张云龙
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
- 供职机构：吉林大学白求恩医学院更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金吉林省科技厅科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 一种新的沙蚕纤溶酶的纯化、活性鉴定及部分分子特性被引量：5
- 2007年
- 目的:从沙蚕Nereis virens的体腔液中纯化、鉴定出一种新的纤溶酶,并对其进行分子表征。方法:运用离子交换层析、凝胶过滤层析等常规色谱方法纯化蛋白酶,采用纤维蛋白板检测法鉴定纤溶活性及活性分布曲线,利用2D-电泳方法检测此纤溶酶的表观分子量和等电点,并检测多种蛋白酶抑制剂对其酶活性的影响,以确定此蛋白酶的类型。结果:获取一种新的具有极强纤维蛋白水解活性的单链蛋白酶,其相对分子质量为29000,等电点为4.5,其蛋白水解活性在pH7.8和45℃时表现为最高,并能被二异丙基氟磷酸(DFP)和甲苯磺酚氟(PMSF)完全性抑制,确证其为一种典型的丝氨酸内肽酶。结论:Nereis virens的体腔液中存在一种纤溶活性极强的单链丝氨酸内肽酶,该纤溶酶对预防和治疗血栓性疾病具有一定的药用价值。
- 张云龙洪敏王艳萍石立红李奇黄浩刚
- 关键词：沙蚕NEREIS丝氨酸内肽酶类
- 阴、阳离子交换示差组合色谱法的设计及在纤溶酶纯化中的应用被引量：1
- 2005年
- 目的:探索以阴、阳离子交换色谱串接组合为方式,进行高分辨率分离纯化蛋白质的可行性。方法:阴、阳离子交换示差组合色谱法,以等度洗脱方法进行的阴、阳离子交换组合色谱,以及亲和色谱的纯化结果相对比。结果:聚丙烯酰胺凝胶电泳考马斯亮蓝染色法结果显示,阴、阳离子交换示差组合色谱法,具有较好的分离纯化效果。结论:以等度洗脱、pH梯度与盐梯度洗脱串接组合的阴、阳离子交换示差组合色谱是一种较好的组合纯化的方式,达到亲和色谱的纯化效果。
- 程熠洪敏李奇张云龙
- 关键词：色谱法离子交换纤溶酶
- 溶栓素定量方法的筛选系统被引量：2
- 2004年
- 目的 :建立蛋白类药物定量方法的系统评价体系。方法 :采用 Biuret蛋白定量法、二辛可宁酸定量法和染料结合定量法 ,通过筛选呈色产物的澄明度、溶解度、稳定性和兼容性 ,确定溶栓素的定量方法。结果 :Biuret蛋白定量法和二辛可宁酸定量法呈色产物的澄明度和溶解度较差 ,而染料结合定量法的呈色产物不仅具有良好的澄明度和溶解度 ,还具有较好的稳定性和兼容性。结论 :由澄明度、溶解度、稳定性和兼容性组成的筛选体系可作为系统评价蛋白类药物定量方法的思路组合。
- 程熠洪敏张云龙李奇
- 关键词：纤溶酶比色法
- 溶栓素产品纯度的检测被引量：3
- 2004年
- 目的 :检测经工业生产工艺生产的溶栓素样品的纯度。方法 :采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和高效液相色谱检测溶栓素的纯度 ,采用质谱检测溶栓素产品中小分子和赋形剂成分。结果 :溶栓素在 3种电泳凝胶都呈单带 ,溶栓素高效液相色谱的主峰积分面积达 98. 6 % ,经质谱表征可见众多小分子信号峰。结论 :尽管溶栓素样品中存在众多小分子 ,但按照目前新药申报要求 ,已经达到新药申报标准。
- 程熠洪敏张云龙李奇
- 关键词：纤溶酶纯度电泳聚丙烯酰胺凝胶
