孟莎莎
- 作品数:10 被引量:12H指数:2
- 供职机构:杭州师范大学更多>>
- 发文基金:浙江省自然科学基金杭州市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 一种植物根系相关功能基因研究模型的构建方法
- 本发明提供了一种植物根系相关功能基因研究模型的构建方法,所述方法包括:将植物根系相关功能基因连接到转基因表达载体pRI101-AN上,得到含有目标基因的重组质粒转入到发根农杆菌K599中,侵染黄瓜萌发4天的活体苗的子叶下...
- 向太和孟莎莎曹庆丰杜苏瑞
- 一种利用转基因不定根繁殖根结线虫的方法
- 本发明提供了一种利用转基因不定根繁殖根结线虫的方法。本发明首先利用发根农杆菌K599侵染黄瓜子叶,高频诱导出不定根,离体子叶生根频(转基因频率)达90%,诱导出的不定根在荧光显微镜下能发出强烈的绿色荧光。利用诱导出的黄瓜...
- 向太和孟莎莎王琳
- 一种利用黄瓜繁殖根结线虫的方法
- 本发明提供了一种利用黄瓜实生苗在透明的玻璃瓶(生长条件:温度20~25℃,每天适量浇水、保持湿度75%以上,12h/12h光照和黑暗交替,光强1200~2400Lux)中繁殖南方根结线虫、爪哇根结线虫和花生根结线虫的方法...
- 向太和孟莎莎程慢成
- 一种植物根系相关功能基因研究模型的构建方法
- 本发明提供了一种植物根系相关功能基因研究模型的构建方法,所述方法包括:将植物根系相关功能基因连接到转基因表达载体pRI101-AN上,得到含有目标基因的重组质粒转入到发根农杆菌K599中,侵染黄瓜萌发4天的活体苗的子叶下...
- 向太和孟莎莎曹庆丰杜苏瑞
- 文献传递
- 黄瓜多抗自交系NC-46转基因不定根的高频诱导及其cDNA文库的构建被引量:1
- 2010年
- 利用发根农杆菌K599(带有质粒pBIN-35S-GFP),以具有抗爪哇根结线虫和花生根结线虫等多种抗性基因的黄瓜自交系NC-46离体子叶为外植体,高效诱导出转基因不定根(诱导率达76.7%);并在此基础上成功构建了转基因不定根的cDNA文库。构建的cDNA文库重组率为98.3%,原始库容量达2.02×106cfu,其中基因的完整性比率为47.6%,Unigene比例为66.7%。选用转基因不定根构建根的cDNA文库,克服了实生苗难以获得大量均一状态根的缺陷;克服了实生苗根受到土壤根际微生物、线虫等对根生理状态的影响以及对提取RNA的污染问题;利用改良的SmartcDNA文库构建法,获得的文库克隆含有完整的5′端非翻译区的全长cDNA;此外,构建的文库由于利用改良的pUC19载体替代了λTripIEx2噬菌体载体,获得的克隆无需再将插入到噬菌体载体上的cDNA转染到质粒载体,可直接用于杂交和测序筛选,因此在基因克隆筛选时更加方便。
- 孟莎莎向太和王琳
- 关键词:黄瓜转基因毛状根CDNA文库
- 黄瓜抗根结线虫基因工程的初步研究
- 黄瓜是我国重要的蔬菜作物。近年来,随着我国种植业结构的调整,黄瓜的保护地种植和大棚种植面积迅速增加,而重茬种植和温室大棚内人工控制的环境使黄瓜生产中根结线虫的危害日趋严重,根结线虫病已成为黄瓜生产中一种毁灭性的病虫害。引...
- 孟莎莎
- 关键词:黄瓜根结线虫转基因毛状根CDNA文库
- 文献传递
- 一种利用黄瓜苗繁殖根结线虫的方法被引量:4
- 2011年
- 为建立繁殖根结线虫的新方法,利用黄瓜实生苗为宿主,在透明的玻璃瓶中成功繁殖了南方根结线虫、花生根结线虫和爪哇根结线虫,为有效分离根结线虫提供了一条新途径.该方法不仅丰富了繁殖根结线虫的宿主,而且便于随时观察线虫侵染根形成根结的动态过程,也避免了在繁殖过程可能造成线虫逃逸对周围土壤的污染问题.
- 孟莎莎向太和程慢成
- 关键词:黄瓜根结线虫繁殖
- 长期培养的黄瓜毛状根中外源基因遗传稳定性分析被引量:6
- 2012年
- 对在固体培养基上培养3年的黄瓜转gfp基因毛状根进行gfp和rol位点系列基因的PCR扩增、gfp的荧光定量PCR、Western blot杂交以及荧光观察分析。结果显示,由组成型启动子35S驱动的gfp在转录水平上能正常表达,而且能够翻译出编码蛋白;此外,培养3年后的毛状根,能扩增出与毛状根形态构成有关的rol系列基因。本研究结果表明长期培养的毛状根能保持其遗传稳定性,这为利用毛状根长期工厂化生产外源基因表达的蛋白产物和药用植物的活性成分提供了理论依据。
- 曹庆丰向太和孟莎莎王沙沙陆文怡
- 关键词:黄瓜毛状根基因稳定性
- 一种利用转基因不定根繁殖根结线虫的方法
- 本发明提供了一种利用转基因不定根繁殖根结线虫的方法。本发明首先利用发根农杆菌K599侵染黄瓜子叶,高频诱导出不定根,离体子叶生根频(转基因频率)达90%,诱导出的不定根在荧光显微镜下能发出强烈的绿色荧光。利用诱导出的黄瓜...
- 向太和孟莎莎王琳
- 文献传递
- 一种利用黄瓜繁殖根结线虫的方法
- 本发明提供了一种利用黄瓜实生苗在透明的玻璃瓶(生长条件:温度20~25℃,每天适量浇水、保持湿度75%以上,12h/12h光照和黑暗交替,光强1200~2400Lux)中繁殖南方根结线虫、爪哇根结线虫和花生根结线虫的方法...
- 向太和孟莎莎程慢成
- 文献传递