默肝癌细胞MRP3基因可提高肝癌细胞对化疗药物的敏感性,逆转肝癌细胞对化疗药物的耐药性。
- 苏正刘波刘建平张华耀吕泽坚程子亮
- 关键词：RNA干扰多药耐药相关蛋白质类
- 磁共振胰胆管成像在胆石病患者术前评估中的临床价值被引量：5
- 2014年
- 目的：探讨磁共振胰胆管成像（MRCP）在胆石病患者术前评估中的临床价值。方法回顾性分析2012年6月至2013年6月中山大学孙逸仙纪念医院和中山大学附属第三医院收治的70例胆石病患者临床资料。其中男38例,女32例；年龄18～87岁,中位年龄52岁。所有患者均签署知情同意书,符合医学伦理学规定。患者术前先后进行超声检查及MRCP ,手术方式为胆囊切除＋胆道探查术,以术中探查结果为诊断结石和胆道变异的金标准。两种方法对胆管结石和胆道变异检出率的比较采用χ2检验和Fisher确切概率法。结果超声检查对胆囊结石的检出率为93%（62/67）, MRCP为79%（53/67）,差异有统计学意义（χ2=4.968, 〈0.05）。超声检查对胆总管结石的检出率为61%（17/28）, MRCP为86%（24/28）,差异有统计学意义（χ2=4.462, 〈0.05）。超声检查对肝左、右管结石的检出率为2/5, MRCP为4/5,差异无统计学意义（P〈0.05）。超声检查对肝内胆管结石的检出率为36%（4/11）, MRCP为73%（8/11）,差异无统计学意义（P〈0.05）。超声检查对胆道变异的检出率为2/8, MRCP为7/8,差异有统计学意义（p〈0.05）。结论 MRCP在胆总管结石和胆道变异检出方面优于超声检查,有条件时可作为胆石病患者术前常规评估方法。
- 苏正刘波刘建平张华耀吕泽坚张翔李璐婧刘高杰叶啸区庆嘉
- 关键词：胆结石胰胆管造影术磁共振
- 超声吸引刀联合高频电刀与超声刀在肝切除术中的安全性比较被引量：10
- 2015年
- 目的比较超声吸引刀(CUSA)联合高频电刀与超声刀在肝切除术中的安全性。方法回顾性分析2011年1月至2014年1月在中山大学孙逸仙纪念医院采用CUSA联合高频电刀或超声刀行肝切除术的102例患者临床资料。根据手术方式将患者分为CUSA联合高频电刀切肝组(CUSA组,53例)和超声刀切肝组(超声刀组,49例)。其中CUSA组中,男32例,女21例;平均年龄(48±11)岁。超声刀组中,男31例,女18例;年龄(49±13)岁。所有患者均签署知情同意书,符合医学伦理学规定。患者术中均采用选择性肝门阻断法阻断肝门。观察两组患者选择性肝门阻断时间、术中出血量、术后并发症等临床指标。两组观察指标比较采用t检验或χ2检验。结果 CUSA组选择性肝门阻断时间为(13±2)min,明显短于超声刀组的(23±3)min(t=-19.946,P<0.05)。CUSA组术中出血量为(293±53)ml,明显少于超声刀组的(468±54)ml(t=-16.510,P<0.05)。CUSA组胆漏发生率为4%(2/53),明显低于超声刀组的16%(8/49)(χ2=4.537,P<0.05)。结论与超声刀相比,CUSA联合高频电刀肝切除术中出血量更少,选择性肝门阻断时间更短,胆漏发生率更低,肝切除术的安全性明显提高。
- 汪洋张华耀刘建平杨尚霖苏正韦金星
- 关键词：肝切除术超声吸引刀超声刀电刀
- 小干扰RNA调控多药耐药相关蛋白1基因对SMMC7721肝癌细胞株多药耐药性的影响被引量：3
- 2013年
- 目的 将表达特异性的小干扰RNA（siRNA）基因片段导入SMMC7721耐药细胞,干扰多药耐药相关蛋白1 （MRPl）基因后,观察其对细胞化疗敏感性的影响.方法 使用浓度递增法制作耐阿霉素（ADM）细胞株,将ADM浓度在2 mg/L时培养出的细胞,命名为SMMC7721/ADM细胞,转染25、50、75 nmol/L siRNA沉默此耐药株MRP1基因,于转染后24、48、72 h使用实时定量逆转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测各组细胞MRPl mRNA表达水平.于12、24、36、48、60 h用噻唑蓝（MTT）法检测细胞对化疗药物的敏感性,加入反应试剂进行流式细胞仪检测细胞凋亡水平,使用Western blot分别检测细胞中MRP1蛋白表达含量.细胞注入裸鼠右侧肩胛区,14 d后测量肿瘤的长径和宽径.结果 SMMC7721/ADM细胞对阿霉素、5-氟尿嘧啶（5-Fu）、长春新碱（VCR）、奥沙利铂（OHP）的耐药系数分别为25.43、68.32、39.17、18.31.RT-qPCR检测沉默效率,可见MRP1的表达明显降低（P＜0.05）.MRP1基因沉默后,Western blot技术可见MRP1蛋白明显降低.流式细胞仪可见细胞凋亡明显多于沉默前（P＜0.05）.多药耐药性的检测可见细胞对上述药物耐药系数降低为5.73、15.86、2.49、1.84.动物实验监测肿瘤生长,可见肿瘤生长率明显降低.结论 SMMC7721耐药细胞株在使用siRNA沉默MRP1基因后,对化疗药的耐药性有明显下降.MRP1基因与SMMC7721肝癌细胞的多药耐药性显著相关,可通过沉默MRP1基因来提高耐药肿瘤细胞对化疗药物的敏感性.
- 汪洋褚忠华刘建平苏正张华耀
- 关键词：多药耐药基因多药耐药相关蛋白1
- 前入路肝切除术在原发性肝癌手术中的应用价值被引量：16
- 2016年
- 目的探讨前入路肝切除术在原发性肝癌（肝癌）手术中的应用价值。方法回顾性分析2011年6月至2014年6月中山大学孙逸仙纪念医院和中山大学附属第三医院岭南医院收治138例行肝癌肝切除患者临床资料。其中男97例,女41例;年龄36~87岁,中位年龄52岁。所有患者均签署知情同意书,符合医学伦理学规定。根据不同手术方式将患者分为前入路肝切除组（前入路组,63例）和传统入路肝切除组（传统组,75例）。两组患者术前一般资料及术中、术后各项指标比较采用t检验或χ~2检验。结果前入路组肝功能Child-Pugh分级B、C级、多发肿瘤、肿瘤直径〉10 cm患者分别占73%（46/63）、44%（28/63）、16%（16/63）,明显高于传统组的37%（28/75）、17%（13/75）、5%（4/75）（χ2=20.444,12.051,8.144;P〈0.05）。前入路组平均术中出血量、输血浆量、输红细胞量分别为（428±17）、（470±14）、（300±7）ml,明显低于传统组的（517±11）、（630±15）、（420±11）ml（t=-6.097,-2.927,-8.928;P〈0.05）;前入路组切除术后并发症发生率10%（6/63）明显低于传统组的17%（13/75）（χ~2=1.759,P〈0.05）。结论对于肝功能较差、肿瘤多发以及肿瘤巨大的患者,前入路肝切除术优于传统入路肝切除术,可作为此类患者优先选择的术式。
- 苏正刘波刘建平张华耀杨尚霖刘高杰
- 关键词：前入路肝肿瘤肝切除术
- 多药耐药相关蛋白4在肝癌细胞株SMMC-7721中化疗耐药的作用被引量：4
- 2015年
- 目的 观察沉默多药耐药相关蛋白4（MRP4）基因对SMMC-7721耐阿霉素细胞株（SMMC-7721-ADM）的影响.方法 实验分为4组：SMMC-7721组、SMMC-7721-ADM组、SiNC-SMMC-7721-ADM阴性转染组、沉默MRP4的小干扰RNA （siMRP4）-SMMC-7721-ADM转染组;设计并筛选出抑制效率最高的siMRP4;Western blot及反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测各组MRP4蛋白和mRNA的表达水平;噻唑蓝（MTT）法观察各组对阿霉素（ADM）、5-氟尿嘧啶（5-Fu）、长春新碱（VCR）和奥沙利铂（OHP）的敏感性;流式细胞术检测各组细胞凋亡.结果 浓度为25 mol/L的4-6-MRP4抑制效率为87.60％,选其为siMRP4;SMMC-7721组中MRP4 mRNA和蛋白极少量或不表达（0.08 ±0.03,P＜0.05;0.025±0.009,P＜0.05）,SMMC-7721-ADM组显著高表达（8.76 ±0.08,P＜0.05;0.684±0.004,P＜0.05）,siMRP4-SMMC-7721-ADM转染组（1.00 ±0.01,P ＜0.05;0.180±0.003,P＜ 0.05）较SMMC-7721-ADM组明显下降但仍稍高于SMMC-7721组;siMRP4-SMMC-7721-ADM转染组与SMMC-7721-ADM组比较对ADM、5-Fu、VCR和OHP的耐药系数（RI）分别为0.40、0.85、0.32、0.05,较SMMC-7721-ADM对化疗药物敏感性增强（P＜0.05）,siMRP4转染组凋亡率3.26％较SMMC-7721-ADM组增加（P＜0.05）.结论 MRP4在SMMC-7721极少量或不表达,SMMC-7721-ADM肝癌细胞株高表达,沉默MRP4能较大程度逆转其化疗耐药性.
- 张华耀刘建平苏正杨尚霖韦金星汪洋
- 关键词：肝细胞多药耐药
