尤明强
- 作品数：14 被引量：20H指数：3
- 供职机构：兰州生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项“重大新药创制”科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 正交试验优化鼠疫活疫苗冻干稳定剂被引量：1
- 2014年
- 目的优化皮上划痕用鼠疫活疫苗的稳定剂配方。方法采用正交试验,以鼠疫杆菌冻干存活率为检测指标,分别对乳糖、谷氨酸钠、硫脲和尿素4种成分组成的稳定剂配方,以及乳糖、蔗糖、谷氨酸钠、硫脲和尿素5种成分组成的稳定剂配方进行优化。结果 4种成分组成的稳定剂最佳组合为乳糖7.5%、谷氨酸钠0.5%、硫脲1.0%、尿素0.1%(均为质量分数),此配方可使菌体的冻干存活率达到(68.49±6.19)%;5种成分组成的冻干稳定剂最佳组合为乳糖7.5%、蔗糖7.5%、谷氨酸钠0.5%、硫脲0.5%、尿素0.1%(均为质量分数),此配方可使菌体的冻干存活率达到(74.71±6.34)%,均高于现有稳定剂配方。结论优化的两种稳定剂均对鼠疫杆菌具有较好的保护作用。
- 尤明强裴明玉王军戴光波刘瑛翟雷
- 关键词：正交试验稳定剂
- 常用消毒方法对布鲁菌消毒效果的比较被引量：3
- 2016年
- 目的评价不同消毒方式对布鲁菌的消毒效果,为建立高等级生物安全实验室及疫苗生产车间中布鲁菌的消毒标准操作规范提供实验证据。方法筛选粗糙型及光滑型布鲁菌作为模式菌。将模式菌的高浓度菌液和低浓度菌液分别经紫外线、有效氯含量为2 000 mg/ml三氯异氰尿酸及75%乙醇,经过15 min、30 min、60 min杀菌处理,将处理后的细菌置于37℃培养5 d,观察其存活情况,进行消毒效果评价。结果紫外线能在15 min内完全杀灭生物安全柜中的高浓度及低浓度布鲁菌。2 000 mg/ml三氯异氰尿酸在15 min内不能完全杀灭较高浓度布鲁菌,但对低浓度布鲁菌的杀灭效果较好。75%乙醇能在15 min内完全杀灭高浓度及低浓度布鲁菌。结论紫外线、75%乙醇对布鲁菌有较好的消毒效果,可用于高等级生物安全实验室及布鲁菌活疫苗生产车间的常规消毒。
- 尤明强李天柱陈成李恪梅王国治魏东
- 关键词：布鲁菌疫苗消毒
- 研究炭疽活疫苗动物免疫力与血清抗芽胞IgG水平的关系
- 炭疽疫苗是预防炭疽流行和炭疽生物恐怖的重要手段.已有动物实验表明,炭疽活疫苗的保护力优于以保护抗原为主要成份的无细胞疫苗,但两类现行疫苗都有待重新评价和改进.炭疽疫苗的效力必须用适当的实验室方法进行检测与分析才能了解其性...
- 王秉翔韩少波尤明强虞雪梅胡海涛
- 关键词：炭疽杆菌炭疽疫苗
- 文献传递
- 炭疽毒素的细胞受体被引量：1
- 2004年
- 炭疽杆菌外毒素是三组分蛋白质 ,构成两种毒素。水肿因子 (EF)和致死因子 (LF)分别是腺苷环化酶和金属蛋白酶 ,保护性抗原 (PA)与细胞表面受体结合并将水肿因子或致死因子转移进细胞内发挥毒性作用。在哺乳动物细胞上己发现有两种受体 ,分别是肿瘤内皮标志 8基因编码的细胞表面蛋白ATR/TEM8和毛细血管形态发生基因 2编码的细胞表面蛋白CMG2。这两种受体蛋白的生理功能都不十分清楚 ,它们之间的氨基酸序列有很高的同源性 (4 0 %～ 6 0 % )。氨基酸序列主要分信号肽、细胞外主基、跨膜区、脑浆尾四个区 ,细胞外主基内含vonWillebrand因子A主基或称整合素插入主基 (VWA/I主基 ) ,VWA/I主基内有金属离子依赖性粘连位点 (MIDAS) ,是主基与PA蛋白质相互作用所必不可少的。这两种受体都有几种异构体 ,主要差异在于胞浆尾区的氨基酸长度不同。两种VWA/I主基都有封闭PA功能 ,阻止细胞中毒的作用 。
- 王秉翔尤明强董树林
- 关键词：炭疽毒素保护性抗原
- 炭疽活疫苗家兔免疫力与血清抗芽胞IgG关系的研究被引量：6
- 2003年
- 炭疽疫苗是预防炭疽流行和炭疽生物恐怖的重要手段。已有动物实验表明 ,炭疽活疫苗的保护力优于以保护性抗原为主要成份的无细胞疫苗 ,但两类现行疫苗都有待重新评价和改进。炭疽疫苗的效力必须用适当的实验室方法进行检测与分析才能了解其性质和细节。试验中力图探寻炭疽活疫苗家兔免疫力与血清抗芽胞抗体水平的关系。用“皮上划痕人用炭疽活疫苗”免疫家兔 ,以特定制备的炭疽芽胞抗原用ELISA法检测血清抗炭疽芽胞IgG抗体水平 ,并用强毒炭疽杆菌攻击进行效力试验。免疫家兔血清几何平均抗芽胞IgG滴度在免疫后一个月内持续升高 ,14d达到 2 0 6 ,2 8d时达到 776 ,这时其抵抗 2 0MLD毒菌攻击的保护率为 80 % ,符合中国生物制品规程要求的保护力。一个月后抗体水平开始下降 ,4 2d时滴度降至 2 2 3。实验所揭示的炭疽减毒活疫苗诱导的家兔抗芽胞IgG抗体与抗炭疽保护力之间的关系 ,既为评价现行疫苗提供了资料 。
- 王秉翔韩少波尤明强虞雪梅胡海涛
- 关键词：炭疽杆菌炭疽疫苗
- 冻干保护剂中明胶浓度对布病疫苗活菌率的影响被引量：2
- 2016年
- 目的研究冻干保护剂中明胶浓度对布鲁杆菌活疫苗活菌率的影响,为布病疫苗保护剂中最佳明胶浓度的确定提供理论依据。方法将布鲁杆菌活疫苗接种到代肝琼脂培养基,转种,扩大培养,用含明胶浓度分别为0%、0.25%、0.5%、1%的4种保护剂收获。经浓度测定,调配浓度,冷冻干燥,封口等工序,制备1 000亿/m L和5亿/m L两种浓度的布鲁杆菌活疫苗,测定冻干后布病疫苗的活菌数。4℃保存样品冻干封口后2 d、2周、1个月、3个月测定活菌数。37℃保存样品冻干封口后2周,1个月测定活菌数。结果冻干后2 d含不同明胶浓度的1000亿/ml疫苗活菌率水平较接近,但冻干后3个月,含1.0%明胶保护剂疫苗活菌率降低比例明显高于其他明胶含量的疫苗。5亿/ml的低浓度疫苗,随着明胶浓度增高,其活菌率降低幅度明显增加,冻干后2 d不含明胶保护剂疫苗活菌率为65.24%,而含1.0%明胶保护剂疫苗活菌率仅为13.34%。含1.0%明胶保护剂疫苗稳定性也较差,冻干后4℃保存3个月的疫苗活菌率降低比例为60.94%,冻干后37℃保存2周的疫苗活菌率降低比例为78.41%。结论冻干保护剂中明胶的浓度愈高,布病疫苗的活菌率愈低,且稳定性越差。
- 张凌男陈成尤明强李天柱李恪梅王国治魏东董巧香
- 关键词：保护剂
- 从大肠杆菌中表达纯化炭疽杆菌保护性抗原
- 目的：利用基因重组技术获取炭疽杆菌保护性抗原(PA)。
方法：将炭疽杆菌保护性抗原编码基因pag与pET载体连接构建重组质粒，转化大肠杆菌DE3，诱导表达炭疽杆菌保护性抗原，并经亲和层析及凝胶过滤纯化此抗原。
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- 王革尤明强李睿王秉翔
- 关键词：炭疽杆菌保护性抗原基因重组生物学活性
- 文献传递
- 鼠疫、布氏菌、炭疽活疫苗浓度测定通用参考品的研制被引量：3
- 2015年
- 目的将现用鼠疫、布氏菌、炭疽活疫苗3套浓度测定参考品整合成一套通用参考品。方法确定通用参考品吸光度值,从3套鼠疫、布氏菌及炭疽疫苗浓度测定用参考品共9个浓度中选取代表性3个浓度参考品;利用现用3种活疫苗浓度测定用参考品的线性方程,计算通用参考品所代表各种疫苗的浓度;制备参考品并进行质量控制;观察参考品的长期稳定性;组织3个实验室进行协作验证。结果确定通用参考品吸光度值为0.350、0.494、0.665;确定通用参考品所代表各种疫苗浓度;完成通用参考品的制备,各项检定符合规定;对4℃冷藏保存参考品进行稳定性研究,变异系数小于2.0%;经3个实验室协作验证,各实验室使用2种参考品的测定结果误差均小于2.0%。结论在现有参考品的基础上整合成一套鼠疫、布氏菌、炭疽活疫苗分光光度法浓度测定通用参考品,并为以后建立分光光度法细菌浓度测定通用参考品奠定基础。
- 魏东尤明强裴明玉庄新海翟雷魏然王国治李恪梅
- 关键词：分光光度法
- 布氏菌104M变异株毒力及保护力研究被引量：1
- 2017年
- 目的研究皮上划痕人用布氏菌活疫苗104M变异株的残余毒力及保护力。方法对布氏菌104M变异株进行菌种检定。通过测定布氏菌104M变异株与未变异株的半数致死量(50%lethal dose,LD50),比较两者的残余毒力;用布氏菌104M变异株与未变异株分别免疫小鼠,4周后用羊型弱毒或强毒布氏菌皮下攻击,4周后测定脾脏细菌数,比较布氏菌104M变异株与未变异株的保护效果。结果菌种检定结果显示,布氏菌104M变异株与未变异株分别符合变异及未变异布氏菌株特征。104M未变异株LD50为1.1×109,变异株LD50为2.2×1010。用羊型弱毒及强毒布氏菌攻击后,布氏菌104M变异株与未变异株均具有较好的保护效果,但104M变异株保护力低于未变异株,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论布氏菌104M变异株残余毒力比未变异株明显降低,保护力略低于未变异株。
- 魏东李天柱陈成尤明强王国治
- 关键词：布氏菌毒力保护力
- 炭疽灭活和裂解芽胞抗原免疫家兔后血清中的IgG抗体应答
- 2010年
- 炭疽杆菌芽胞在炭疽免疫中发挥基本作用。实验中以炭疽活芽胞疫苗为原形,建立了制备灭活和裂解炭疽芽胞的方法,研究了各种灭活和裂解炭疽芽胞疫苗不同浓度、不同剂次免疫家兔的抗芽胞和毒素IgG应答,总结分析了各种灭活和裂解炭疽芽胞疫苗用于新疫苗成分之一的可能性。甲醛灭活炭疽芽胞疫苗设芽胞浓度2.5×108剂量组、5×108剂量组、1×109剂量组,于0、4、8周时3次免疫。在3剂免疫后血清抗炭疽芽胞IgG水平持续升高,首次免疫后4、8、12周时家兔血清中抗芽胞IgG几何平均滴度可达到600～16000。裂解炭疽芽胞疫苗的制备和动物免疫中,只采取了2.5×108芽胞浓度,两剂免疫,免疫时间为0、4周。在首次免疫后4、8、12周时家兔血清中抗芽胞IgG几何平均滴度分别为362、776和388。各时间点采集的家兔血清未能测出或只测出极微量的抗炭疽毒素IgG。通过上述研究认为,以裂解炭疽芽胞抗原作为炭疽疫苗成分之一,其抗原性和免疫原性是适宜的;免疫剂量可以设定为2.5×108芽胞浓度上下;免疫次数可定为2剂间隔1个月。
- 韩少波尤明强惠一鸣傅林锋胡丽娜魏东王秉翔
- 关键词：炭疽杆菌炭疽疫苗
