孟宪芳 作品数:24 被引量:84 H指数:5 供职机构: 华中科技大学同济医学院基础医学院神经生物学系 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 湖北省自然科学基金 湖北省高等学校省级教学研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
人类组氨酰TRNA合成酶类似物的原核表达及其多克隆抗体的制备 2005年 目的:在原核系统中表达并纯化人类组氨酰TRNA合成酶类似物蛋白,制备多克隆抗体。方法:设计引物扩增其开放阅读框,重组入原核表达载体PQE30,并在大肠杆菌M15中诱导表达;应用纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔。结果:①成功构建人类组氨酰TRNA合成酶类似物的原核表达载体;②经NI亲和层析获得纯度较高的重组蛋白;③制备了高滴度的兔抗人类组氨酰TRNA合成酶类似物蛋白的多克隆抗体。结论:原核表达载体的构建、重组蛋白的表达、纯化及多克隆抗体的制备为今后研究该蛋白的功能提供了良好的基础。 孟宪芳 施静 刘晓春 陈金中关键词:原核表达 突触蛋白-I在胚胎干细胞体外神经分化过程中的表达变化 被引量:4 2007年 目的探讨突触蛋白-I(synapsin-I)在胚胎干细胞(ESCs)体外神经分化过程中的表达变化及作用。方法采用“五步法”和维甲酸(RA)法两种途径体外诱导ESCs向神经细胞分化,并以另一种可向神经细胞分化的肿瘤细胞-PC12细胞的诱导过程作参照,从不同的途径、不同的细胞进行比较.通过免疫组织化学、RT-PCR、Western blot方法观察这一过程中synapsin-I的表达变化.找出synapsin-I在ESCs向神经细胞分化过程中表达变化的共同规律。结果结合形态学和其它神经特异性指标的变化,synapsin-I在ESCs和PC12细胞向神经细胞分化的过程中具有早期即有表达,后逐渐升高,至分化成熟阶段达最高,后期又逐渐下降的变化规律。结论在ESCs的分化过程中,synapsin-I的表达存在特定的时空规律,并与ESCs的形态学改变相关,提示synapsin-I可能对ESCs在神经分化过程中的形态分化起着重要的作用。 梁燕玲 常丽英 梅爱农 孟宪芳 张旻 张苏明关键词:胚胎干细胞 细胞分化 小鼠Sim2真核表达载体的构建及其对PC12细胞周期的影响 被引量:1 2006年 目的:构建小鼠Sim2(mSim2)真核表达载体,并观察其对PC12细胞周期的影响,以初步阐明Sim2基因在Down综合征发病机制中的作用。方法:以逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法从新生小鼠大脑中扩增mSim2全长阅读开放框(ORF),定向克隆入真核表达载体pcDNA3中。以脂质体法瞬时转染PC12细胞;RT-PCR方法检测mSim2基因在PC12细胞的表达;流式细胞仪观察mSim2对细胞周期的影响。结果:DNA测序结果表明,mSim2成功克隆入真核表达载体pcDNA3中。RT-PCR结果显示,瞬时转染的PC12细胞中有明显的mSim2表达。流式细胞仪检测发现,转染mSim2后,处于G0/G1期的PC12细胞百分比明显升高(P<0·01),而G2/M期百分比明显低于对照组和空载体组(P<0·01)。结论:Sim2基因可能通过抑制神经元前体细胞的增殖参与Down综合征的发生;Sim2真核表达载体的构建为进一步研究该基因的功能奠定了良好的基础。 孟宪芳 施静 刘晓春 李伶俐 彭彬关键词:PC12细胞 细胞周期 唐氏综合征 在“医教协同”背景下提高临床医学专业学位研究生科研能力的探索 被引量:12 2019年 临床医学专业学位研究生的培养目标是培养具有较强的临床实践能力和具备一定科研能力的医学高层次人才,但在目前的“医教协同”背景下,也存在专业学位研究生科研能力欠缺的现实问题.按照华中科技大学同济医学院的培养方案,专业学位研究生在校36个月时间内有33个月和参加住院医师规范化培训的学员一起轮转各临床科室.繁重的临床工作对培养和提高专业学位研究生的科研能力带来了极大的挑战.本文在总结现阶段培养模式问题的基础上,讨论了加强专业学位研究生科研能力培养的具体方式:开展文献俱乐部活动锻炼学生的科研逻辑思维能力,指导研究生开展以临床需求为原则的科学研究,编写《专业学位研究生实验课程医科篇》教材并新增该选修课.这些尝试在不占用专业学位研究生临床工作时间的同时,提高了他们的科研能力. 熊京 晏汉娇 孟宪芳 吴亮 杨晓 张春关键词:专业学位研究生 神经生物学课程开设的发展和反思(摘要) 2009年 施静 张育文 李熳 孟宪芳关键词:神经生物学 教学 兴奋性氨基酸受体与内脏伤害性信息传入的实验研究 被引量:3 2004年 目的 研究迷走神经参与胃内脏伤害性信息向下丘脑传递的通路中是否有兴奋性氨基酸及其受体参与。方法 检测胃受到伤害性刺激时分别给予NMDA受体拮抗剂D APV、AMPA受体拮抗剂CNQX及nNOS抑制剂L NNA后Fos样蛋白在下丘脑室旁核 (PVN)的表达 ;并用RT PCR方法检测胃受到伤害性刺激时脑干NMDA受体、AMPA受体和nNOSmRNA的表达及双侧迷走神经切断后对其的影响。结果 预先注射D APV或L NNA可以明显抑制胃内灌注福尔马林诱导的Fos样蛋白在PVN的表达。②胃内注入福尔马林可以增加NR1和nNOSmRNA的表达 ,减少AMPA受体mRNA的表达 ;双侧膈下迷走神经切断术可以明显阻断三种mRNA表达的改变。结论 迷走神经和NMDA受体及其下游因子NO参与了胃内脏伤害性信息向下丘脑室旁核的传递。 易春霞 雷君 茹立强 孟宪芳关键词:胃内 AMPA受体 迷走神经 伤害性刺激 NMDA受体 ROS介导的炎症反应与中枢神经系统疾病 被引量:7 2016年 活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)是生物有氧代谢过程中的一种副产品,它具有很强的化学反应活性,在细胞信号传导和保持机体稳定性方面起着重要作用。在某些因素刺激下,ROS会急剧增多,进而通过细胞氧化应激影响一系列信号转导途径引起炎症反应。ROS的异常表达常与神经系统疾病发生密切相关,它介导炎症反应的发生,参与神经系统疾病的发展和恶化。 楚广品 邱平 胡岳 孟宪芳关键词:ROS 炎症 神经系统疾病 电针对佐剂性关节炎大鼠病灶局部皮肤组织IL-1β、IL-1ra mRNA表达的影响 被引量:22 2004年 目的 :观察电针对单侧佐剂性关节炎大鼠的疼痛试验评分、炎症灶局部病理反应 ,以及病灶局部皮肤组织IL 1β、IL 1ramRNA表达的影响。方法 :通过将完全弗氏佐剂 50 μL注入SD大鼠左后肢外踝关节皮下制造单侧佐剂性关节炎疼痛模型 ,电针“环跳”穴、“阳陵泉”穴 (刺激参数为0 .5~ 1.5V ,4~ 16Hz,3 0min) ,应用跖、背屈关节评分连续观察大鼠 7d内的痛反应曲线 ,应用HE组织化学染色方法观察病灶局部皮肤组织炎性病理反应 ,应用RT PCR技术检测IL 1β、IL 1ramRNA表达情况。结果 :电针可明显减少炎症痛大鼠的疼痛评分 ,抑制佐剂性关节炎大鼠病灶局部炎性病理反应 ,并抑制病灶局部皮肤组织IL 1βmRNA表达 ,促进IL 1ramRNA表达 ,使IL 1ra/IL 1β比值上升 (P <0 .0 1)。结论 :电针可能通过调节炎症灶局部致炎细胞因子及抗炎细胞因子之间的平衡 ,从根本上解除局部病灶免疫细胞的激活状态 ,达到扶正祛邪、平衡阴阳的调控作用 ,从外周途径缓解疼痛。 李熳 王丽娜 易春霞 孟宪芳 曾青 张静 李玲俐 施静 关新民关键词:病灶 IL-1RA MRNA表达 IL-1Β 佐剂性关节炎 方法观 红景天苷抑制高糖损伤神经元活性caspase 3和促进BDNF表达 被引量:6 2015年 目的探讨红景天苷对高糖所致原代培养神经元损伤是否具有保护作用及其机制。方法原代培养大鼠皮质神经元,分为对照组,50 m M高糖处理组,50μM红景天苷+50 m M高糖处理组,以及100μM红景天苷+50 m M高糖处理组。用免疫印迹检测cleaved caspase-3和脑源性神经营养因子(BDNF)的表达,用ELISA方法检测培养基中BDNF的含量。结果原代培养的皮质神经元纯度为95%以上。免疫印迹结果表明,与对照组比,高糖可诱导cleaved caspase 3的表达,表明高糖可以诱导神经元凋亡。与单纯高糖处理组相比,红景天苷预处理可显著降低cleaved caspase 3的表达。同时,高糖降低培养基中BDNF含量,而红景天苷可以抑制此作用。结论红景天苷通过调节BDNF的表达和分泌,降低cleaved caspase 3的表达,进而减轻高糖所致的神经元损伤。 杨志华 宋忆 楚广品 邱平 彭文鹏 孟宪芳关键词:高糖 神经元 红景天苷 BDNF 21q21.1-21.3 microRNAs作用的研究进展 被引量:1 2018年 唐氏综合征(Down syndrome,DS)又称先天愚型或21三体综合征,发生率为1/1000~1/700,是导致人类智力发育障碍的最常见遗传性疾病。DS患儿通常表现为不同程度的智力低下、伸舌样痴呆,同时伴随着其它身体缺陷,如先天性心脏缺陷、胃肠系统异常、免疫系统缺陷、甲状腺疾病、骨缺损和泌尿生殖器系统缺陷等[1]。目前,越来越多的研究表明,人类21号染色体21q21.1-21.3位点转录的5种microRNA(miRNA):miR-99a、miR-125b-2、let-7c、miR-155和miR-802在神经系统及其他系统中发挥着重要作用[2]。本文就这5种miRNA作一简要综述,以使我们对其功能有更加清晰的认识。 胡岳 徐媛媛 郝燕 孟宪芳关键词:MIRNA 21号染色体 唐氏综合征