崔佳
- 作品数：16 被引量：6H指数：2
- 供职机构：长治医学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划江西省教育厅科学技术研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程农业科学更多>>
- 双歧杆菌表达系统的研究进展被引量：2
- 2010年
- 双歧杆菌作为表达外源基因的宿主备受关注,成为近年来研究的热点。本文从双歧杆菌表达系统的组成、外源蛋白的表达等角度综述了近期的研究成果,对该系统在口服疫苗和抗肿瘤方面的研究及应用前景进行了展望。
- 崔佳万翠香曾明魏华
- 关键词：双歧杆菌外源蛋白
- 铜绿假单胞菌丙酸代谢关键酶基因的克隆表达及生物信息学分析
- 2023年
- 目的克隆表达丙酸代谢关键酶基因prpB、prpC和prpD,分析预测相应表达蛋白潜在的结构和功能,为铜绿假单胞菌新型抗菌靶点的开发奠定基础。方法对铜绿假单胞菌中丙酸代谢关键基因prpB、prpC、prpD克隆入大肠埃希菌,构建相应的基因工程重组菌,通过镍柱亲和层析纯化重组蛋白,SDS-PAGE检测PrpB、PrpC和PrpD蛋白的分子质量及纯度。利用生物信息学软件预测PrpB、PrpC和PrpD蛋白的理化性质、疏水性、信号肽、二级结构和三级结构。结果重组菌用0.5 mmol/L IPTG于16℃条件下诱导,表达的重组蛋白PrpB、PrpC和PrpD主要以可溶性形式存在于上清中,经Ni柱亲和层析纯化得到相对分子质量分别为32×10^(3)、42×10^(3)、55×10^(3)的目的蛋白,与预期一致。生物信息学分析PrpB、PrpC和PrpD蛋白分别由298、375、494个氨基酸组成,相对分子质量分别为32.14×10^(3)、41.69×10^(3)、54.88×10^(3),等电点分别为5.33、6.03、6.15。3种蛋白均为亲水性蛋白,无信号肽,无跨膜结构。蛋白亚细胞定位于细胞质中,α螺旋和无规则卷曲是PrpB、PrpC和PrpD二级结构的主要蛋白质元件。结论成功表达了重组蛋白PrpB、PrpC和PrpD并进行了纯化。生物信息学预测PrpB、PrpC和PrpD含有丰富的α螺旋和无规则卷曲结构,为揭示PrpB、PrpC和PrpD蛋白的结构及丙酸代谢在铜绿假单胞菌中的生物学功能奠定了理论基础。
- 崔国艳李壮崔佳刘建玲
- 关键词：铜绿假单胞菌蛋白表达生物信息学
- 斑马鱼SDC4基因的克隆与遗传进化分析
- 2022年
- 目的:克隆斑马鱼多配体聚糖(SDC)4基因并分析其遗传进化关系,为探究斑马鱼SDC4基因的功能奠定分子生物学基础。方法:将分子克隆得到的斑马鱼SDC4基因全长cDNA利用Gibson组装方法构建至pCS2+载体并对其进行序列分析;利用qRT-PCR检测受精后1 d和3 d的AB、Tübingen(TU)野生型斑马鱼SDC4 mRNA表达量和胚胎发育前10 d的TU野生型斑马鱼SDC4 mRNA的表达差异;根据NCBI和ensemble网络信息,对斑马鱼SDC4、人SDC4和小鼠SDC4基因在染色体上的基因连锁信息作出分析,并利用MegAlign软件对斑马鱼SDC4、人SDC4和小鼠SDC4蛋白进行氨基酸序列比对分析其同源性,再应用MEGAX软件对不同物种SDC4蛋白构建系统发生树。结果:测序结果显示克隆得到的斑马鱼SDC4基因与ensemble公布的序列一致;AB、TU野生型斑马鱼在受精后前3 d的SDC4 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05),TU野生型斑马鱼SDC4 mRNA表达在胚胎发育前期呈现一定程度的母系遗传控制;染色体连锁基因座位图发现斑马鱼SDC4与人SDC4、小鼠SDC4的连锁基因不完全相同,蛋白序列比对分析斑马鱼SDC4蛋白与人SDC4、小鼠SDC4蛋白同源性分别为38.3%、44.2%,根据不同物种的SDC4氨基酸序列构建的系统发生树反映了生物进化的关系。结论:成功克隆了斑马鱼SDC4基因并对其进行了遗传进化分析,补充了斑马鱼SDC4的分子生物学信息。
- 崔佳温炟陈广信吴长新
- 关键词：斑马鱼MRNA表达系统进化树
- 两歧双歧杆菌中serpin基因的克隆、表达与功能分析被引量：3
- 2011年
- 从Bifidobacterium bifidum WBBI02基因组中克隆了serpin基因片段,构建了重组Serpin蛋白的原核表达体系,实现了Serpin的表达与纯化。纯化的Serpin蛋白进行了抑制肠道蛋白酶活性检测,以及对双歧杆菌粘附作用影响的显微观察研究。结果表明:WBB I02中长度为768 bp的serpin基因序列,与GENEBANK中Bifidobacterium longum NCC2705serpin序列同源性为99.9%。原核表达载体pBX2-WBBI02表达的Serpin能有效地抑制糜蛋白酶和胰弹性蛋白酶的活性,最高抑制率分别为90%和97%,显微观察结果证实Serpin能促进双歧杆菌对HT-29细胞的粘附。
- 叶若松黎鹏章昭琳万翠香崔佳魏华
- 关键词：双歧杆菌SERPIN克隆表达粘附
- 产Serpin双杆菌菌株筛选与serpin缺失株的构建
- 双歧杆菌作为人体肠道内的主要菌群,可通过黏附定植肠上皮细胞,形成生物屏障,产生有机酸和降低环境中氧化还原电位等机制,阻止外源微生物特别是致病菌的侵入,从而发挥调节肠道微生态平衡,抗炎症和促进宿主健康等作用。
黏附和...
- 崔佳
- 关键词：双歧杆菌多克隆抗体斑点杂交
- 文献传递
- 一种用于分枝杆菌平板计数的固体平板培养皿
- 本实用新型公开一种用于分枝杆菌平板计数的固体平板培养皿，包括培养皿本体和培养皿盖，培养皿盖包括第一盖体和第二盖体，第一盖体可拆卸连接在培养皿本体顶端，第二盖体可拆卸连接在第一盖体顶端；第一盖体上开设有阶梯通孔，第二盖体上...
- 崔佳
- 基于分枝杆菌感染免疫相关实验的微生物学毕业设计带教体会
- 2022年
- 毕业设计是大学教育过程中重要的实践教学环节。通过带教与分枝杆菌感染免疫相关的微生物学毕业设计,针对如何充分发挥学生主动性,从课题设计、实践操作、论文写作等多方面进行了心得探讨,以期提高学生的科研创新能力,激发科研兴趣,培养创新型科研人才。
- 崔佳陈云霞张雄鹰崔国艳吴长新
- 关键词：微生物学
- 人纤溶酶原丝氨酸蛋白酶(SP)活性区基因的克隆、表达与功能研究
- 2015年
- 目的克隆和表达人纤溶酶原(plasminogen,Plg)的丝氨酸蛋白酶(SP)活性区基因μplg,并进行重组蛋白的纯化及功能探索。方法用PCR方法从p DNR-plg质粒上扩增μplg,构建原核表达载体p ET22b(+)-μplg,IPTG诱导重组蛋白表达后复性,再经Ni+-NTA树脂亲和层析纯化,通过与双歧杆菌外膜蛋白Serpin的共孵育实验来探索μPlg的功能。结果 PCR成功扩增出了680 bp的人纤溶酶原Plg的SP区基因μplg,测序正确后与表达载体p ET22b(+)重组,重组质粒p ET22b(+)-μplg在大肠杆菌BL21中成功表达出分子量约为35 k D的μPlg蛋白质,经纯化后的蛋白纯度高达约90%以上,与Serpin蛋白共孵育后得到了二者的复合物。结论人纤溶酶原μPlg的成功克隆、表达及纯化对于研究SP区功能和与双歧杆菌的黏附作用有重要意义。
- 崔佳万翠香
- 关键词：人纤溶酶原质粒构建
- ASAP1基因影响结核易感性的研究进展被引量：1
- 2018年
- 近年来,通过全基因组关联分析筛选结核病易感基因取得了丰硕成果,其中ASAP1作为新发现的结核易感基因引起了国内外广泛的关注。同时,关于ASAP1基因多态性影响人类结核易感性的生物学机制得到了初步的科学实验验证,为进一步高效精准地预防、控制和治疗人类结核病提供了可能。本文对ASAP1基因的功能和其多态性与结核病的相关性研究进行综述,初步总结ASAP1蛋白影响结核遗传易感的机制,为今后启发研究者充分考虑病原体、宿主、环境多因素及他们的相互作用来科学研究结核病易感性奠定基础。
- 崔佳崔佳赵仲华吴长新
- 关键词：结核病易感性全基因组关联分析
- 敲低ASAP1降低结核分枝杆菌感染小鼠RAW264.7细胞的迁移能力
- 2019年
- 目的观察含SH3结构域-ADP-核糖基化因子(Arf)GTP酶激活蛋白-锚蛋白重复序列和PH结构域1(ASAP1)介导小鼠RAW264.7巨噬细胞对结核分枝杆菌感染过程的影响以及ASAP1对巨噬细胞迁移能力的影响。方法建立ASAP1敲低的RAW264.7细胞系,感染结核分枝杆菌H37Ra后,利用荧光共聚焦显微镜和平板计数方法对胞内细菌的载量进行检测,采用TranswellTM法检测ASAP1敲低细胞的迁移能力。结果与对照组细胞相比,ASAP1敲低的RAW264.7细胞感染H37Ra后胞内细菌载量增多,且细胞迁移能力降低。结论敲低ASAP1降低RAW264.7细胞的迁移能力。
- 崔佳崔佳王玉环吴长新
- 关键词：RAW264.7细胞结核分枝杆菌细胞迁移
