崔建奇
- 作品数：25 被引量：19H指数：3
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- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划宁夏回族自治区研究生教育创新计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 一种用于Purα基因沉寂的慢病毒载体
- 本发明主要属于RNA沉寂技术领域，具体涉及一种用于Purα基因沉寂的慢病毒载体。所述慢病毒载体包括用于Purα基因沉寂的PurαRNAi寡核苷酸序列；所述PurαRNAi寡核苷酸序列所对应的Purα基因的基因靶位为772...
- 袁程敏崔建奇贾中发
- 文献传递
- 一种用于Purα基因沉寂的慢病毒载体
- 本发明主要属于RNA沉寂技术领域，具体涉及一种用于Purα基因沉寂的慢病毒载体。所述慢病毒载体包括用于Purα基因沉寂的PurαRNAi寡核苷酸序列；所述PurαRNAi寡核苷酸序列所对应的Purα基因的基因靶位为449...
- 袁程敏崔建奇贾中发
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- 癫痫大鼠小胶质细胞活化与P2Y12受体的表达及Purα的影响
- 2017年
- 目的研究急性癫痫状态下小胶质细胞活化与P2Y12受体的表达,以及Purα对P2Y12受体表达的影响。方法用免疫组织化学方法检测大鼠急性癫痫持续状态后不同时间点海马组织中由IBA1标记的小胶质细胞的活化;用Western blot检测癫痫状态下海马组织中P2Y12受体和Purα的表达水平,以及检测Purα在癫痫状态下对P2Y12受体表达水平的影响。结果癫痫组大鼠海马组织中的小胶质细胞被激活,表现为胞体增大、数量增多、突起数量增多且长度变短。癫痫不同时间点小胶质细胞活化的程度不同,癫痫2h时,小胶质细胞活化最为明显;癫痫4h时,活化的小胶质细胞数量开始减少;癫痫8h时,小胶质细胞活化程度最低。随着癫痫状态的持续,P2Y12受体表达水平呈现先上升后下降趋势,在癫痫3h时其表达水平最高,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。癫痫持续2h时,Purα过表达组的P2Y12受体的表达水平高于对照组(P<0.05),Purα沉默组的P2Y12受体的表达水平低于对照组和正常组(P均<0.05)。结论癫痫持续状态下,小胶质细胞发生活化;P2Y12受体的表达与小胶质细胞活化状态有关;Purα能够上调P2Y12受体的表达水平。
- 李平袁程敏郭凤英郭姗姗张冰莹何文欣石晓光孙涛崔建奇
- 关键词：小胶质细胞
- 一种能够稳定表达EGFP基因和Purα基因的细胞系的构建方法
- 本发明属于细胞系构建技术领域，具体涉及一种能够稳定表达EGFP基因和Purα基因的细胞系的构建方法，所述构建方法首先制备pLKO.1‐puro‐EGFP‐Purα慢病毒载体，然后将pLKO.1‐puro‐EGFP‐Pur...
- 何文欣郭姗姗张冰莹石晓光柴娟李永玲崔建奇
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- Purα蛋白在抑制淀粉样前体蛋白编码基因表达中的应用
- 本发明公开了Purα蛋白在抑制淀粉样前体蛋白(APP)编码基因表达中的应用，利用Purα蛋白，可以有效结合APP编码基因启动子的5‘UTR区域，并抑制Egr-1因子的正调控作用，从而降低了淀粉样前体蛋白(APP)的形成，...
- 崔建奇
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- Purα蛋白质不同结构域对APP基因表达的调控作用
- 2015年
- 该研究将构建的含淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)基因启动子的萤火虫荧光素酶报告质粒与Purα全长基因或含不同结构域的Purα缺失突变体共转染到U87MG细胞中,进行萤火虫荧光素酶活性测定,以确定Purα对APP基因表达的调控作用。同时,将Purα全长基因及含有不同结构域的Purα缺失突变体的真核表达载体分别转染至U87MG细胞,使目的蛋白过表达,通过实时定量PCR(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)研究Purα不同的结构域对APP基因在转录、翻译水平的调控作用。结果显示,Purα全长蛋白及其不同结构域对APP基因表达均有不同程度的抑制作用,但至少保持N-端或C-端的结构域可能是维持Purα蛋白功能的必要条件。
- 李永玲贾中发柴娟李平袁程敏孙涛崔建奇
- 关键词：蛋白质结构结构域APP基因表达
- 一种Purα基因片段P3及其应用
- 本发明公开了一种Purα基因片段P3及其应用，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，本发明真核表达pCDNA3.0载体上的Purα的基因片段，转染该质粒到需要的研究细胞系中，通过蛋白免疫印迹实验来探讨Purα蛋白不同...
- 崔建奇李永玲贾中发
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- 一种用于Purα基因沉寂的慢病毒载体
- 本发明主要属于RNA沉寂技术领域，具体涉及一种用于Purα基因沉寂的慢病毒载体。所述慢病毒载体包括用于Purα基因沉寂的PurαRNAi寡核苷酸序列；所述PurαRNAi寡核苷酸序列所对应的Purα基因的基因靶位为822...
- 袁程敏崔建奇贾中发
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- C/EBP β对APP基因的表达调控作用的研究被引量：2
- 2015年
- 该研究成功地构建了C/EBP β过表达慢病毒载体,在体外人胚肾细胞(HEK293FT)进行病毒包装并感染小鼠海马神经元细胞(HT22)。通过荧光素酶报告基因实验(luciferase assay)检测C/EBPβ对淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)启动子活性的影响;通过实时荧光定量PCR(Q-PCR)来检测C/EBPβ对APP和Sp1在转录水平上的表达;通过蛋白免疫印迹分析(Western blot assay)检测C/EBPβ对APP和Sp1蛋白表达的作用。萤火虫荧光素酶分析结果显示,C/EBPβ对APP启动子的表达有正调控作用;Western blot和Q-PCR分析的结果表明,C/EBPβ对APP和Sp1基因的表达有正调控作用。C/EBPβ对APP基因表达的调控作用的机制可能在于C/EBPβ上调了内源性转录因子Sp1的基因表达,而Sp1基因表达的增强直接导致了APP基因表达的上调。
- 柴娟李永玲芦晓红张茜马琳Huichen Wang孙涛崔建奇
- 关键词：C/EBP淀粉样前体蛋白阿尔茨海默病SP1基因表达调控
- Purα基因过表达和RNAi慢病毒载体的构建及应用被引量：2
- 2014年
- 目的构建Purα基因过表达以及SiRNA慢病毒表达载体,通过包装病毒,以用于神经系统细胞感染及原代培养神经元的基因操作。方法 1)过表达载体的构建:本实验使用pCDH-EF1-MCS-T2A-copGFP和pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP慢病毒载体,PCR扩增Purα全长基因,然后亚克隆到pCDH载体相应的多克隆位点之中,进行酶切和测序鉴定;2)ShRNA慢病毒表达载体的构建:根据shRNA的特征,设计shRNA的DNA序列以及其反向互补序列,然后合成并克隆到慢病毒载体pLKO.1-puro的相应位点中。3)慢病毒包装和滴度测定:将克隆好的pCDH-Purα和pLKO.1-puro-shRNA载体和病毒包装质粒pCMV-VSVG、pCMV-dR8.2 dvpr按相应的比例转染到293FT细胞中,48h后收集上清液,纯化、浓缩,进行滴度测定。结果测序结果证实所插入片段相位正确,转染后通过RT-PCR和Western blot证实过表达组Purα基因表达增高,而沉寂组的Purα表达抑制,达到实验设计要求,可以用于实验研究。结论利用本方法可以快速地进行目的基因的基因操作,省时、节约,与同类型的方法比较,具有较大的优越性,可以在实验中推广应用。
- 贾中发马琳和祯泉周瑜孙涛崔建奇
- 关键词：慢病毒表达载体基因过表达基因操作
